DB4403T 405-2023 食源性致病菌快速檢測產(chǎn)品性能評價通用要求

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DB4403DB4403深 圳 市 地 方 標 準DB4403DB4403/T405—2023食源性致病菌快速檢測產(chǎn)品性能評價通用要求Generalrequirementsforperformanceevaluationofrapiddeterminationproductsoffoodbornepathogens2023-12-15發(fā)布 2024-01-01實施深圳市市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB4403/T405—2023前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由深圳市市場監(jiān)督管理局提出并歸口。本文件起草單位：深圳市計量質(zhì)量檢測研究院。IDB4403/T405—2023食源性致病菌快速檢測產(chǎn)品性能評價通用要求范圍本文件規(guī)定了食源性致病菌快速檢測定性產(chǎn)品（本文件適用于食品中快檢產(chǎn)品性能的技術(shù)評價，包括干片法、膠體金免疫層析法等原理的快速定性產(chǎn)品。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，（包括所有的修改單適用于本文件。GB4789.45—2023 食品安全國家標準 微生物檢驗方法驗證通GB19489 實驗室 生物安全通用要求GB/T27405 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢GB/T42233—2022 快速檢測 術(shù)語與定義術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。參考方法 referencemethod得到公認或廣泛接受的微生物傳統(tǒng)培養(yǎng)法。[來源：GB4789.45—2023，2.4]最低檢出水平 minimumdetectionlevel快檢產(chǎn)品預期所能檢出微生物的最低含量水平。注：對于有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，指增菌后預期所能檢出微生物的最低含量水平。排他性 exclusivitystudy快檢產(chǎn)品對非目標微生物的抗干擾能力。[來源：GB4789.45—2023，2.7，有修改]精密度 precision在規(guī)定條件下多次重復測試同一待測樣品時各測試結(jié)果彼此相符合的程度。[來源：GB/T42233—2022，4.7，有修改]1DB4403/T405—2023再現(xiàn)性 reproducibility[來源：GB/T42233—2022，4.12，有修改]盲樣 blindsample在評價過程中，使用的制備人已知詳細信息的，但其詳細信息對檢測人員保密的樣品。[來源：GB/T42233—2022，5.13，有修改]送評要求產(chǎn)品信息要求產(chǎn)品包裝快檢產(chǎn)品包裝應完整，內(nèi)容物（產(chǎn)品組成）齊全，包含產(chǎn)品合格證和中文使用說明書。中文標簽中文標簽清晰、規(guī)范，包括產(chǎn)品名稱、批號、規(guī)格、有效期、保存條件、注意事項、生產(chǎn)者、地址、聯(lián)系方式等。使用說明書產(chǎn)品安全性說明對于快檢產(chǎn)品，應在說明書的醒目位置清晰地標示出實驗廢棄物的處理方式，并且指出其在使用過程中的注意事項。生物類廢棄物根據(jù)病原分類選擇合適的處理方式。批次要求2個不同生產(chǎn)批號的產(chǎn)品，每批號不少于150個。1150其他要求快檢產(chǎn)品由生產(chǎn)商提供，送至評價機構(gòu)參加評價。送評樣品應為同一品種和規(guī)格的快檢產(chǎn)品，且有效期不少于三個月。產(chǎn)品如有儲藏、運輸要求的應按要求執(zhí)行。對于采用儀器法檢測的快檢產(chǎn)品，儀器由送評方提供，且具有有效的校準或檢定證明。對于需采用確認反應片或配套試劑的快檢產(chǎn)品，配套試劑和耗材應由送評方提供。評價要求2DB4403/T405—2023評價樣品要求陰性樣品陰性樣品應經(jīng)參考方法確認無目標菌。質(zhì)控樣品質(zhì)控樣品應為已知微生物濃度水平的樣品，具有較好的穩(wěn)定性，且經(jīng)過認證檢驗符合實驗的質(zhì)量標準。自然污染樣品天然原因造成污染的實物樣品，使用前應經(jīng)參考方法確認。能夠獲得自然污染樣品時，優(yōu)先選用自然污染樣品。人工污染樣品根據(jù)快檢產(chǎn)品使用說明書的實驗要求，稱取適量的陰性樣品，接種一定濃度的目標菌菌液混合而成。制備后的人工污染樣品應小心處理、保存，使樣品在評價前保持穩(wěn)定，并盡快進行測試。評價指標要求最低檢出水平測試樣品采用質(zhì)控樣品或人工污染樣品，有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，去除前增菌步驟。評價快檢產(chǎn)品時應根據(jù)使用說明書規(guī)定的適用范圍，選擇食品基質(zhì)的種類和子類。若其適用于21種類的食品，則應在該類食品中選擇至少2種不同子類的食品。代表性食品基質(zhì)的選擇參見GB4789.45—2023附錄A。3在每個水平下重復測試2次。其中中水平：接種量為預期最低檢出水平的10倍；低水平：將中水平接種物稀釋10LO10水平接種物；無接種物為陰性樣品。注：理論LOD50指定性方法檢出概率為50%時，樣品中目標微生物的濃度。陰性樣品不應獲得陽性結(jié)果，如果獲得陽性結(jié)果，則對所有水平進行重復實驗，若重復實驗仍25%的陽性結(jié)果，若未獲得陽性結(jié)果，則排他性使用純化后的非目標菌進行測試，在測試過程中不需要添加樣品基質(zhì)。測試菌株的純培養(yǎng)應是若廠家在說明書中已注明的交叉反應非目標菌在本標準排他性評價交叉反應非目標菌選擇指引中（見附錄A），則不對該菌進行排他性評價。3DB4403/T405—2023AA中4種及以上的非目標菌，優(yōu)先測試應驗證的非目標菌，接種水平為快檢產(chǎn)品最低檢出水平的10倍～100倍，每個評價人重復測試2次。若最終評價結(jié)果大于2種非目標菌產(chǎn)生交叉反應，則評價不通過。再現(xiàn)性再現(xiàn)性測試采用自然污染樣品或人工污染樣品。有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，去除前增菌步驟。制備的測試盲樣，優(yōu)先使用自然污染樣品。如沒有自然污染樣品，可以使用人工污染的樣品。評價快檢產(chǎn)品時應根據(jù)使用說明書規(guī)定的適用范圍，選擇基質(zhì)的種類和子類，具體要求見5.2.1.2。每種基質(zhì)至少需要在高、低和陰性3個不同水平完成測試，每個評價人在每個水平下重復測試5次。理想情況下，高水平恰好為最低檢出水平的50倍～100倍，低水平為最低檢出水平的5倍～10倍?？鞕z產(chǎn)品的假陽性率應不大于15%，假陰性率應不大于5%，精密度應不小于91%。評價流程評價前準備工作GB19489GB/T27405評價人員應先熟悉快檢產(chǎn)品的檢測原理、實驗方法等相關(guān)內(nèi)容，開展非目標菌的接種制備，陰性樣品，自然污染樣品，質(zhì)控樣品和目標菌接種制備人工污染樣品等準備驗證工作。應制定具體作業(yè)指導書或評價方案，保障評價結(jié)果準確可靠，應包括但不限于：評價工作要求；送樣要求；樣品管理；盲樣制備與檢查；評價內(nèi)容及依據(jù)；結(jié)論出具。盲樣基質(zhì)的選擇應根據(jù)食品安全監(jiān)管的需求，優(yōu)先選擇那些涉及食物中毒、有召回要求和具有潛在高風險危害的食品作為樣品基質(zhì)，具體要求見5.2.1.2。盲樣制備每一生產(chǎn)批號的快檢產(chǎn)品，按照快檢產(chǎn)品使用說明書取樣要求進行盲樣制備，其中包含陰性樣品和陽性樣品。注：陽性樣品包括質(zhì)控樣品、自然污染樣品或人工污染樣品。2評價檢測按照快檢產(chǎn)品使用說明書或儀器使用說明書的要求進行檢測，評價人員不少于2名。4DB4403/T405—2023結(jié)果判讀按照快檢產(chǎn)品使用說明書或儀器使用說明書的要求判讀結(jié)果。檢測時間按照快檢產(chǎn)品說明書要求取單個樣品，檢測時間從樣品前處理開始計時，記錄從前處理步驟至得出檢測結(jié)果整個過程的時間總和。對于有前增菌步驟快檢產(chǎn)品的檢測時間，需額外說明，加上前增菌時間。計算根據(jù)盲樣測試結(jié)果，計算該快檢產(chǎn)品的假陽性率、假陰性率及精密度，計算公式詳見表1。表1 性能指標的計算樣品情況檢測結(jié)果b總數(shù)陽性陰性陽性N11N12N1.=N11+N12陰性aN21N22N2.=N21+N22總數(shù)N.1=N11+N21N.2=N12+N22N=N1.+N2.或者N.1+N.2假陰性率（%）N12×100/N1.假陽性率（%）N21×100/N2.精密度（%）（N11+N22）×100/（N1.+N2.）注：N--任何特定單元的結(jié)果數(shù)，第一個下標指行，第二個下標指列。示例1：N11表示第一行，第一列，N12表示第一行，第二列。示例2：N1.表示所有的第一行；N.2表示所有的第二列。a由參考方法檢驗得到的結(jié)果。b由評價實驗得到的結(jié)果。結(jié)論快檢產(chǎn)品的最低檢出水平、排他性和再現(xiàn)性均滿足評價要求，則評價通過。有一項不滿足評價要求，則評價不通過。報告對評價整體情況和結(jié)果進行匯總整理和分析，評價報告應包括但不限于以下內(nèi)容：產(chǎn)品名稱、廠家、型號、批號、日期；盲樣性質(zhì)、基質(zhì)、接種水平；評價結(jié)果；檢測時間；評價結(jié)論。5DB4403/T405—2023附 錄 A（資料性）排他性評價交叉反應非目標菌選擇指引排他性評價中，交叉反應非目標菌的選擇指引，見表A.1。表A.1 排他性評價交叉反應非目標菌選擇指引交叉反應非目標菌金黃色葡萄球菌沙門氏菌屬大腸埃希氏菌O157單核細胞增生李斯特氏菌副溶血性弧菌蠟樣芽胞桿菌溶血性葡萄球菌■表皮葡萄球菌■人葡萄球菌■木糖葡萄球菌●沃氏葡萄球菌●山羊葡萄球菌●科氏葡萄球菌●糞腸球菌●陰溝腸桿菌■■奇異變形桿菌■■弗氏檸檬酸桿菌■■大腸埃希氏菌■●福氏志賀氏菌●●普通變形桿菌●●克氏檸檬酸桿菌●●楊氏檸檬酸桿菌●●銅綠假單胞桿菌●●肺炎克雷伯桿菌■斯氏李斯特氏菌■伊氏李斯特氏菌■英諾克李斯特氏菌■格氏李斯特氏菌●威氏李斯特氏菌●嬰兒雙歧桿菌●植物乳桿菌●干酪乳桿菌●溶藻弧菌■6DB4403/T405—2023表A.1 排他性評價交叉反應非目標菌選擇指引（