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1飼料中β-胡蘿卜素的測定高效液相色譜法GB/T6682-2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)5.2水：GB/T6682-2008，一級(jí)。5.6石油醚（沸程30℃~60℃)。5.11L-抗壞血酸乙醇溶液：稱取L-抗壞血酸0.5g，加4mL水加熱溶解，用無水乙醇稀釋至100mL混5.1250%氫氧化鉀溶液：稱取氫5.14標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（500μg/mL）：稱取全反式β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品（CAS：7235-40-7，純度不低于25.15標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（100μg/mL）：精確移取β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（5.136.2分析天平：感量分別為0.001g和0按GB/T20195制備試樣，至少200平行做兩份試驗(yàn)。稱取試樣配合飼料、精料補(bǔ)充料、濃縮飼料2g～5g或添加劑預(yù)混合飼料0.2g~），加熱超聲皂化20min，不時(shí)振蕩防止試樣粘附在瓶底和瓶壁上，皂化結(jié)束后取出迅速冷卻至室3準(zhǔn)溶液的液相色譜圖見附錄B。的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.999。試樣溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液中β-胡蘿卜素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍準(zhǔn)定量時(shí)，試樣溶液中β-胡蘿卜素的濃度與標(biāo)準(zhǔn)9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理）；C——從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試樣溶液中β-胡蘿卜素的濃度，單位為微克每毫升(μg/mLV1——旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時(shí)所用試樣提取液的體積，單位為毫升（mLV2——旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后復(fù)溶液的體積，單位為毫升（mLm——試樣質(zhì)量，單位為克（gAs）；A——試樣溶液中β-胡蘿卜素的峰面積；CS——標(biāo)準(zhǔn)溶液中β-胡蘿卜素的濃度，單位為微克每毫升(μg/mLV1——旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時(shí)所用試樣提取液的體積，單位為毫升（mLV2——旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后復(fù)溶液的體積，單位為毫升（mLm——試樣質(zhì)量，單位為克（g9.2結(jié)果的表示在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不大于該算術(shù)平均值的10%。5溶液濃度按式(A.1)計(jì)算:式中:X——β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度,單位為微克每毫升(μg/mL)；A——β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的紫外吸光值；E——β-胡蘿卜素
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