抗生素類藥物分析

關于抗生素類藥物分析

化學純度較低活性組分易發(fā)生變異穩(wěn)定性差3.來源4.抗生素的特點化學合成半合成生物合成（發(fā)酵）生產(chǎn)工藝復雜發(fā)酵過程不易控制，易受污染原因一、概述第2頁,共26頁，2024年2月25日，星期天鑒別：物理化學方法、微生物法檢查：水分、異常毒性、熱原、細菌內(nèi)毒素、降壓物質(zhì)等含量/效價測定：

微生物法：與臨床療效吻合，靈敏度高，但操作復雜費時；

理化方法：

準確度與專屬性較高，且操作簡便，但與臨床療效有偏差5.抗生素質(zhì)量分析一、概述第3頁,共26頁，2024年2月25日，星期天1.

化學結構包括青霉素類和頭孢菌素類青霉素類：6-APA為母核頭孢菌素類：7-ACA為母核中國藥科大學藥學院藥分教研室二、β–內(nèi)酰胺類第4頁,共26頁，2024年2月25日，星期天酸性較強（pKa2.5-2.8）臨床常用其堿金屬鹽（水溶性好）酸性(羧基)有多個手性碳旋光性青霉素類：苯環(huán)取代基頭孢菌素類：母核有共軛結構UV（共軛）干燥條件較穩(wěn)定，溶液不穩(wěn)定穩(wěn)定性(內(nèi)酰胺)2、主要理化性質(zhì)降解失效氧化劑、酸、堿酶、金屬離子、Δ青霉素二、β–內(nèi)酰胺類第5頁,共26頁，2024年2月25日，星期天1）羥肟酸鐵反應：

β–內(nèi)酰胺類羥肟酸顯色2）茚三酮反應

α-氨基藍紫色3）雙縮脲反應

β–內(nèi)酰胺類紫紅色4）光譜法（UV、NMR）5）色譜法（HPLC、TLC）NH2OH·HClNaOHFe3+H+茚三酮Δ

堿性酒石酸銅呈色反應3、鑒別二、β–內(nèi)酰胺類第6頁,共26頁，2024年2月25日，星期天二、β–內(nèi)酰胺類4、檢查聚合物有關物質(zhì)和異構體吸光度殘留溶劑結晶性第7頁,共26頁，2024年2月25日，星期天5、含量測定-----------碘量法（ChP2000）二、β–內(nèi)酰胺類原理：青霉素與頭孢菌素本身不與碘反應，但其堿性降解產(chǎn)物可消耗碘青霉素族頭孢菌素族NaOH水解4I2H+8I-I2+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6定量過量剩余第8頁,共26頁，2024年2月25日，星期天5、含量測定

-----------碘量法（ChP2000）反應分兩步進行：水解反應(按化學計算量進行)氧化-還原反應(無定量關系，受溫度、pH值和時間等因素影響，應嚴格控制反應條件并采用標準品平行對照測定)第9頁,共26頁，2024年2月25日，星期天5、含量測定

-----------碘量法（ChP2000）因樣品中雜質(zhì)會消耗碘，故應作空白試驗。加入樣品，不加堿；其余試劑（醋酸鹽緩沖液，碘液，硫代硫酸鈉）都要加堿。空白試驗:空白試驗與經(jīng)典空白試驗不同：第10頁,共26頁，2024年2月25日，星期天5、含量測定

-----------碘量法（ChP2000）含量％＝×

×

對照品％V樣空-V樣W對V對空-

V對W樣靈敏度高：樣品:碘=1:8反應條件、實驗操作要求高1份含量V對、V對空V樣、V樣空加試劑次序、反應時間、滴定速度相同特點：第11頁,共26頁，2024年2月25日，星期天5、含量測定

-----------電位配位滴定法（汞量法）原理：青霉素不與汞鹽反應，其堿性降解產(chǎn)物可與Hg2+絡和。Hg++2R-SH(RS)2Hg+2H+方法說明：

a、空白試驗與碘量法類似，加樣品，不加NaOHb、與碘量法相比，汞量法不需對照試驗第12頁,共26頁，2024年2月25日，星期天5、含量測定

-----------其他常用方法酸堿滴定法：應用廣泛硫醇汞鹽法HPLC法：應用廣泛咪唑HgCl2（λmax324～345nm）青霉素青霉烯酸硫醇汞鹽第13頁,共26頁，2024年2月25日，星期天1.

化學結構三、氨基糖苷類都是以氨基環(huán)醇與氨基糖縮合而成的苷；分子結構中都含有多羥基；均為堿性抗生素；鏈霉素第14頁,共26頁，2024年2月25日，星期天臨床應用其硫酸鹽堿性(氨基)（糖）：有多個手性碳旋光性(糖)水溶性溶解度(氨基、羥基)強酸、堿條件均可水解穩(wěn)定性(苷)2、主要理化性質(zhì)三、氨基糖苷類第15頁,共26頁，2024年2月25日，星期天3、鑒別三、氨基糖苷類茚三酮反應：具羥基胺類，α-氨基酸性質(zhì)鏈霉素+

水和茚三酮藍紫色鏈霉素N-甲基葡萄糖胺N-甲基葡萄糖胺（Elson-Morgan）反應：紅色水解對二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮OH-第16頁,共26頁，2024年2月25日，星期天OH-重排Fe3+8-羥基喹啉NaOBrOH-水解坂口（Sakaguchi）反應：(鏈霉胍特有）麥芽酚（Maltol)反應：(鏈霉糖特有）三、氨基糖苷類-------鑒別鏈霉素麥芽酚紫紅色鏈霉素鏈霉胍

橙紅硫酸鹽反應或α-萘酚第17頁,共26頁，2024年2月25日，星期天4、檢查-------------來源：發(fā)酵中產(chǎn)生BP:薄層色譜法（雜質(zhì)對照品法）要求：NC2≥2000，C2a峰和C2峰的分離度應符合要求，重復進樣RSD<2.0%三、氨基糖苷類鏈霉素中鏈霉素B的檢查慶大霉素C組分測定（系統(tǒng)適用性試驗）色譜柱：ODS流動相：

H2O-HAc-MeOH配制的庚烷磺酸鈉溶液(0.2M)，必要時調(diào)節(jié)甲醇的含量。檢測波長：

330nm（鄰苯二甲醛柱前衍生）第18頁,共26頁，2024年2月25日，星期天4、含量檢測三、氨基糖苷類氨基糖苷類含量檢測微生物法、HPLC法等第19頁,共26頁，2024年2月25日，星期天四、四環(huán)素類1.

化學結構第20頁,共26頁，2024年2月25日，星期天四、四環(huán)素類-OH：酸性N(CH3)2：堿性與酸、堿均可成鹽臨床多用鹽酸鹽兩性旋光性易發(fā)生異構化，降解等反應，性質(zhì)不穩(wěn)定穩(wěn)定性酚羥基、烯醇基與Ca2+、Mg2+絡合顯色與金屬離子絡合2、主要理化性質(zhì)UV和熒光第21頁,共26頁，2024年2月25日，星期天四、四環(huán)素類

2.

主要理化性質(zhì)堿性C環(huán)開環(huán)，形成內(nèi)酯異四環(huán)素弱酸性（pH2-6）A環(huán)C-4異構化差向四環(huán)素酸性（pH<2）C環(huán)脫水脫水四環(huán)素第22頁,共26頁，2024年2月25日，星期天四、四環(huán)素類AApH2.0~6.0差向異構體DDDCBBCBC脫水四環(huán)素類第23頁,共26頁，2024年2月25日，星期天異四環(huán)素OH-四、四環(huán)素類第24頁,共26頁，2024年2月25日，星期天四、四環(huán)素類

3.

鑒別1）濃硫酸反應2）FeCl3反應：