紫金四季草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程

1‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了‘紫金四季’草莓組培快繁技術(shù)規(guī)程的培養(yǎng)基配制、植株選擇與外植體處理、培養(yǎng)技術(shù)、種苗培育技術(shù)要求。本文件適用于‘紫金四季’草莓組培苗的生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T3032草莓脫毒種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4培養(yǎng)基配制4.1基本培養(yǎng)基與植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)母液B5、MS基本培養(yǎng)基購自商業(yè)化產(chǎn)品，培養(yǎng)基中大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)成分組成參見NY/T2306。植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)母液配制的濃度、方法、保存參見NY/T2306。4.2培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配方如下：誘導(dǎo)培養(yǎng)基：B5固體培養(yǎng)基+6-BA3.4mg/L+IBA0.3mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；伸長培養(yǎng)基：MS固體培養(yǎng)基+6-BA1.7mg/L+IBA0.15mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；增殖培養(yǎng)基：MS固體培養(yǎng)基+6-BA0.75mg/L+蔗糖3%+瓊脂6g/L~7g/L；生根培養(yǎng)基：1/2MS固體培養(yǎng)基+IBA0.003mg/L+葡萄糖1.0%+瓊脂6g/L~7g/L。4.3培養(yǎng)基配制與消毒滅菌培養(yǎng)基準(zhǔn)備、糖溶解、瓊脂溶化、定容、pH測定、分裝、封口、滅菌、冷卻、貯存等均參見NY/T2306。25植株選擇與外植體處理5.1植株選擇在6月~10月，選擇種植在栽培介質(zhì)（土、基質(zhì)等）未發(fā)生病蟲害、植株長勢強(qiáng)、營養(yǎng)生長期在100d以上、根頸部粗>1cm、葉片顏色深綠色的草莓植株作為取材對象。5.2外植體處理5.2.1洗滌劑處理匍匐莖或根頸在堿性洗滌劑中浸泡20min~40min，流水沖洗30min~60min，蒸餾水清洗2次~3次，轉(zhuǎn)至超凈工作臺。5.2.2消毒在超凈工作臺上，匍匐莖或根頸用75%乙醇浸泡15s，無菌水沖洗4次~6次。剝開匍匐莖頂端葉片或根頸處，選取匍匐莖莖尖或>1mm隱芽，0.8%次氯酸鈉溶液消毒（匍匐莖莖尖處理15min,隱芽處理10min無菌水沖洗4次~6次，無菌濾紙吸干；置入無菌培養(yǎng)皿中用無菌刀片切割，匍匐莖莖尖生長點(diǎn)取0.2mm~0.8mm，隱芽取0.5mm~3mm；若超出尺寸范圍，45°斜切。6培養(yǎng)技術(shù)6.1接種接種前期準(zhǔn)備（包括接種環(huán)境，接種盤、接種器械滅菌等）參見NY/T2306。在無菌的培養(yǎng)瓶中，將消毒處理后的外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，每瓶1個(gè)，并標(biāo)注外植體、接種日期、名稱。6.2培養(yǎng)6.2.1培養(yǎng)條件培養(yǎng)室內(nèi)溫度為(24±2)℃。暗培養(yǎng)，無光照；光培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶上部的光照強(qiáng)度為100μmol/(m2·s)~200μmol/(m2·s)，每日光照12h~16h。6.2.2誘導(dǎo)培養(yǎng)外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中暗培養(yǎng)14d后轉(zhuǎn)入光培養(yǎng)7d~14d，莖尖或隱芽萌發(fā)成芽，若芽<0.3cm，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。6.2.3伸長培養(yǎng)當(dāng)芽長至0.3cm~0.5cm，轉(zhuǎn)置于伸長培養(yǎng)基光培養(yǎng)，得到單芽或叢生芽，將芽叢切割成單芽，若單芽<1cm，在伸長培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。6.2.4增殖培養(yǎng)待單芽長至1cm~3cm，轉(zhuǎn)置于增殖培養(yǎng)基光培養(yǎng)，得到芽叢，將芽叢切割單芽，若單芽<3cm，繼續(xù)在增殖培養(yǎng)基中繼代，21d~28d繼代一次。6.2.5生根培養(yǎng)3待單芽長至3cm~5cm，取生長健壯、至少有3小葉的單芽移入生根培養(yǎng)基，暗培養(yǎng)7d后轉(zhuǎn)入光培養(yǎng)7d~21d，至根長1.5cm~3cm、2條幼根以上開始煉苗。6.2.6煉苗、移栽按照NY/T3032執(zhí)行。7