紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定

第第頁紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定[目的要求]1、學習和把握用紫外分光光度法定性的原理和方法。2、學習紫外分光光度計的使用方法，了解基本結構，把握紫外分光光度法定量的原理和方法。[基本原理]紫外分光光度法其比較緊要的用途是用于有機化合物的定性和定量分析方面。由于很多有機化合物及其衍生物在紫外波段有強的汲取光譜，可以把未知試樣的紫外汲取光譜圖和標準試樣（或與標準準圖譜）比較，當濃度和溶劑相同時，若兩者的譜圖相同（峰、微小值和拐點的λ相同），而且未知樣品大體已知時，可以說明它們是同一個化合物。但是在紫外和可見光區(qū)域，這些特征的峰、微小值和拐點的數(shù)目往往是有限的，且紫外汲取光譜的汲取峰還較寬，兩種不同的化合物可能有相同的紫外汲取光譜，對于完全未知的有機化合物，有時可以通過改換溶劑和適當?shù)幕瘜W處理之后所得的未知標準光譜對比，不僅比較λ，還要比較它們的λmax和A，來進一步確證，甚至還要進一步借助紅外、核磁和質譜等手段才能*后得出結論。紫外分光光度法進行定量分析是有快速，靈敏度高及分析混合物中各組份有時不需要事前分別，不需要顯色劑，因而不受顯色劑溫度及顯色時間等因素的影響，操作簡便等優(yōu)點。目前廣泛用于微量或痕量分析中。但有一個局限性，就是待測試樣必需在紫外區(qū)有汲取并且在測試濃度范圍服從比耳定律才行。利用紫外光度法測定試樣中單組份含量時，通常先測定物質的汲取光譜，然后選擇*大汲取峰的波上進行測定。其原理與一般比色分析相同?？捎脴藴使ぷ髑€法。假如通過試驗證明，在測定條件下符合比耳定律，也可以不用標準曲線而與標準品的已知濃度溶液比較求出未知樣品濃度。[儀器與試劑]751G型，752型及53WB型紫外可見分光光度計；1cm石英比色皿未知物1—環(huán)己烷溶液；未知物2—環(huán)己烷溶液；未知物3—乙醇溶液；未知物4—乙醇溶液；萘的標準溶液：（1）1mg/mL的標準萘溶液：精準稱取50毫克色譜純的萘于小燒杯中，以無水乙醇溶液溶解后定量移入50毫升容量瓶中，以無水乙醇稀至刻度，搖勻；（2）10μg/mL的標準萘溶液，由1mg/mL萘標液精準稀釋100倍即成；（3）1μg/mL的標準萘溶液：由10μg/mL萘標液精準稀釋10倍即成。[試驗步驟]1、以試樣的溶劑為參比對未知芳香化合物的溶液測定，其紫外汲取光譜波長一般從220nm—300nm。間隔自選（一般間隔1—2nm）。2、繪制出汲取曲線后從“UltraioletSpectraofAromaticCompounds”（芳香族化合物的紫外光譜）一書中的標準譜圖對比查出屬于何種有機化合物。3、以95%乙醇為參比溶液，用1cm石英比色皿對標準萘—乙醇溶液測定紫外汲取光譜，波段從210nm—230nm，只要找出*大汲取峰位置即可。4、在儀器上以*大汲取峰測定已知濃度的標準溶液。（1）用10mL帶塞比色管6支，配制濃度分別為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5μg/mL的標準溶液系列各10mL。（2）在分光光度計上以*大汲取峰波長（～220nm）測定標準系列的吸光度，濃度從低到高，記錄汲取值。5、對未知樣品進行測定。對幾個未知樣品中的萘含量進行測定時的條件應與標準系列一致。試樣中含量高，可用乙醇稀釋后測定。[結果處理]式中：C標、C樣—分別為標準液和試樣中萘的濃度；A標、A樣—分別為標準液和試樣液的吸光度；W樣—試樣重。[注意事項]