【生物】細胞工程復習課件 2023-2024學年高二生物下學期期中考點大串講人教版2019選擇性必修3

單元復習第2章

細胞工程內容網絡課標要求生命觀念:1.結合“菊花的組織培養(yǎng)”的實驗操作，嘗試設計植物組織培養(yǎng)技術的流程簡圖。2.用歸納與概括、演繹與推理等方法，用文字和圖示說明動物細胞培養(yǎng)的過程。3.以過程圖的形式表示受精作用和胚胎發(fā)育的過程。1.簡述植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交的原理和過程。2.運用穩(wěn)態(tài)與平衡觀，分析動物細胞培養(yǎng)的條件。3.哺乳動物在自然條件下受精和早期胚胎的發(fā)育規(guī)律是胚胎工程重要的理論基礎。闡述細胞的結構與功能的適應。1.查閱資料，嘗試探究植物生長素和細胞分裂素使用比例對植物組織培養(yǎng)的影響。2.對干細胞培養(yǎng)用于人類疾病治療等社會熱點問題進行科學評價?？茖W思維、科學探究:社會責任:考點CONTENTS01植物細胞工程技術02

植物細胞工程應用03動物細胞培養(yǎng)04動物細胞融合技術和單克隆抗體05動物體細胞核移植技術和克隆動物07

胚胎工程應用06胚胎工程技術PART01植物細胞工程技術無組織結構、松散的薄壁細胞團離體條件下已分化的細胞經過誘導，失去特有的結構和功能，重新獲得分裂能力考點一：植物細胞工程技術（植物組織培養(yǎng)）1.概念:是指將離體的植物器官、組織或細胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其形成完整植株的技術。外植體2.流程:接種外植體離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細胞脫分化誘導愈傷組織誘導生芽再分化愈傷組織能重新分化成芽、根等器官誘導生根移栽成活考點一：植物細胞工程技術（植物組織培養(yǎng)）脫分化再分化過程外植體→愈傷組織愈傷組織→幼苗分裂、分化有分裂，無分化有分裂，無分化結果形成愈傷組織形成根、芽需要條件a.離體、適宜的營養(yǎng)c.生長素與細胞分裂素的比例適中d.一般不需光a.離體、適宜的營養(yǎng)c.生長素與細胞分裂素的比例高或低誘導生根或生芽d.光照（誘導葉綠素的合成，使試管苗能夠進行光合作用。）

生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵激素。它們的濃度、比例都會影響植物細胞的發(fā)育方向。3.脫分化與再分化比較:考點一：植物細胞工程技術（植物組織培養(yǎng)）外植體愈傷組織試管苗完整植株脫分化芽、根等再分化關鍵激素生長素和細胞分裂素細胞分裂素生長素

芽分化愈傷組織根分化生長素用量/細胞分裂素用量結果比值≈1比值＞1比值＜1促進根的分化促進芽的分化促進愈傷組織的形成

巧記：高根低芽中愈傷4.決定植物脫分化、再分化的關鍵因素:有光時，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織?？键c一：植物細胞工程技術（植物組織培養(yǎng)）5.菊花的組織培養(yǎng):制備外植體接種培養(yǎng)試管苗移栽消毒：切割：（無菌操作）酒精30S無菌水2-3次次氯酸鈉溶液30min材料：幼嫩的菊花莖段2-3次無菌水洗①接種到誘導愈傷組織培養(yǎng)基形成愈傷組織（培養(yǎng)溫度：18-220C、避光）培養(yǎng)15~20天后，將生長良好的愈傷組織轉接到誘導生芽根的培養(yǎng)基上，進一步誘導形成試管苗。移栽前先打開封口膜或瓶蓋，讓試管苗在培養(yǎng)箱內生長幾日。用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基后，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長壯后再移栽入土。每天觀察并記錄幼苗的生長情況，適時澆水、施肥，直至開花。考點一：植物細胞工程技術（植物組織培養(yǎng)）例1．下圖是利用三倍體香蕉的莖尖培養(yǎng)脫毒香蕉植株的過程示意圖。下列敘述正確的是（）A．過程①~③中發(fā)生了有絲分裂和減數分裂B．對香蕉進行花藥培養(yǎng)可獲得單倍體C．過程②為脫分化D．X代表愈傷組織D考點一：植物細胞工程技術（植物體細胞雜交技術）1.概念:將不同來源的植物細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新植物體的技術。B細胞A原生質體B原生質體去壁去壁A細胞2.過程:去除細胞壁方法：用纖維素酶和果膠酶水解原理：利用酶的專一性誘導融合正在融合的原生質體融合方法：(1)物理方法：

①電融合法，

②離心法等(2)化學方法：

①聚乙二醇(PEG)融合法，

②高Ca2+—高pH融合法原理：細胞膜具有流動性再生細胞壁再生出細胞壁雜種細胞(1)植物細胞融合完成的標志:融合的原生質體重新產生細胞壁，形成雜種細胞。(2)直接參與細胞器:高爾基體考點一：植物細胞工程技術（植物體細胞雜交技術）植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交技術原理過程意義聯系細胞膜的流動性和植物細胞的全能性植物細胞的全能性離體的植物器官、組織或細胞愈傷組織脫分化再分化根、芽或胚狀體植物體生長發(fā)育植物細胞A植物細胞B原生質體A去壁原生質體B去壁人工誘導融合的原生質體AB雜種細胞AB愈傷組織脫分化再生細胞壁雜種植株再分化保持優(yōu)良性狀,繁殖速度快、大規(guī)模生產提高經濟效益植物體細胞雜交技術應用了植物組織培養(yǎng)技術克服不同種生物遠緣雜交的障礙3.

植物組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交技術的比較:考點一：植物細胞工程技術（植物體細胞雜交技術）例2．農業(yè)生產中，獲得異源多倍體植物的常見方式如下圖（A、B、C、D代表不同物種的一個染色體組），不正確的是（

）

A．圖中丙含有A和B兩個染色體組，因沒有同源染色體，不能正常聯會導致高度不育B．操作①常處理幼苗，獲得染色體組加倍的丁，恢復育性C．操作②常采用纖維素酶和果膠酶處理，過程③通過脫分化即可形成雜種植株辛D．方法一一般只能用于親緣關系較近的不同物種，方法二則能實現遠緣雜交育種CPART02植物細胞工程應用考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）1.快速繁殖:1.概念：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術，也叫微型繁殖。2.原理：植物細胞的全能性3.優(yōu)點：(1)高效、快速地實現種苗的大量繁殖。(2)保持優(yōu)良品種的遺傳特性。(3)不受自然生長季節(jié)的限制，培養(yǎng)周期短。(4)選材少，繁殖率高，便于自動化管理。4.生殖方式：一般為無性生殖快速繁殖經濟苗木、名貴花卉、珍稀瀕危植物等自然繁殖速度緩慢，繁殖效率低下或優(yōu)良性狀不易保持的植物。5.運用：考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）例3．菊科植物甜葉菊植株中甜菊糖含量豐富，甜菊糖是用糖行業(yè)青睞的新糖源。甜菊糖生產公司利用植物組織培養(yǎng)技術繁育甜葉菊，滿足用糖行業(yè)的生產需求。下列說法錯誤的是（

）A．快速繁殖甜葉菊利用了細胞全能性原理B．外植體需要用酒精和次氯酸鈉溶液消毒C．快速繁殖過程始終在無光照條件下進行D．微型繁殖技術的優(yōu)點是高效、快速和高保真C考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）2.作物脫毒:1.作物脫毒的原因：作物病毒積累取材：分生區(qū)（如莖尖、根尖：病毒極少，甚至無毒）(植物組織培養(yǎng))脫毒苗2.脫毒部位及方法：4.脫毒苗優(yōu)點：

脫毒作物的產量和品質明顯優(yōu)于沒有脫毒的作物3.原理：植物組織培養(yǎng)（全能性）5.脫毒作物實例：馬鈴薯、草莓、大蒜、甘蔗、菠蘿和香蕉等。脫毒苗≠抗毒苗考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）例4．超低溫冷凍脫毒法是先用超低溫對細胞進行選擇性破壞，再用組織培養(yǎng)技術獲得脫毒植株的方法。以馬鈴薯莖尖為材料，采用超低溫冷凍脫毒法可獲得脫毒苗。下列敘述錯誤的是（）A．用莖尖能夠獲得脫毒苗的原因是植物頂端分生區(qū)病毒極少或無病毒B．經超低溫冷凍脫毒培養(yǎng)的馬鈴薯比未脫毒的馬鈴薯抗病毒能力更強C．該技術利用了莖尖分生組織無成熟液泡不易形成冰晶的特性D．超低溫處理使大多數細胞都受到了損傷而死亡，存活下來的僅有生長點的分生組織細胞B考點二：植物細胞工程應用（作物新品種的培育）1.單倍體育種:有性雜交單倍體植株矮小且多為不育花藥離體培養(yǎng)優(yōu)良品種花藥花粉P單倍體純合二倍體誘導染色體加倍選擇F1考點二：植物細胞工程應用（作物新品種的培育）1.單倍體育種:花藥離體培養(yǎng)得到單倍體幼苗，秋水仙素處理抑制有絲分裂前期紡錘體的形成，染色體加倍得到穩(wěn)定遺傳（純合子）的優(yōu)良品種。1.過程:后代都是純合子，能穩(wěn)定遺傳明顯縮短育種年限，加速育種進程作為體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料3.優(yōu)點:染色體（數目）變異、植物細胞的全能性。2.原理:考點二：植物細胞工程應用（作物新品種的培育）1.單倍體育種:3.優(yōu)點:雜交育種單倍體育種紫色非甜玉米

AASS×白色甜玉米

aass紫色非甜玉米AaSs↓ASAsaSas花藥離體培養(yǎng)單倍體幼苗：ASAsaSas純合體:秋水仙素處理染色體加倍AASSAAssaaSSaass選擇紫甜玉米即為新品種P：紫色非甜玉米

AASS×白色甜玉米

aassF1紫色非甜玉米AaSs第1年×選育出紫甜的純種F2A_S_A_ssaaS_aass紫甜第2年第3年×生長A_ssF3第4年配子：P：考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）例5．為培育具有市場競爭力的無籽相橘，研究者設計如下流程。相關敘述錯誤的是（）A．過程①可使用纖維素酶和果膠酶處理B．過程②可用高Ca2+—高pH溶液處理C．過程③的原理是植物細胞具有全能性D．三倍體植株為可產生無籽柑橘的新物種D考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）2.突變體育種:組織培養(yǎng)時，由于培養(yǎng)的細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，易受培養(yǎng)條件和外界壓力（如射線，化學物質等）的影響而產生突變。3.原理：2.過程：外植體新品種篩選培育愈傷組織脫分化多種突變體誘導分化誘變處理基因突變和植物細胞的全能性。1.概念：4.優(yōu)點：5.缺點：提高變異的頻率，加速育種進程。大幅度地改良某些性狀。難以控制突變方向，有利性狀比較少，需要大量處理實驗材料。6.運用：抗花葉病毒的甘蔗、抗鹽堿的煙草等。考點二：植物細胞工程應用（植物繁殖的新途徑）例6．我國鹽堿地規(guī)模大，但主要糧食作物難以生長。下圖是某科研小組嘗試利用普通水稻（2n=24）培育耐鹽水稻新品種的育種方案，據圖分析錯誤的是（

）A．過程①屬于誘變育種，育種原理是基因突變B．秋水仙素作用于有絲分裂的后期，其原理是抑制著絲粒的分裂C．過程③是單倍體育種，其優(yōu)點是明顯縮短育種年限D．過程②多代自交、篩選的目的是提高純合子的比例BPART03動物細胞培養(yǎng)考點三：動物細胞培養(yǎng)1.概念：從動物體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后在適當的培養(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和增殖的技術。2.培養(yǎng)基：動物細胞培養(yǎng)所需的基本條件營養(yǎng)物質其他條件<<糖類氨基酸無機鹽維生素無菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境將細胞所需的營養(yǎng)物質按種類和所需量嚴格配制而成的培養(yǎng)基。含人類未知、細胞生長增殖所必需的物質，滿足細胞對未知營養(yǎng)成分的需求。培養(yǎng)基的構成：合成培養(yǎng)基+血清等天然成分一般使用液體培養(yǎng)基，也稱為培養(yǎng)液?？键c三：動物細胞培養(yǎng)3.培養(yǎng)條件：(1)無菌、無毒的環(huán)境：無菌①對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理②在無菌環(huán)境下進行操作無毒定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝物，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過程中的微生物污染(2)溫度、PH、滲透壓：多數動物細胞生存的適宜pH為________①適宜的溫度：36.5±0.5℃7.2-7.4維持細胞正常的形態(tài)和功能哺乳動物細胞培養(yǎng)的溫度多以___________為宜；維持適宜滲透壓的目的______________________②適宜的pH：③適宜的滲透壓：(3)氣體環(huán)境：動物細胞培養(yǎng)所需氣體主要有_____和______用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,在含有____________和__________的混合氣體的__________O2CO295%空氣5%CO2CO2培養(yǎng)箱①組成②培養(yǎng)儀器考點三：動物細胞培養(yǎng)分瓶取動物組織用機械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理分散成單個細胞加培養(yǎng)液制成細胞懸液原代培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中傳代培養(yǎng)細胞分裂受阻懸浮生長貼壁生長密度過大、有害代謝物積累和營養(yǎng)物質缺乏等原因接觸抑制原因解決辦法傳代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)取動物組織制成細胞懸液轉入培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4.過程：考點三：動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)前處理取材培養(yǎng)基的物理性質培養(yǎng)基的成分特有成分植物細胞的全能性細胞增殖離體用機械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶將組織細胞分散開離體植物器官、組織、細胞動物胚胎或幼齡動物的組織、器官固體液體(又稱培養(yǎng)液)有機營養(yǎng)成分無機營養(yǎng)成分植物激素糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等營養(yǎng)物質及一些天然成分如血清植物激素血清5.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較：考點三：動物細胞培養(yǎng)例7．對某種動物的肝腫瘤細胞進行細胞培養(yǎng)，下列敘述錯誤的是（）A．在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．動物細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是刺激細胞呼吸C．動物細胞培養(yǎng)過程中必須保證培養(yǎng)環(huán)境是無菌、無毒的D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清等天然成分B考點三：動物細胞培養(yǎng)（干細胞）1.干細胞概念和分布動物和人體內仍保留的少數具有分裂和分化能力的細胞。在一定條件下，干細胞可以分化成其他類型的細胞。存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血。2.干細胞類型和特點(1)胚胎干細胞：ES細胞分布特點局限性早期胚胎中具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題；因而限制了在醫(yī)學上的應用。分布特點成體組織或器官內具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織，不具有發(fā)育成完整個體的能力(2)成體干細胞：發(fā)現最早、研究最多的、應用最成熟的實例面臨的問題運用展望存在導致腫瘤發(fā)生的風險干細胞將在再生醫(yī)學、藥物安全性與有效性檢測等領域發(fā)揮大作用。考點三：動物細胞培養(yǎng)（干細胞）(3)誘導多能干細胞：iPS細胞①概念通過體外誘導小鼠成纖維細胞，獲得了類似胚胎干細胞的一種細胞，稱為誘導多能干細胞，簡稱iPS細胞②誘導及流程病人各種類型的細胞導入特定基因導入特定蛋白小分子化合物成纖維細胞T細胞B細胞iPS細胞分化取出移植③優(yōu)點④運用①誘導過程無須破壞胚胎②iPS細胞可來源于病人自身體細胞，移植回病人體內后，理論上可避免免疫排斥反應。①可治療鐮狀細胞貧血癥②在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領域的研究也取得了新進展⑤問題：存在著導致腫瘤發(fā)生的風險考點三：動物細胞培養(yǎng)（干細胞）例9.某學術期刊發(fā)表論文稱，利用人類多能干細胞培養(yǎng)的皮膚類器官在培養(yǎng)4～5個月后，形成了多層皮膚組織，包含毛囊、皮脂腺和神經元回路，是迄今最逼真的人皮膚類器官。下列相關敘述正確的是（

）A.多能干細胞形成多層皮膚組織的過程中，遺傳物質通常會發(fā)生改變B.多能干細胞培養(yǎng)形成多層皮膚組織，說明動物的體細胞具有全能性C.給燒傷病人移植自身多能干細胞培養(yǎng)成的皮膚類器官可減弱免疫排斥

反應D.該項研究結果表明多能干細胞可以分化成為人體內所需的各種組織和

器官CPART04動物細胞融合技術和單克隆抗體考點四：動物融合技術和單克隆抗體（動物細胞融合技術）1.概念2.原理3.誘導方法使兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的技術。細胞膜具有一定的流動性物理法：電融合法化學法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活病毒誘導法滅活：是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結構。原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞相互凝集，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。4.結果5.意義6.運用形成具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息的雜交細胞突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。為制造單克隆抗體開辟了新途徑。研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。至今，種間、屬間、科間，甚至動物和植物之間的細胞融合都已獲得成功?？键c四：動物融合技術和單克隆抗體（動物細胞融合技術）植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較植物體細胞雜交動物細胞融合原理

步驟酶解法去掉

后，誘導

融合，形成

，再經植物組織培養(yǎng)形成

。

分散成

后誘導細胞融合，形成

。

方法聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2＋—高pH融合法、電融合法、離心法PEG融合法、電融合法、

誘導法結果形成____________

形成

，以生產細胞產品意義打破生殖隔離，實現遠緣雜交育種突破有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能細胞膜的流動性細胞的全能性細胞膜的流動性細胞壁原生質體雜種細胞雜種植株單個細胞雜交細胞滅活病毒雜種植株雜交細胞考點四：動物融合技術和單克隆抗體（單克隆抗體及其應用）單克隆抗體雜交細胞雜交瘤細胞體外或體內培養(yǎng)第一次篩選骨髓瘤細胞

誘導融合分泌特異抗體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞群提取已免疫的B淋巴細胞動物細胞融合技術動物細胞培養(yǎng)技術特異性強靈敏度高可大量制備注射抗原選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)第二次篩選克隆化培養(yǎng)抗體檢測既能大量繁殖又能產生專一抗體1.作為診斷試劑——最廣泛應用具有準確、高效、簡易、快速特點2.用于治療疾病和運載藥物優(yōu)點：位置準確、療效高、副作用小考點四：動物融合技術和單克隆抗體（單克隆抗體及其應用）（1）該過程中應用到的技術_______________________________________（2）原理_______________________________________（3）注射特定抗原的目的___________________________________________________________________________（4）誘導融合方法______________________________________,動物細胞特有的方法為___________________動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)細胞膜具有一定的流動性、細胞增殖用特定抗原對小鼠進行免疫，并從該小鼠脾中得到產生特定抗體的B淋巴細胞PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導法滅活病毒誘導法（5）第一次篩選的目的______________________,第一次如何篩選___________________________

原理_________________________________________________________________________________篩選獲得雜交瘤細胞用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選選擇培養(yǎng)基上，未融合親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有雜交瘤細胞才能生長（6）雜交瘤細胞的特點__________________________________（7）第二次篩選的目的________________________________________________如何篩選___________________________________________________選擇抗體檢測呈___性的雜交瘤細胞，即_____________

_____________（8）抗體檢測原理_______________________________________獲得足夠數量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（進行多次篩選）分泌的抗體能與特定的抗原結合抗原和抗體能夠特異性結合(分子水平的鑒定）既能迅速大量增殖，又能產生抗體（9）如何獲取大量所需雜交瘤細胞__________________________________________（10）如何獲取單克隆抗體①體外培養(yǎng)_____________________，②小鼠腹腔內培養(yǎng)____________________（11）單克隆抗體優(yōu)點_________________________________________________________________________在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)(接種于培養(yǎng)液中)或注射到小鼠腹腔內增殖從細胞培養(yǎng)液中獲取從小鼠腹水中獲取能準確識別抗原細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結合，并且可以大量制備陽考點四：動物融合技術和單克隆抗體例10．新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合，侵入人體，引起肺炎。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。下圖為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關敘述，正確的是（）A．研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射刺突蛋白對小鼠進行免疫以獲得相應抗體B．在產生免疫反應的小鼠脾臟細胞中提取B淋巴細胞并誘導其與骨髓瘤細胞融合C．經HAT培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細胞經克隆化培養(yǎng)后可直接用于單克隆抗體的生產D．單克隆抗體可用來治療癌癥的原因是單克隆抗體能殺傷癌細胞BPART05動物體細胞核移植技術和克隆動物考點五：動物體細胞核移植技術和克隆動物1.概念：

將動物的一個細胞的細胞核，移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術。2.原理：3.生殖方式：動物細胞核的全能性無性生殖為什么非人靈長類動物體細胞核移植非常困難？原因一：供體的細胞核在去核卵母細胞中不能完全恢復其分化前的功能狀態(tài)，這導致了胚胎發(fā)育率低。原因二：非人靈長類動物胚胎進行操作的技術尚不完善。卵母細胞動物細胞去核取核移入重組細胞新胚胎克隆動物發(fā)育發(fā)育采集卵母細胞，在體外培養(yǎng)到MⅡ期從供體高產奶牛身上取體細胞顯微操作去核對體細胞進行培養(yǎng)去核的卵母細胞供體細胞電融合法將供體細胞注入去核的卵母細胞重構胚早期胚胎將胚胎移入受體（代孕）母牛體內生出與供體奶牛遺傳物質基本相同的犢牛早期胚胎培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)胚胎移植動物細胞融合動物細胞核移植技術細胞核移植動物細胞培養(yǎng)細胞融合體細胞核移植用到的技術早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植激活重構胚使其完成

細胞分裂和發(fā)育過程考點五：動物體細胞核移植技術和克隆動物1.采集的卵母細胞應培養(yǎng)至_____________________2.選擇MⅡ期卵母細胞的原因：①____________________________________②_________________________

③_________________________3.卵母細胞去核的方法_________________4.“去核”去的是什么？________________________5.去核的原因________________________________________________________MⅡ期（減數分裂Ⅱ中期）含有促進細胞核表現全能性的物質細胞體積大，易于操作顯微操作（去核）法紡錘體-染色體復合物卵母細胞內卵黃多，營養(yǎng)物質豐富使核移植得到的胚胎或動物核內遺傳物質全部來自有重要利用價值的動物6.供體細胞注入卵母細胞的優(yōu)點_____________________________7.誘導融合的方法____________________8.融合的結果______________________________9.重構胚概念_________________________________________對卵母細胞損傷較小注意：實質是直接將供體細胞注入去核卵母細胞的透明帶內電融合法供體核進入卵母細胞，形成重構胚人工重新構建的胚胎，具有發(fā)育成完整個體的能力10.激活重構胚的方法：①物理方法___________②化學方法___________________________________11.以上方法處理重構胚的目的_____________________________________________________12.實驗結論__________________________________________________電刺激Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑激活重構胚，使其完成細胞分裂和發(fā)育過程證明了動物已分化的體細胞的細胞核具有全能性考點五：動物體細胞核移植技術和克隆動物考點五：動物體細胞核移植技術和克隆動物例11．下列有關細胞工程的敘述，正確的是（）A．PEG是促細胞融合劑，可直接誘導植物細胞融合B．作物脫毒依據的原理是植物頂端成熟區(qū)附近幾乎無病毒C．骨髓瘤細胞經免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．核移植克隆的動物，其線粒體DNA同時來自核供體細胞和受體卵母細胞DPART06胚胎工程技術考點六：胚胎工程技術（理論）受精精子獲能受精前的準備卵子準備MⅡ期具備受精能力雌性動物的生殖道或培養(yǎng)到獲能液(肝素或Ca2+載體)中精子穿過卵細胞外結構精子接觸卵細胞膜精子入卵稱為雄原核；卵子釋放第二極體，形成雌原核雌雄原核靠近核膜消失桑葚胚受精卵每個細胞能發(fā)育成組成個體的任何細胞類型及胚外組織囊胚原腸胚卵裂細胞在透明帶內分裂，胚胎總體積并不增加孵化內細胞團滋養(yǎng)層組成個體的各種組織細胞胎盤、胎膜等胚外組織細胞外胚層內胚層中胚層考點六：胚胎工程技術（體外受精）卵母細胞成熟培養(yǎng)成熟卵母細胞精子獲能處理獲能的精子體外受精受精卵雌性哺乳動物雄性哺乳動物卵母細胞的采集精子的獲取MⅡ期卵母細胞離心：去除精清，以利于精子獲能(提取純度較高精子)在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程考點六：胚胎工程技術（胚胎移植）優(yōu)良供體母牛受體母牛受體發(fā)情同期發(fā)情處理超數排卵處理發(fā)情配種或人工受精胚胎移植收集胚胎并檢查對受體進行妊娠檢查具有優(yōu)良性狀的后代優(yōu)良公牛利用某些激素人為地控制并調整一群母畜發(fā)情周期的進程，使之在預定時間內集中發(fā)情。使他們處于相同的生理環(huán)境，這樣供體的胚胎移入受體后不會發(fā)生免疫排斥反應。注射外源促性腺激素誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子。沖卵排出早期胚胎問題1:什么是同期發(fā)情處理？問題2:同期發(fā)情處理的目的是什么？問題3:如何進行超數排卵？問題4:超數排卵的目的是什么？問題5:沖卵的目的是什么？正常繁殖或兩三個月后進行另一次移植考點六：胚胎工程技術（胚胎移植）（1）該過程中兩次使用激素：第一次對受、供體進行同期發(fā)情處理；第二次用于供體的超數排卵。（2）該過程中的兩次檢查：第一次對收集的胚胎進行檢查；第二次對受體母牛是否妊娠進行檢查。（3）胚胎移植成功與否要有兩個條件：