轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座

生物安全

Biosafety

動(dòng)、植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性紅河學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第1頁(yè)微生物特點(diǎn)個(gè)體小繁殖快數(shù)量大易變異分布廣泛生命力強(qiáng)輕易擴(kuò)散轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第2頁(yè)內(nèi)容提要（1）動(dòng)、植物用轉(zhuǎn)基因微生物發(fā)展概況；（2）動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)（受體微生物安全性評(píng)價(jià)、轉(zhuǎn)基因操作安全性評(píng)價(jià)、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)）；（3）植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)（受體微生物安全性評(píng)價(jià)、轉(zhuǎn)基因操作安全性評(píng)價(jià)、植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)、植物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)）；（4）動(dòng)、植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全管理（國(guó)外、國(guó)內(nèi)）。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第3頁(yè)動(dòng)、植物用轉(zhuǎn)基因微生物定義動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物主要包含動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因活疫苗和動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因活微生物飼料添加劑；植物用轉(zhuǎn)基因微生物是指經(jīng)過(guò)重組DNA技術(shù)研制，直接應(yīng)用于植物上含有殺蟲(chóng)、防病、固氮、調(diào)整生長(zhǎng)等作用微生物。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第4頁(yè)（一）轉(zhuǎn)基因微生物概況轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物研究與開(kāi)發(fā)起步于20世紀(jì)80年代初口蹄疫病毒是最早研究對(duì)象國(guó)際上發(fā)達(dá)國(guó)家對(duì)基因工程疫苗研究與開(kāi)發(fā)十分重視已相繼研制成功一些用于動(dòng)物疫病免疫預(yù)防用基因工程亞單位疫苗、基因工程重組活載體疫苗、基因缺失疫苗、DNA疫苗等轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第5頁(yè)1.轉(zhuǎn)基因微生物飼料添加劑酶制劑以基因工程研制能高效表示植酸酶重組畢氏酵母?？咕慕档突蛲耆鎿Q抗生素藥品。重組生長(zhǎng)激素轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第6頁(yè)2.基因工程亞單位疫苗利用體外表示系統(tǒng)（如大腸桿菌，酵母，動(dòng)物細(xì)胞，桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞等）表示病毒主要保護(hù)性抗原蛋白作為亞單位疫苗不但含有優(yōu)良安全性，而且便于規(guī)?；a(chǎn)利用非疫苗用蛋白作為抗原建立診療方法將能夠區(qū)分亞單位疫苗免疫動(dòng)物和自然感染動(dòng)物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第7頁(yè)包括動(dòng)物病原大多數(shù)禽、豬、牛等動(dòng)物病原體免疫原性蛋白（保護(hù)性抗原）FMDVVP1、狂犬病病毒囊膜蛋白G，AIVHA蛋白，偽狂犬病病毒囊膜糖蛋白gP50，新城疫病毒F和HN蛋白,傳染性法氏囊病毒VP2蛋白，傳染性胃腸炎病毒纖突蛋白，雞傳染性貧血病病毒衣殼蛋白（VP1）……….轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第8頁(yè)2.基因工程重組活載體疫苗

痘病毒、皰疹病毒、腺病毒或細(xì)菌作為載體含有常規(guī)弱毒疫苗全部?jī)?yōu)點(diǎn)便于構(gòu)建多價(jià)疫苗利用非疫苗用基因或其表示產(chǎn)物能夠建立判別診療方法

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第9頁(yè)利用痘病毒作為載體痘苗病毒數(shù)十種病原基因在痘苗病毒中進(jìn)行了表示，都顯示出不一樣程度免疫保護(hù)性。比較成功有表示狂犬病病毒G蛋白重組痘苗病毒和表示牛瘟病毒F和HA蛋白重組痘苗病毒疫苗

禽痘病毒（雞痘病毒、金絲雀痘病毒、鴿痘病毒）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第10頁(yè)新城疫病毒F和HN蛋白禽流感病毒HA和NP蛋白馬立克氏病毒gB糖蛋白禽白血病囊膜蛋白傳染性法氏囊病病毒VP2蛋白禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒囊膜蛋白火雞出血性腸炎病毒Hexon蛋白轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第11頁(yè)利用腺病毒作為載體當(dāng)前已經(jīng)有許多外源基因被插入腺病毒并得到表示SIV水皰性口炎病毒狂犬病病毒牛副粘病毒3型牛皰疹病毒I型牛冠狀病毒豬傳染性胃腸炎病毒轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第12頁(yè)利用皰疹病毒作為載體火雞皰疹病毒、偽狂犬病病毒、牛皰疹病毒I型和雞傳染性喉氣管炎病毒已完成動(dòng)物試驗(yàn)并顯示出良好前景重組皰疹病毒疫苗：口蹄疫病毒VP1基因，豬瘟病毒E2基因，豬繁殖與呼吸綜合癥病毒GP5基因，豬流感病毒HA基因重組偽狂犬病毒疫苗表示傳染性法氏囊病毒VP2基因重組馬立克氏病毒疫苗表示禽流感病毒HA基因重組傳染性喉氣管炎病毒疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第13頁(yè)利用細(xì)菌作為載體大腸桿菌沙門(mén)氏菌李氏桿菌當(dāng)前國(guó)際上基因工程疫苗研究與開(kāi)發(fā)熱點(diǎn)之一轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第14頁(yè)3.基因缺失疫苗

一類發(fā)展前景很好基因工程疫苗偽狂犬病基因缺失疫苗(雙基因和三基因缺失疫苗，如TK-/gG-、TK-/gE-、TK-/gC-和TK-/gE-/gI-等，并已商品化生產(chǎn)牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）TK基因缺失疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第15頁(yè)4.DNA疫苗DNA疫苗可誘導(dǎo)機(jī)體同時(shí)產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫已發(fā)覺(jué)DNA接種對(duì)許多病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)感染以及腫瘤預(yù)防都有一定效果轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第16頁(yè)其它疫苗可食性疫苗(利用轉(zhuǎn)基因植物)多表位疫苗T細(xì)胞疫苗RNA復(fù)制子疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第17頁(yè)基因工程疫苗產(chǎn)業(yè)化與應(yīng)用是當(dāng)前和今后發(fā)展趨勢(shì)

含狂犬病毒gB基因重組牛痘病毒疫苗，已在北美和歐洲廣泛應(yīng)用于預(yù)防野生動(dòng)物狂犬病TK和gE雙基因缺失偽狂犬病疫苗已在美國(guó)和大部分歐盟國(guó)家廣泛應(yīng)用于預(yù)防豬偽狂犬病和豬偽狂犬病根除計(jì)劃TK和gE雙基因缺失牛傳染性鼻氣管炎病毒疫苗也在許多國(guó)家使用，荷蘭于1998年5月在全國(guó)范圍內(nèi)推廣使用TK和gE雙基因缺失疫苗方便根除此病表示禽流感病毒HA基因重組雞痘病毒疫苗和表示新城疫病毒F基因重組雞痘病毒疫苗也已取得美國(guó)農(nóng)業(yè)部注冊(cè)，開(kāi)始產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第18頁(yè)2、國(guó)內(nèi)研發(fā)情況我國(guó)動(dòng)物用基因工程疫苗研究與發(fā)達(dá)國(guó)家之間沒(méi)有實(shí)質(zhì)性差距，而且取得了巨大進(jìn)展十五期間，國(guó)家863計(jì)劃在動(dòng)物用基因工程疫苗與診療試劑研究與開(kāi)發(fā)方面投入有所加強(qiáng)近幾年，我國(guó)動(dòng)物用基因工程疫苗研究展現(xiàn)出加速發(fā)展態(tài)勢(shì)，已經(jīng)有各種基因工程疫苗已經(jīng)問(wèn)世，并進(jìn)入安全性評(píng)價(jià)不一樣階段轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第19頁(yè)包括主要疫病禽流感病毒雞新城疫病毒禽傳染性喉氣管炎病毒雞傳染性法氏囊病病毒雞馬立克氏病病毒豬偽狂犬病病毒豬瘟病毒口蹄疫病毒豬繁殖與呼吸綜合征病毒豬圓環(huán)病毒2型豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌大腸桿菌豬囊蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第20頁(yè)第一個(gè)商品化疫苗——仔豬腹瀉大腸桿菌K88/K99二價(jià)基因工程疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第21頁(yè)已經(jīng)過(guò)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)，并取得農(nóng)業(yè)部新獸藥證書(shū)，進(jìn)入產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用階段基因工程疫苗

禽流感重組滅活疫苗禽流感重組雞痘病毒活載體疫苗傳染性喉氣管炎重組雞痘病毒活載體疫苗偽狂犬病基因缺失疫苗“O”型口蹄疫病毒基因工程疫苗

以新城疫病毒為載體重組禽流感疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第22頁(yè)已經(jīng)過(guò)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)疫苗豬生長(zhǎng)抑素基因工程疫苗馬立克氏病基因工程活載體疫苗豬囊蟲(chóng)核酸疫苗幼畜腹瀉雙價(jià)基因工程苗新城疫重組雞痘病毒基因工程疫苗動(dòng)物去勢(shì)疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第23頁(yè)進(jìn)入安全性評(píng)價(jià)不一樣階段產(chǎn)品越來(lái)越多，數(shù)量不停上升各類動(dòng)物疫病基因工程亞單位疫苗以禽痘病毒、偽狂犬病病毒、腺病毒為載體基因工程重組活載體疫苗細(xì)菌基因缺失疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第24頁(yè)飼料用轉(zhuǎn)基因微生物在我國(guó)也取得成功轉(zhuǎn)植酸酶酵母已經(jīng)過(guò)農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)，并已產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用近年來(lái)以轉(zhuǎn)基因植物為表示系統(tǒng)可食性疫苗也已成為我國(guó)研究熱點(diǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第25頁(yè)基因工程疫苗產(chǎn)業(yè)化和商品化是我國(guó)在這一領(lǐng)域發(fā)展方向怎樣提升基因工程疫苗免疫效力，到達(dá)或超出常規(guī)傳統(tǒng)疫苗免疫保護(hù)效果，以期在我國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防和控制中發(fā)揮作用，也是當(dāng)前和今后我國(guó)科學(xué)家所面臨主要任務(wù)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第26頁(yè)3.轉(zhuǎn)基因微生物農(nóng)藥殺蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因微生物轉(zhuǎn)基因病毒殺蟲(chóng)劑、轉(zhuǎn)基因Bt制劑、防病轉(zhuǎn)基因微生物。轉(zhuǎn)基因微生物肥料遺傳改良聯(lián)合固氮菌和根瘤菌。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第27頁(yè)1、安全評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)指標(biāo)要求安全評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

安全評(píng)價(jià)內(nèi)容及其技術(shù)指標(biāo)要求

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第28頁(yè)(1)安全評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1、是以促進(jìn)基因工程技術(shù)發(fā)展和應(yīng)用，同時(shí)保障人類健康和生態(tài)環(huán)境平衡為基本標(biāo)準(zhǔn)2、采取個(gè)案分析，實(shí)事求是標(biāo)準(zhǔn)3、從受體微生物安全性、基因操作安全性和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品安全性等三個(gè)方面內(nèi)容和對(duì)動(dòng)物、人類與環(huán)境安全性三個(gè)角度進(jìn)行評(píng)價(jià)（1）從動(dòng)物安全角度，著重評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品對(duì)靶動(dòng)物和非靶動(dòng)物安全性（2）從人類健康角度，著重評(píng)價(jià)對(duì)人類、畜禽以及形成食物鏈（食品）影響（3）從生態(tài)環(huán)境角度，著重評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品對(duì)自然生態(tài)環(huán)境和畜牧業(yè)生態(tài)環(huán)境影響轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第29頁(yè)4、包括到危害人類、動(dòng)物健康和生態(tài)環(huán)境平衡轉(zhuǎn)基因微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品，應(yīng)對(duì)其安全性進(jìn)行嚴(yán)格評(píng)價(jià)5、從事轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物研究機(jī)構(gòu)或個(gè)人應(yīng)逐層申報(bào)。國(guó)外企業(yè)在我國(guó)申請(qǐng)注冊(cè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品，應(yīng)按階段進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)6、農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)基因安全審評(píng)委員會(huì)僅負(fù)責(zé)對(duì)轉(zhuǎn)基因微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，所以經(jīng)過(guò)安全性評(píng)價(jià)（指取得生物安全證書(shū)）轉(zhuǎn)基因微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品，需申報(bào)獸用新生物制品進(jìn)行審批，取得獸用新生物制品證書(shū)后方能進(jìn)行商品化生產(chǎn)和應(yīng)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第30頁(yè)（2）安全評(píng)價(jià)內(nèi)容及其技術(shù)指標(biāo)要求

安全性評(píng)價(jià)總體內(nèi)容安全性評(píng)價(jià)階段及其要求試驗(yàn)方案

主要?jiǎng)游镉棉D(zhuǎn)基因微生物及其產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)相關(guān)技術(shù)資料

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第31頁(yè)1、安全性評(píng)價(jià)總體內(nèi)容受體微生物安全性評(píng)價(jià)與安全等級(jí)確實(shí)定（1）所用受體微生物(包含細(xì)菌、病毒)可接觸到環(huán)境（2）受體微生物生物學(xué)背景與特征學(xué)名和分類地位，分布、繁殖方式在環(huán)境中定殖、存活和傳輸能力與路徑及影響原因致病性和產(chǎn)生毒素及毒性物質(zhì)能力，在國(guó)內(nèi)外應(yīng)用情況（3）受體微生物對(duì)人類、動(dòng)物和其它微生物影響和潛在危險(xiǎn)程度，受體微生物受人類和動(dòng)物其它病原體侵染情況（4）受體微生物對(duì)生態(tài)環(huán)境影響和潛在危險(xiǎn)程度（5）受體微生物質(zhì)粒情況，發(fā)生遺傳變異可能性及其潛在危險(xiǎn)程度（6）對(duì)受體微生物監(jiān)測(cè)方法和監(jiān)控技術(shù)受體微生物安全性等級(jí)按《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理方法》（第二章）確定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第32頁(yè)基因操作安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容與等級(jí)確定

（1）目標(biāo)基因起源、結(jié)構(gòu)、免疫學(xué)與生物學(xué)功效和用途

（2）基因操作所用載體名稱、起源、特征與結(jié)構(gòu)、安全性，載體所帶抗性標(biāo)識(shí)基因及其特征（3）重組DNA分子結(jié)構(gòu)、構(gòu)建方法、復(fù)制特征和安全性（4）轉(zhuǎn)基因方法（5）目標(biāo)基因在受體微生物及宿主體內(nèi)表示及其遺傳穩(wěn)定性基因操作安全性等級(jí)按《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理方法》（第二章）確定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第33頁(yè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物遺傳工程體及其產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物遺傳工程體分子學(xué)與生物學(xué)特征（2）在自然界存活能力（3）遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到其它生物體能力和可能后果（4）與其它病原微生物重組能力和可能產(chǎn)生后果（5）遺傳工程體應(yīng)用目標(biāo)和范圍（6）對(duì)遺傳工程體應(yīng)有適當(dāng)監(jiān)測(cè)方法和監(jiān)控伎倆轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第34頁(yè)遺傳工程體及其產(chǎn)品對(duì)動(dòng)物安全性

在靶動(dòng)物和非靶動(dòng)物體內(nèi)生存前景對(duì)靶動(dòng)物和可能非靶動(dòng)物高劑量接種后影響與傳統(tǒng)產(chǎn)品相比較，其相正確安全性宿主范圍與載體漂移度免疫動(dòng)物與靶動(dòng)物以及非靶動(dòng)物接觸時(shí)排毒和傳輸能力遺傳工程體回復(fù)傳代時(shí)毒力返強(qiáng)能力對(duì)妊娠動(dòng)物安全性對(duì)免疫動(dòng)物子代安全性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第35頁(yè)遺傳工程體及其產(chǎn)品對(duì)人類安全性

人類接觸和感染可能性及其危險(xiǎn)性廣泛應(yīng)用后對(duì)人類潛在危險(xiǎn)性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第36頁(yè)遺傳工程體及其產(chǎn)品對(duì)生態(tài)環(huán)境安全性

遺傳工程體在環(huán)境中釋放范圍影響遺傳工程體在外界環(huán)境中存活、增殖和傳輸理化原因感染靶動(dòng)物和非靶動(dòng)物可能性或潛在危險(xiǎn)性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第37頁(yè)2、安全性評(píng)價(jià)階段及其要求中間試驗(yàn)環(huán)境釋放生產(chǎn)性試驗(yàn)安全證書(shū)申請(qǐng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第38頁(yè)（1）中間試驗(yàn)

項(xiàng)目名稱應(yīng)包含目標(biāo)基因名稱、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物及產(chǎn)品名稱、試驗(yàn)所在省（市、自治區(qū)）名稱和試驗(yàn)階段名稱四個(gè)部分，如表示雞新城疫病毒F基因重組雞痘病毒基因工程疫苗在江蘇省中間試驗(yàn)一份申請(qǐng)書(shū)中菌株不超出20個(gè)，且是由同一個(gè)受體微生物、相同目標(biāo)基因、相同基因操作所取得，而且每個(gè)轉(zhuǎn)基因菌株都應(yīng)有明確名稱或編號(hào)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第39頁(yè)試驗(yàn)地點(diǎn)不超出3個(gè)?。ㄊ?、區(qū)），每省不超出2個(gè)點(diǎn)試驗(yàn)動(dòng)物總規(guī)模（上限）大動(dòng)物（馬、牛）20頭中小動(dòng)物（豬、羊等）40頭禽類（雞、鴨等）200羽魚(yú)尾試驗(yàn)地點(diǎn)應(yīng)明確試驗(yàn)所在?。ㄊ?、自治區(qū)）、縣（市）、鄉(xiāng)、村試驗(yàn)?zāi)晗奁胀?~2年轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第40頁(yè)申報(bào)中間試驗(yàn)應(yīng)提供以下相關(guān)附件資料目標(biāo)基因核苷酸序列和推導(dǎo)氨基酸序列目標(biāo)基因與載體構(gòu)建圖譜試驗(yàn)地點(diǎn)位置圖和試驗(yàn)隔離圖試驗(yàn)設(shè)計(jì)（包含進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)主要指標(biāo)和研究方法等，如轉(zhuǎn)基因微生物穩(wěn)定性、競(jìng)爭(zhēng)性、生存適應(yīng)能力、外源基因在靶動(dòng)物體內(nèi)表示和消長(zhǎng)關(guān)系等）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第41頁(yè)（2）環(huán)境釋放

項(xiàng)目名稱應(yīng)包含目標(biāo)基因名稱、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物及產(chǎn)品名稱、試驗(yàn)所在?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）名稱和試驗(yàn)階段名稱四個(gè)部分，如表示雞新城疫病毒F基因重組雞痘病毒基因工程疫苗NF16和YF9在江蘇省環(huán)境釋放一份申報(bào)書(shū)中菌株不超出5個(gè)，且是由同一個(gè)受體微生物、相同目標(biāo)基因、相同基因操作所取得，每個(gè)菌株都應(yīng)有明確名稱或編號(hào)，并與中間試驗(yàn)階段相對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第42頁(yè)試驗(yàn)地點(diǎn)不超出3個(gè)?。ㄊ?、區(qū)），每省不超出3個(gè)點(diǎn)試驗(yàn)動(dòng)物總規(guī)模（上限）大動(dòng)物（馬、牛）100頭中小動(dòng)物（豬、羊等）500頭禽類（雞、鴨等）5000羽魚(yú)10000尾試驗(yàn)地點(diǎn)應(yīng)明確試驗(yàn)所在省（市、自治區(qū)）、縣（市）、鄉(xiāng)、村一次申請(qǐng)環(huán)境釋放期限普通為1~2年轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第43頁(yè)申請(qǐng)環(huán)境釋放應(yīng)提供以下相關(guān)附件資料目標(biāo)基因核苷酸序列和推導(dǎo)氨基酸序列目標(biāo)基因與載體構(gòu)建圖譜中間試驗(yàn)階段安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)總結(jié)匯報(bào)毒理學(xué)試驗(yàn)匯報(bào)（假如必要話）試驗(yàn)地點(diǎn)位置圖和試驗(yàn)隔離圖試驗(yàn)設(shè)計(jì)（包含進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)主要指標(biāo)和研究方法等，如轉(zhuǎn)基因微生物穩(wěn)定性、競(jìng)爭(zhēng)性、生存適應(yīng)能力、外源基因在靶動(dòng)物體內(nèi)表示和消長(zhǎng)關(guān)系等）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第44頁(yè)（3）生產(chǎn)性試驗(yàn)項(xiàng)目名稱應(yīng)包含目標(biāo)基因名稱、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物及產(chǎn)品名稱、試驗(yàn)所在?。ㄊ?、自治區(qū)）名稱和試驗(yàn)階段名稱四個(gè)部分，如表示雞新城疫病毒F基因重組雞痘病毒基因工程疫苗NF16在江蘇省生產(chǎn)性試驗(yàn)一份申報(bào)書(shū)只能申請(qǐng)1種動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物，且名稱應(yīng)與前期試驗(yàn)階段名稱和編號(hào)相對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第45頁(yè)試驗(yàn)地點(diǎn)應(yīng)在同意過(guò)環(huán)境釋放?。ㄊ?、自治區(qū)）進(jìn)行，但不能超出2個(gè)?。ㄊ?、區(qū)），每省不超出3個(gè)點(diǎn)試驗(yàn)動(dòng)物總規(guī)模（上限）大動(dòng)物（馬、牛）1000頭中小動(dòng)物（豬、羊等）10000頭（只）禽類（雞、鴨等）0羽魚(yú)100000尾試驗(yàn)地點(diǎn)應(yīng)明確試驗(yàn)所在?。ㄊ?、自治區(qū)）、縣（市）、鄉(xiāng)、村一次申請(qǐng)生產(chǎn)性試驗(yàn)期限普通為1~2年轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第46頁(yè)申請(qǐng)生產(chǎn)性試驗(yàn)應(yīng)提供以下相關(guān)附件資料目標(biāo)基因核苷酸序列和推導(dǎo)氨基酸序列目標(biāo)基因與載體構(gòu)建圖譜環(huán)境釋放階段審批書(shū)復(fù)印件中間試驗(yàn)和環(huán)境釋放安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)總結(jié)匯報(bào)食品安全性檢測(cè)匯報(bào)（假如必要話）目標(biāo)基因或動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物向環(huán)境中轉(zhuǎn)移情況匯報(bào)試驗(yàn)地點(diǎn)位置圖和試驗(yàn)隔離圖試驗(yàn)設(shè)計(jì)（包含進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)主要指標(biāo)和研究方法等，如轉(zhuǎn)基因微生物穩(wěn)定性、競(jìng)爭(zhēng)性、生存適應(yīng)能力、外源基因在靶動(dòng)物體內(nèi)表示和消長(zhǎng)關(guān)系等）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第47頁(yè)（4）安全證書(shū)申請(qǐng)

安全證書(shū)申請(qǐng)項(xiàng)目應(yīng)包含目標(biāo)基因名稱、轉(zhuǎn)基因微生物名稱，如表示雞新城疫病毒F基因重且雞痘病毒基因工程疫苗NF16安全證書(shū)一份申報(bào)書(shū)只能申請(qǐng)1種動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物，其名稱應(yīng)該與前期試驗(yàn)階段名稱或編號(hào)相對(duì)應(yīng)一次申請(qǐng)安全證書(shū)使用期限普通不超出5年轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第48頁(yè)申請(qǐng)安全證書(shū)應(yīng)提供以下相關(guān)附件資料目標(biāo)基因核苷酸序列和推導(dǎo)氨基酸序列目標(biāo)基因與載體構(gòu)建圖譜目標(biāo)基因分子檢測(cè)或判定技術(shù)方案重組DNA分子結(jié)構(gòu)、構(gòu)建方法；各試驗(yàn)階段審批書(shū)復(fù)印件各試驗(yàn)階段安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)總結(jié)匯報(bào)目標(biāo)基因或轉(zhuǎn)基因微生物向環(huán)境中轉(zhuǎn)移情況匯報(bào)穩(wěn)定性、生存競(jìng)爭(zhēng)性、適應(yīng)能力等綜合評(píng)價(jià)匯報(bào)對(duì)非靶生物影響匯報(bào)食品安全性檢測(cè)匯報(bào)（假如必要話）該類動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物在國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)應(yīng)用概況其它相關(guān)資料轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第49頁(yè)3、試驗(yàn)方案

試驗(yàn)方案應(yīng)明確：試驗(yàn)所在地域及畜禽場(chǎng)名稱及其周圍環(huán)境資料試驗(yàn)所在區(qū)域生態(tài)類型與動(dòng)物種類試驗(yàn)所在區(qū)域動(dòng)物疫病流行情況試驗(yàn)所在區(qū)域生態(tài)環(huán)境對(duì)遺傳工程體存活、繁殖、擴(kuò)散和傳輸有利或不利原因，尤其是環(huán)境中其它生物從遺傳工程體取得目標(biāo)基因可能性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第50頁(yè)有明確試驗(yàn)起止時(shí)間確定試驗(yàn)動(dòng)物、動(dòng)物數(shù)量和試驗(yàn)區(qū)域大小參加試驗(yàn)人員情況對(duì)應(yīng)隔離和環(huán)境監(jiān)控辦法轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第51頁(yè)提出用于監(jiān)測(cè)試驗(yàn)區(qū)域和周圍環(huán)境中遺傳工程體適當(dāng)方法和程序，監(jiān)測(cè)方法應(yīng)該敏感性高和特異性強(qiáng)詳細(xì)統(tǒng)計(jì)監(jiān)測(cè)結(jié)果，提出遺傳工程體及其產(chǎn)品穩(wěn)定生產(chǎn)工藝，包裝規(guī)格和貯存條件，明確遺傳工程體及其產(chǎn)品接種劑量和路徑，使用產(chǎn)品總量，剩下產(chǎn)品處理方法，提出試驗(yàn)動(dòng)物喂養(yǎng)和試驗(yàn)后處理方法，應(yīng)提出試驗(yàn)所在區(qū)域消毒辦法，提出試驗(yàn)實(shí)施過(guò)程中出現(xiàn)意外事故應(yīng)急辦法，明確試驗(yàn)結(jié)束后監(jiān)控辦法和年限轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第52頁(yè)4、主要?jiǎng)游镉棉D(zhuǎn)基因微生物及其產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)相關(guān)技術(shù)資料

基因工程亞單位疫苗和基因工程滅活疫苗重點(diǎn)評(píng)價(jià)受體微生物、基因操作、重組微生物安全性，其產(chǎn)品本身安全性不存在問(wèn)題利用重組微生物、基因缺失微生物制備基因工程滅活疫苗應(yīng)重點(diǎn)評(píng)價(jià)受體微生物、基因操作和轉(zhuǎn)基因微生物安全性，基因重組和基因缺失對(duì)受體微生物致病性及其表型可能造成影響、轉(zhuǎn)基因微生物安全性（亞單位疫苗或滅活疫苗可經(jīng)過(guò)中間試驗(yàn)后，直接申報(bào)安全證書(shū)）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第53頁(yè)基因工程重組活載體疫苗應(yīng)重點(diǎn)評(píng)價(jià)受體微生物、基因操作和重組微生物及其產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)內(nèi)容：重組微生物穩(wěn)定性、重組微生物中外源基因穩(wěn)定性、外源基因在免疫動(dòng)物體內(nèi)表示和消長(zhǎng)情況、重組微生物對(duì)免疫動(dòng)物安全性及對(duì)環(huán)境安全性等（利用已知載體研制基因工程重組活載體疫或者可跨越環(huán)境釋放或生產(chǎn)性試驗(yàn)，而申請(qǐng)安全證書(shū)）

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第54頁(yè)基因缺失活疫苗應(yīng)重點(diǎn)評(píng)價(jià)祖代微生物、基因操作和缺失微生物及其安全性安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)內(nèi)容：缺失微生物穩(wěn)定性、缺失微生物致病性和對(duì)免疫動(dòng)物安全性、缺失微生物與野生型微生物重組可能性、基因缺失微生物排毒和傳輸能力及其對(duì)環(huán)境安全性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第55頁(yè)DNA疫苗應(yīng)評(píng)價(jià)質(zhì)粒DNA安全性重組質(zhì)粒DNA在免疫動(dòng)物體內(nèi)存留時(shí)間與對(duì)宿主染色體或基因影響與宿主染色體整合潛在可能性DNA疫苗免疫接種時(shí)局部反應(yīng)性和全身性毒性DNA疫苗潛在致腫瘤性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第56頁(yè)（三）國(guó)內(nèi)外安全管理情況

國(guó)外對(duì)包括基因操作制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物及其產(chǎn)品（基因工程疫苗）安全性也十分重視美國(guó)和歐洲一些國(guó)家即使沒(méi)有設(shè)置專門(mén)評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)和管理機(jī)構(gòu)，但在評(píng)價(jià)這類產(chǎn)品安全性方面，增設(shè)了與轉(zhuǎn)基因安全相關(guān)評(píng)價(jià)內(nèi)容和要求，在進(jìn)行疫苗評(píng)審時(shí)一同進(jìn)行審查轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第57頁(yè)我國(guó)十分重視農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理，將轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物（疫苗等）安全管理納入國(guó)家農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理范圍，頒布了相關(guān)管理法規(guī)和條例，在國(guó)家農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因安全評(píng)價(jià)委員會(huì)設(shè)置了動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全評(píng)價(jià)小組，對(duì)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，同時(shí)與我國(guó)農(nóng)業(yè)部新生物制品評(píng)審相銜接轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第58頁(yè)（四）案例分析以基因工程活載體疫苗——（表示傳染性喉氣管炎病毒gB基因重組雞痘病毒基因工程疫苗）為例轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第59頁(yè)（一）安全性評(píng)價(jià)及其依據(jù)受體微生物安全性評(píng)價(jià)基因操作安全性評(píng)價(jià)動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)

參考《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理方法》附錄“動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)”,逐條進(jìn)行評(píng)價(jià)和表述，并提出安全性評(píng)價(jià)依據(jù)

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第60頁(yè)關(guān)于受體微生物——雞痘病毒雞痘病毒S-FPV-017疫苗株，廣泛應(yīng)用，有長(zhǎng)久應(yīng)用安全統(tǒng)計(jì)對(duì)人類健康或生態(tài)環(huán)境沒(méi)有危害

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第61頁(yè)關(guān)于基因操作所包括載體、開(kāi)啟子、目標(biāo)基因已在國(guó)內(nèi)外試驗(yàn)室廣泛使用，均含有科學(xué)試驗(yàn)數(shù)據(jù)和良好長(zhǎng)久安全應(yīng)用統(tǒng)計(jì)，所構(gòu)建轉(zhuǎn)移載體不帶危險(xiǎn)性標(biāo)識(shí)基因和匯報(bào)基因，導(dǎo)入受體微生物后，不帶標(biāo)識(shí)基因而僅帶匯報(bào)基因，使受體微生物取得了表示雞傳染性喉氣管炎病毒gB基因抗原新特征，這種遺傳性狀改變對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境沒(méi)有不利影響轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第62頁(yè)關(guān)于重組雞痘病毒S-FPV-017株病毒和重組病毒免疫雞，表現(xiàn)相同安全性，致病性沒(méi)有增加重組雞痘病毒在雞胚連續(xù)傳10代，對(duì)雞毒力及免疫力沒(méi)發(fā)生變異轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用微生物安全性評(píng)價(jià)專家講座第63頁(yè)（二）各階段安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容

申報(bào)中間試驗(yàn)、環(huán)境釋放和生產(chǎn)性試驗(yàn)，申報(bào)單位需要提出進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)內(nèi)容，作為基因工程活載體疫苗，重點(diǎn)應(yīng)對(duì)以下內(nèi)容進(jìn)行評(píng)價(jià)，并設(shè)計(jì)相關(guān)試驗(yàn)方案轉(zhuǎn)基因