PE50對(duì)動(dòng)物腹瀉的藥效學(xué)研究

PE50對(duì)動(dòng)物腹瀉的藥效學(xué)研究目的探索PE50對(duì)動(dòng)物腹瀉的藥效和最佳治療劑量。方法PE50單次給藥急性毒性實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)選取昆明系小白鼠60只,采用按性別分層隨機(jī)方法進(jìn)行分組。以小鼠單次灌服PE50全死亡或90%死亡為最大劑量及10%以下死亡劑量為最小劑量,中間分別設(shè)3個(gè)劑量梯度進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì),從高到低依次為：實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ、實(shí)驗(yàn)組Ⅲ、實(shí)驗(yàn)組Ⅳ、實(shí)驗(yàn)組Ⅴ,以及溶媒對(duì)照組。用Bliss法計(jì)算LD50。PE50體外抑菌試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)采用紙片法測(cè)量PE50的抑菌圈直徑,采用試管法測(cè)量原阿片堿和別隱品堿的MIC和MBC值。PE50對(duì)小鼠細(xì)菌性腹瀉的藥效試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)采用昆明系小白鼠88只,采用按性別分層隨機(jī)方法進(jìn)行分組,將動(dòng)物分為實(shí)驗(yàn)組Ⅰ(高劑量組)、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ(中劑量組)、實(shí)驗(yàn)組Ⅲ(低劑量組)、實(shí)驗(yàn)組Ⅳ(陽(yáng)性藥物組)、實(shí)驗(yàn)組V(溶媒對(duì)照組)。采用腹腔注射的方法建立細(xì)菌性腹瀉模型,供試化合物和對(duì)照組藥物采用經(jīng)口灌胃給藥。試驗(yàn)依據(jù)每組動(dòng)物的稀便級(jí)數(shù),分析藥物對(duì)細(xì)菌性腹瀉的藥效。PE-50對(duì)小鼠蓖麻油所致腹瀉的藥效試驗(yàn)：選取健康成年昆明種小鼠42只,隨機(jī)分為7組：試驗(yàn)Ⅰ組(空白組)、試驗(yàn)Ⅱ組(溶劑對(duì)照組)、試驗(yàn)Ⅲ組(模型對(duì)照組)、試驗(yàn)Ⅳ組(PE-50高劑量組)、試驗(yàn)V組(PE-50中劑量組)、試驗(yàn)Ⅵ組(PE-50低劑量組)、試驗(yàn)Ⅶ組(陽(yáng)性藥物對(duì)照組),每組6只。灌胃蓖麻油建立腹瀉模型。測(cè)量PE50對(duì)各組小鼠稀便級(jí)的影響,分析其抗腹瀉的效果。PE-50對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能影響的藥效試驗(yàn)：選取健康成年昆明種小鼠24只,隨機(jī)分為4組,分別為試驗(yàn)Ⅰ組(正常對(duì)照組)、試驗(yàn)Ⅱ組(PE50高劑量組)、試驗(yàn)Ⅲ組(PE50中劑量組)、試驗(yàn)Ⅳ組(PE50低劑量組),每組6只。實(shí)驗(yàn)采用灌胃給藥。測(cè)量墨汁推進(jìn)率,分析PE-50對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能影響。PE-50對(duì)小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎的藥效試驗(yàn)：選取健康昆明種小鼠60只,隨機(jī)分為6組：試驗(yàn)組Ⅰ(空白組)、試驗(yàn)組Ⅱ(模型組)、試驗(yàn)組Ⅲ(陽(yáng)性藥物對(duì)照組)、試驗(yàn)組Ⅳ(PE-50高劑量組)、試驗(yàn)組Ⅴ(PE-50中劑量組)、試驗(yàn)組Ⅵ(PE-50低劑量組)。以自由飲用含5%DSS溶液建立結(jié)腸炎模型,所有試驗(yàn)動(dòng)物均采用灌胃的方式給藥。通過(guò)測(cè)量每只小鼠體重,大便性狀及出血級(jí)別,得出疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI),分析PE50對(duì)小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎的治療效果。PE50對(duì)仔豬腹瀉的藥效試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)分兩批進(jìn)行。第一批選取自然發(fā)病仔豬60頭,分為6組,別按43.6mg/kg·bw、21.8mg/kg·bw、10.9mg/kg·bw、5.5mg/kg·bw、2.8mg/kg·bw的劑量灌胃給藥,第二批選取該豬場(chǎng)自然發(fā)病的腹瀉保育仔豬50頭,分為5組(具體分組情況見(jiàn)表二),分別按21.8mg/kg·bw、10.9mg/kg·bw、5.5mg/kg·bw、1.4mg/kg·bw的劑量灌胃給藥。對(duì)照組用慶大霉素注射液肌肉注射進(jìn)行治療。PE50用藥組和對(duì)照組每天給藥一次,連續(xù)給藥7天,每記錄仔豬的精神狀況、采食情況和糞便,當(dāng)試驗(yàn)仔豬排糞次數(shù)恢復(fù)正常,糞便成型,軟硬適中；精神、食欲恢復(fù)正常,即判定為治愈。統(tǒng)計(jì)各組仔豬痊愈天數(shù),分析PE50對(duì)仔豬腹瀉的藥效。結(jié)果1、PE50單次給藥急性毒性實(shí)驗(yàn)：PE50的LD50為426.1mg/kg,毒性分級(jí)為中等毒。2、巴氏桿菌有和乙型溶血性鏈球菌對(duì)PE50中介敏感。3、PE-50對(duì)小鼠蓖麻油所致腹瀉的藥效試驗(yàn)：各給藥組的稀便級(jí)較試驗(yàn)Ⅲ組(模型對(duì)照組)低,且其中試驗(yàn)Ⅳ組(PE-50高劑量組)與試驗(yàn)Ⅲ組(模型對(duì)照組)有顯著差異(P<0.01),試驗(yàn)V組(PE-50中劑量組)、試驗(yàn)Ⅵ組(PE-50低劑量組)與試驗(yàn)Ⅲ組(模型對(duì)照組)有差異(P<0.05)。4、PE-50對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能影響的藥效試驗(yàn)：PE50高劑量組、PE50中劑量組與正常對(duì)照組相比,有顯著差異,說(shuō)明PE50對(duì)小腸小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)有促進(jìn)作用。5、PE-50對(duì)小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎的藥效試驗(yàn)：試驗(yàn)組Ⅳ(PE-50高劑量組)與試驗(yàn)組Ⅱ(模型組)有極顯著差異,而與試驗(yàn)組Ⅰ(空白組)無(wú)顯著差異,說(shuō)明PE-50極顯著地降低了小鼠的疾病活動(dòng)指數(shù),說(shuō)明PE-50對(duì)小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎有治療效果。試驗(yàn)組Ⅵ(PE-50低劑量組)與試驗(yàn)組Ⅱ(模型組)有顯著差異,與試驗(yàn)組Ⅰ(空白組)無(wú)顯著差異。PE-50對(duì)小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎有治療效果。6、PE50對(duì)仔豬腹瀉的藥效試驗(yàn)：綜合兩批實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出,PE-50在43.6mg/kg·bw、21.8mg/kg·bw、10.9mg/kg·bw、5.5mg/kg·bw的劑量使用時(shí),均對(duì)仔豬腹瀉有好的治療效果。其中,PE-50在10.9mg/kg·bw的劑量使用時(shí),相比其他PE-50試驗(yàn)組,劑量較低、療效較好。結(jié)論以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PE50對(duì)小鼠致病大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌所致細(xì)菌性腹瀉模型、小鼠蓖麻油致腹瀉模型、小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎模型和仔豬