SN 0850-2000進(jìn)出口蜂蜜中脯氨酸的測定方法分光光度法

中華人民共和國出人境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T0850—2000進(jìn)出口蜂蜜中脯氨酸的測定方法2000-06-22發(fā)布中華人民共和國國家出入境檢驗檢疫局發(fā)布本標(biāo)準(zhǔn)是按照GB/T1.1—1993《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1單元：標(biāo)準(zhǔn)的起草與表述規(guī)則第1部分：本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國國家出入境檢驗檢疫局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局負(fù)責(zé)起草。1中華人民共和國出人境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)出口蜂蜜中脯氨酸的測定方法Methodforthedeterminationofprolineinhoneyforimportandexport—Spectrophotometry本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)出口蜂蜜中脯氨酸含量的分光光度測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出口蜂蜜中脯氨酸含量的測定。2測定方法2.1方法提要蜂蜜中的脯氨酸與茚三酮作用生成棕色絡(luò)合物，用分光光度計在波長510nm處測定其吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。2.2.2異丙醇溶液：量取50mL異丙醇加水稀釋至100mL2.2.3茚三酮-乙二醇甲醚溶液：稱取3g茚三酮溶于100mL的乙二醇甲醚中(乙二醇甲醚：又稱溶纖2.2.4脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)品：純度≤99%。2.2.5脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液：精確稱取0.0250g脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)品用水溶解并定容至100mL。此溶液每毫升相當(dāng)于250pg的脯氨酸。2.2.6脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確移取1mL.脯氮酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液于10mL容量瓶中，用水定容，此溶液每毫升相當(dāng)于25pg的脯氨酸。分光光度計。2.4測定步驟2.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：準(zhǔn)確吸取脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00mL(相當(dāng)于0,5,10,15,20,25pg脯氨酸),分別移入具塞試管中，加水補(bǔ)充體積到1mL,分別加入0.25mL甲酸和1.0mL茚三酮-乙二醇甲醚溶液。蓋緊瓶塞，在沸水浴中加熱15min,取出，移入70℃恒溫水浴中繼續(xù)發(fā)色10min。加入5mL異丙醇溶液，放置5min后，在波長510nm處以試劑空白調(diào)節(jié)零點，測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。稱取5g試樣(精確至0.1g),用水溶解后定量地移入100mL容量瓶中，并加水稀釋至刻度，充分搖勻。準(zhǔn)確吸取樣品溶液(0.5～1.0)mL,移入具塞試管中，加水補(bǔ)充至體積1mL后，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制中華人民共和國國家出人境檢驗檢疫局2000-06-22批準(zhǔn)