土壤淀粉酶（SoilAmylaseS-AL）試劑盒說明書

第第頁土壤淀粉酶（SoilAmylase，S-AL）試劑盒說明書土壤淀粉酶（SoilAmylase，SAL）試劑盒說明書微量法100T/48S注意：正式測定之前選擇23個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。測定意義：淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一類酶的總稱。土壤中的淀粉酶主要來自于微生物，是一種重要的酶制劑，廣泛應(yīng)用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)。測定原理：淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖，可與3,5二硝基水楊酸反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì)，在508nm處有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與還原糖量成正比。需自備的儀器和用品：天平、水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯。試劑的組成和配制：試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。試劑二：液體4mL×1瓶，4℃保存。若出現(xiàn)沉淀析出，需70℃加熱溶解后再用。試劑三：液體12mL×1瓶，4℃保存。測定操作表：對照管測定管土樣（g）0.020.02甲苯（μL）101025℃靜置15min試劑一（μL）11050試劑二（μL）60充分混勻，37℃震蕩1h，8000rpm，25℃，離心10min上清液（μL）100100試劑三（μL）100100充分混勻，90℃水浴5min，待冷卻后，于微量石英比色皿/96孔板中測定508nm吸光值，分別記為A對照管和A測定管，△A=A測定管A對照管。計(jì)算公式：a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.2525x0.034，R2=0.9917酶活單位定義：每g土樣每天催化生成1mg還原糖為一個(gè)酶活力單位。SAL（mg/d/g鮮重）=（△A+0.034）÷0.2525×V反總÷W÷T=10.464×（△A+0.034）÷WV反總：反應(yīng)體系總體積，0.11mL；T：反應(yīng)時(shí)間，1/24d；W：樣本質(zhì)量，g。b．用96孔板測定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.1263x0.034，R2=0.9917酶活單位定義：每g土樣每天催化生成1mg還原糖為一個(gè)酶活力單位。SAL（mg/d/g）=（△A+0.034）÷0.1263×V反總÷W÷T=20.928×（△A+0.