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第1節(jié)
植物細(xì)胞工程第二章
細(xì)胞工程欲培育地上長番茄和地下結(jié)馬鈴薯的“超級作物”。你有什么好妙招?
不同種生物之間存在著生殖隔離,所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點(diǎn)的。
于是,這些科學(xué)家試圖用這兩種植物的體細(xì)胞進(jìn)行雜交,來實(shí)現(xiàn)這一美妙的設(shè)想。——植物體細(xì)胞雜交技術(shù)思考×西紅柿土豆番茄-馬鈴薯(想象圖)(一)概念:
將不同來源的植物細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。融合實(shí)例+=白菜甘藍(lán)白菜-甘藍(lán)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)問題1:參考動(dòng)物細(xì)胞融合,若是植物細(xì)胞之間的雜交,則應(yīng)先做什么?得到雜種細(xì)胞后,如何培育成植株?植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(二)過程:1.去除細(xì)胞壁:B細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體去壁去壁A細(xì)胞方法原理目的用纖維素酶和果膠酶水解利用酶的專一性去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體植物體細(xì)胞雜交技術(shù)細(xì)胞壁細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)液泡細(xì)胞核
指的是脫去細(xì)胞壁的細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞也可看做是原生質(zhì)體。原生質(zhì)體成熟植物細(xì)胞的細(xì)胞膜、液泡膜和介于這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)。原生質(zhì)層【注意】質(zhì)壁分離的“質(zhì)”指的是原生質(zhì)層植物體細(xì)胞雜交技術(shù)區(qū)分原生質(zhì)體與原生質(zhì)層練習(xí)【變式】用酶解法制備原生質(zhì)體時(shí),需先用較________(填“高”、“低”)滲透壓的蔗糖溶液處理植物細(xì)胞,使細(xì)胞處于微弱的___________狀態(tài),然后用酶去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。通常在等滲或高滲溶液(有利于原生質(zhì)體的分離及防止原生質(zhì)體吸水脹破)中利用酶解法(加入纖維素和果膠酶)制備原生質(zhì)體高質(zhì)壁分離(二)過程:1.去除細(xì)胞壁:
原生質(zhì)體解密植物體細(xì)胞雜交技術(shù)2.誘導(dǎo)融合:B細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體去壁去壁A細(xì)胞正在融合的原生質(zhì)體融合是雜交過程中的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)(1)物理方法:
①電融合法
②離心法等(2)化學(xué)方法:
①聚乙二醇(PEG)融合法
②高Ca2+—高pH融合法方法原理:
細(xì)胞膜具有流動(dòng)性(二)過程:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)3.再生細(xì)胞壁:B細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體去壁去壁A細(xì)胞正在融合的原生質(zhì)體融合再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞(1)植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:融合的原生質(zhì)體重新產(chǎn)生細(xì)胞壁,形成雜種細(xì)胞。(2)直接參與細(xì)胞器:高爾基體問題2:細(xì)胞融合后,共有幾種細(xì)胞類型?符合要求的是哪種?(二)過程:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)3.再生細(xì)胞壁:(二)過程:問題3:細(xì)胞融合后,共有幾種細(xì)胞類型?符合要求的是哪種?若只考慮兩兩融合有三類:①未融合的細(xì)胞②兩兩融合的細(xì)胞③多細(xì)胞融合體AAABBB篩選AB植物體細(xì)胞雜交技術(shù)4.植物組織培養(yǎng):B細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體去壁去壁A細(xì)胞正在融合的原生質(zhì)體融合再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株脫分化再分化(1)細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志:培育成新植物體(二)過程:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)B細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體去壁去壁A細(xì)胞正在融合的原生質(zhì)體融合再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株脫分化再分化植物細(xì)胞融合植物組織培養(yǎng)細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性4.植物組織培養(yǎng):(二)過程:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)課本P36-383.原理:
4.兩個(gè)標(biāo)志:5.*意義:6.實(shí)例:白菜-甘藍(lán)、普通小麥-長穗偃麥草打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,培育植物新品種細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性
將不同來源的植物細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)1.概念:2.過程:植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是產(chǎn)生新的植株再生出新的細(xì)胞壁①植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:②植物體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志:培育成新植物體(相關(guān)細(xì)胞器:高爾基體、線粒體)書P38二、“番茄—馬鈴薯”超級雜種植株沒有如科學(xué)家所想象的那樣,地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯的主要原因是什么?生物基因的表達(dá)不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控、相互影響的,所以番茄—馬鈴薯雜交植株的細(xì)胞中雖然具備兩個(gè)物種的遺傳物質(zhì),但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)相互干擾,不能像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá)。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)練習(xí)(1)原生質(zhì)體融合時(shí)常用的化學(xué)法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。(
)(2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是得到雜種細(xì)胞。(
)(3)利用物理法或化學(xué)法可以直接將兩個(gè)植物細(xì)胞誘導(dǎo)融合。(
)(4)同一株番茄不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因型一定相同。()√雜種植株××原生質(zhì)體×不一定,如花粉細(xì)胞培養(yǎng)形成的愈傷組織細(xì)胞的細(xì)胞核中的基因只有體細(xì)胞的一半
合作探究一:根據(jù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的相關(guān)原理,小組合作思考討論完成問題。
3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)意義?2.雜種細(xì)胞的染色體數(shù)是多少?雜種細(xì)胞染色體組數(shù)是多少?1.植物體細(xì)胞雜交屬于哪種變異類型?4.植物體細(xì)胞雜交有何優(yōu)缺點(diǎn)?A植物的染色體數(shù)目為2n,基因型為AaBb;B植物的染色體數(shù)目為2m,基因型為CcDd?,F(xiàn)通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得這兩種植物的雜種植株,請回答下列問題:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)項(xiàng)目
體細(xì)胞雜交P1:2n(AaBb)與P2:2m(CcDd)生殖類型變異類型染色體數(shù)染色體組數(shù)基因組成無性繁殖,育種過程中不遵循孟德爾定律染色體(數(shù)目)變異兩親本染色體數(shù)之和(2n+2m)兩親本染色體組數(shù)之和(2+2)兩親本基因型之和(AaBbCcDd)植物體細(xì)胞雜交后代的遺傳變化雜種植株是不同于親本的新物種(與親本之間均存在生殖隔離)體細(xì)胞雜交即兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞不管染色體、基因組成還是染色體組都是兩親本之和AaBbCcDd(三)變異類型:植物體細(xì)胞雜交育種四倍體雜交育種誘導(dǎo)多倍體四倍體二倍體如何處理植株使其可育?看減數(shù)分裂聯(lián)會(huì)、配對能否正常進(jìn)行?、偃粲H本植株可育,
則雜種植株可育。②雜種植株是不同于
親本的新物種。(四)意義:打破生殖隔離,克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,培育植物新品種。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(五)優(yōu)缺點(diǎn):①優(yōu)點(diǎn)打破遠(yuǎn)緣親本雜交生殖隔離,擴(kuò)展雜交親本組合范圍。②缺點(diǎn)有可能雜交不成功,即使雜交成功也可能不產(chǎn)生人們想要的性狀。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)有關(guān)植物體細(xì)胞雜交的3個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)(1)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果只是形成雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果最終要經(jīng)過組織培養(yǎng)形成雜種植株。(2)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交屬于有性生殖。植物體細(xì)胞雜交過程中沒有有性生殖細(xì)胞的結(jié)合,因此不屬于有性生殖,應(yīng)為無性生殖。(3)誤認(rèn)為雜種植株的變異類型屬于基因重組。雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和,屬于異源多倍體,所以變異類型為染色體變異。
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)原理過程意義聯(lián)系細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織脫分化再分化根、芽或胚狀體植物體生長發(fā)育植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的比較植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B原生質(zhì)體A去壁原生質(zhì)體B去壁人工誘導(dǎo)融合的原生質(zhì)體AB雜種細(xì)胞AB愈傷組織脫分化再生細(xì)胞壁雜種植株再分化保持優(yōu)良性狀,繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)提高經(jīng)濟(jì)效益植物體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)克服不同種生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙植物體細(xì)胞的雜交技術(shù)植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)去除細(xì)胞壁再生細(xì)胞壁纖維素酶果膠酶植物細(xì)A、B原生質(zhì)體A、B融合的原生質(zhì)體雜種細(xì)胞原理:植物細(xì)胞的全能性外植體脫分化愈傷組織再分化(根、芽)完整植株物理法:化學(xué)法:電融合法、離心法等聚乙二醇(PEG)融合法等菊花的組織培養(yǎng)技術(shù)愈傷組織脫分化雜種植株再分化植物組織培養(yǎng)技術(shù)流程課堂小結(jié)練習(xí)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖如下:(1)圖中過程:①為____________,②為__________________,③為________,④為________。(2)獲得原生質(zhì)體時(shí),應(yīng)在______
(填“低滲”或“等滲”)溶液中進(jìn)行,理由是______________________________。(3)若只考慮細(xì)胞兩兩融合,經(jīng)過程②后可得到____種細(xì)胞,其中符合要求的細(xì)胞中含有____個(gè)染色體組。去除細(xì)胞壁再生出新的細(xì)胞壁脫分化再分化等滲低滲溶液中原生質(zhì)體易吸水漲破34練習(xí)白菜、甘藍(lán)均為二倍體,體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18。白菜—甘藍(lán)是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種,它具有生長期短、耐熱性強(qiáng)、易儲(chǔ)存等優(yōu)點(diǎn),如圖為“白菜—甘藍(lán)”的培育過程,請回答問題:(1)為了得到原生質(zhì)體,需先用__________________處理白菜和甘藍(lán)的細(xì)胞。(2)經(jīng)花粉直接培育的白菜—甘藍(lán)植株,體細(xì)胞的染色體數(shù)為________。這種植株是否可育_____(填“是”或“否”)。纖維素酶、果膠酶19否不含同源染色體,無法聯(lián)會(huì),故不育練習(xí)白菜、甘藍(lán)均為二倍體,體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18。白菜—甘藍(lán)是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種,它具有生長期短、耐熱性強(qiáng)、易儲(chǔ)存等優(yōu)點(diǎn),如圖為“白菜—甘藍(lán)”的培育過程,請回答問題:(3)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有多種,常用的化學(xué)方法是_____________________________________(填寫中文名稱,寫出兩種即可),融合完成的標(biāo)志是________________________________。聚乙二醇融合法、高Ca2+—高pH融
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