無菌操作技術(shù)

《生物產(chǎn)品的分析與檢驗(yàn)技術(shù)》項(xiàng)目一：生物產(chǎn)品分析與檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)

生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)教學(xué)資源庫主講人：張惠教學(xué)任務(wù)任務(wù)四、無菌操作（微生物）四、無菌操作（微生物）（一）幾個(gè)概念1、消毒用物理、化學(xué)或生物學(xué)方法殺死病原微生物稱為消毒。只對細(xì)菌的繁殖體有效，對于細(xì)菌芽孢無效。2、滅菌殺滅物體中或物體上說有微生物的繁殖體和芽孢的過程稱為滅菌。有物理滅菌法和化學(xué)滅菌法。四、無菌操作（微生物）3、防腐防止或抑制微生物生長繁殖的方法稱為防腐。某些藥劑在低濃度時(shí)是防腐劑，高濃度時(shí)是消毒劑。4、無菌及無菌操作無菌是指物體中沒有活的微生物存在。防止微生物進(jìn)入人體或物體的操作方法稱為無菌及說或無菌操作。四、無菌操作（微生物）（二）常用滅菌方法1、干熱滅菌法恒溫干燥箱滅菌酒精燈滅菌四、無菌操作（微生物）2、濕熱滅菌法A、巴氏消毒法B、煮沸消毒法C、間歇滅菌法（不耐熱的藥品，含血清的培養(yǎng)基）D、高壓蒸汽滅菌法四、無菌操作（微生物）3、過濾除菌法

曾經(jīng)遇到的一個(gè)問題：vc、硝酸銀這兩個(gè)物質(zhì)怎么加入高溫滅菌過的培養(yǎng)基？這兩個(gè)物質(zhì)加的時(shí)候肯定是以液體形式加進(jìn)去的，但是加之前肯要滅菌，那到底怎么滅菌怎么加？四、無菌操作（微生物）4、紫外線殺菌法紫外線波長200-300nm，其中以253.7nm最強(qiáng)，這與DNA吸收光譜范圍有一致。紫外線穿透能力不強(qiáng)，普通玻璃、塵埃均能阻攔紫外線，只能用于手術(shù)室、無菌室等空氣消毒。5、常用的消毒方法75%酒精、0.1%的氯化汞、雙氧水等四、無菌操作（微生物）（三）影響滅菌與消毒的因素1、不同的微生物對熱的抵抗力和消毒劑的敏感性不同。2、滅菌處理劑量對微生物的影響3、微生物污染程度對滅菌的影響4、溫度的影響5、濕度的影響四、無菌操作（微生物）6、酸堿度的影響7、介質(zhì)對滅菌的影響8、穿透條件的影響9、氧的影響四、無菌操作（微生物）（四）微生物培養(yǎng)

將微生物的純種或含有微生物的材料轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上的過程叫微生物接種。微生物培養(yǎng)：經(jīng)微生物接種后的培養(yǎng)基被放置在一定環(huán)境條件下，使微生物在培養(yǎng)基上生長繁殖。接種方法A平板畫線法B涂布平板C斜面接種D穿刺接種問題：平板畫線、涂布平板、斜面接種、穿刺接種有何合優(yōu)缺點(diǎn)？？？四、無菌操作（微生物）（四）微生物培養(yǎng)1）需氧培養(yǎng)：空氣必須經(jīng)過凈化或無菌處理；2）厭氧培養(yǎng)：除去培養(yǎng)基中的氧氣或使氧化還原電勢降低，培養(yǎng)過程中一直保持與外界氧隔絕以使厭氧微生