新高考生物一輪復(fù)習(xí)學(xué)案選擇性必修3-2-1細(xì)胞工程

選擇性必修③第二單元現(xiàn)代生物科技課堂互動(dòng)探究案1細(xì)胞工程考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程任務(wù)驅(qū)動(dòng)探究突破任務(wù)1對(duì)細(xì)胞工程概念的理解(1)原理和方法：細(xì)胞生物學(xué)和________________。(2)操作水平：____________________________。(3)目的：按照人的意愿來(lái)改變____________或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。(4)根據(jù)操作對(duì)象的不同分為兩類(lèi)：植物細(xì)胞工程和__________。任務(wù)2完善植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容(1)概念①培養(yǎng)對(duì)象：___________________________________________________。②培養(yǎng)條件：無(wú)菌、人工配制的培養(yǎng)基、相關(guān)激素等人工控制條件。③培養(yǎng)結(jié)果：產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成__________。(2)操作流程外植體eq\o(→,\s\up7())eq\x()eq\o(→,\s\up7())根、芽或胚狀體→試管苗任務(wù)3完善植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容(1)概念：將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成________，并把雜種細(xì)胞培育成______________的技術(shù)。(2)操作流程(3)流程分析①過(guò)程a為去除________以獲得具有活力的原生質(zhì)體，用到的酶是________________。②過(guò)程b是原生質(zhì)體的融合，其原理是______________________。③誘導(dǎo)b融合的兩種方法：物理法包括__________________________等；化學(xué)法一般用____________作為誘導(dǎo)劑。④過(guò)程c是原生質(zhì)體融合后再生出新的________。⑤過(guò)程d是__________技術(shù)，其原理是____________。(4)意義：________________________________________________________________________。任務(wù)4植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(,常利用莖尖等分生組織))(2)作物新品種的培育eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(單倍體育種,))(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：如人參皂甙干粉的生產(chǎn)。任務(wù)5比較植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別與聯(lián)系名稱(chēng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理__________細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞↓脫分化________↓再分化____________↓發(fā)育植物體選材選取根尖、莖尖、形成層部位最容易誘導(dǎo)脫分化________________________________技術(shù)操作____________除脫分化、再分化外，還要用酶解法去除細(xì)胞壁，用一定的方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合聯(lián)系____________是____________的基礎(chǔ)，____________所用的技術(shù)更復(fù)雜任務(wù)6比較單倍體育種和突變體利用的不同點(diǎn)項(xiàng)目原理優(yōu)點(diǎn)成果單倍體育種染色體變異明顯縮短育種年限單育1號(hào)煙草品種、中花8號(hào)、11號(hào)水稻和京花1號(hào)小麥品種等突變體的利用基因突變產(chǎn)生新基因，大幅度改良某些性狀抗花葉病毒的甘蔗、抗鹽堿的野生煙草等考向分類(lèi)對(duì)點(diǎn)落實(shí)eq\x(考向一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1．[2016·江蘇卷，9]下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是()A．PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B．用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂C．骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA來(lái)自供卵母體2．(多選)在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中，需要()A．用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞B．用選擇培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞C．用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合D．用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽3．[經(jīng)典高考]為了探究6－BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6－BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見(jiàn)下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表：回答下列問(wèn)題：(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的元素可分為_(kāi)_________和__________兩類(lèi)。上述培養(yǎng)基中，6－BA屬于__________類(lèi)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是__________，因變量是____________________________，自變量的取值范圍是__________。(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是__________號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入__________(填“6－BA”或“IAA”)。4．[經(jīng)典模擬]傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和用種子播種，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們開(kāi)始采用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖蘭花，其過(guò)程如圖所示：(1)植物組織培養(yǎng)是在__________和人工培養(yǎng)條件下，將__________的植物組織、器官、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的__________上，誘導(dǎo)其產(chǎn)生__________、叢芽，最終發(fā)育成完整植株的過(guò)程。(2)蘭花的葉肉細(xì)胞之所以能培養(yǎng)為新個(gè)體，是因?yàn)榧?xì)胞中含有__________________，具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，這種潛能叫__________。(3)請(qǐng)用簡(jiǎn)單的文字和箭頭，繪出①②③④之間的關(guān)系______________________________________________。(4)有人想到利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)解決蘭花生根速度慢、幼苗生存能力弱的好辦法，但操作后得到的“韭菜—蘭花”，并沒(méi)有預(yù)想中的“繁殖容易，香氣濃郁”，可能的原因是________________________________________________________________________。5．[經(jīng)典模擬]植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過(guò)程可用如圖所示圖解簡(jiǎn)單表示：(1)培育胚狀體利用了________________這一項(xiàng)生物技術(shù)，胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng)，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了________________。培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)外，還必須含有____________________等植物激素，還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的________。(2)如果愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需要培養(yǎng)到____________；若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到________。如果愈傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，通過(guò)基因工程要獲取抗蟲(chóng)棉，目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是____________法。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過(guò)程中，必須要經(jīng)過(guò)________。①無(wú)絲分裂②有絲分裂③減數(shù)分裂④原代培養(yǎng)⑤傳代培養(yǎng)⑥植物體細(xì)胞雜交⑦細(xì)胞融合⑧脫分化⑨再分化eq\x(考向二)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)6．[經(jīng)典高考]甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用__________酶和__________酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的__________，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合，形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成__________組織，然后經(jīng)過(guò)__________形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱(chēng)為_(kāi)___________________。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指____________________________________________，假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖，經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的____________________等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。7．[天津卷]DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本，利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢(shì)代謝類(lèi)型生長(zhǎng)速率[g/(L·天)]固體培養(yǎng)基上藻落直徑DHA含量(‰)A藻自養(yǎng)0.06小0.7B藻異養(yǎng)0.14大無(wú)據(jù)表回答：(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻______________________和B藻______________________的優(yōu)點(diǎn)。(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻，其目的是獲得______________________________。(3)通過(guò)以下三步篩選融合藻，步驟__________可淘汰B藻，步驟__________可淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落，再通過(guò)步驟__________獲取生產(chǎn)所需的融合藻。步驟a：觀察藻落的大小步驟b：用不含有機(jī)碳源(碳源——生物生長(zhǎng)的碳素來(lái)源)的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)步驟c：測(cè)定DHA含量(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn)，結(jié)果如下圖：①甲組條件下，融合藻產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器是________；丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是__________。②與甲、丙兩組相比，乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快，原因是在該培養(yǎng)條件下____________________________。甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高，但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件，其原因是__________________________________________________________________。8．[原創(chuàng)]選取A、B植株的細(xì)胞進(jìn)行如下圖的操作，請(qǐng)回答問(wèn)題：(1)實(shí)現(xiàn)圖中①過(guò)程最常用的方法是________。(2)②過(guò)程的發(fā)生，必須進(jìn)行________，其方法有________法和________法。(3)若細(xì)胞A內(nèi)含a個(gè)染色體，細(xì)胞B內(nèi)含b個(gè)染色體，則“雜種細(xì)胞”內(nèi)含________個(gè)染色體；若A、B植株采用常規(guī)雜交育種方法成功的話(huà)，得到的后代含________個(gè)染色體，必須用__________________來(lái)處理幼苗，才能得到可育的雜種植株，其中含有________個(gè)染色體。這兩種方法相比，體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是：________________________________。9．[2021·廣東省新高考適應(yīng)性測(cè)試]植物細(xì)胞工程技術(shù)在作物育種上具有廣泛的應(yīng)用。回答下列問(wèn)題：(1)植物組織培養(yǎng)技術(shù)：在________和人工控制的條件下，將離體的組織和細(xì)胞在特定培養(yǎng)基上先________得到愈傷組織，再分化得到胚狀體等，進(jìn)而得到新植株。該過(guò)程的原理是________________。(2)植物原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)：首先用________________酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段，轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中，在____________(填細(xì)胞器)的作用下再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、得到胚狀體，最終發(fā)育成完整的植株。(3)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：該技術(shù)是先用酶解法將兩種不同植物的細(xì)胞壁去除，再添加____________(填化學(xué)法)誘導(dǎo)兩種原生質(zhì)體相融合，再生出細(xì)胞壁后形成雜種細(xì)胞，經(jīng)組織培養(yǎng)技術(shù)得到雜種植株。該項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是____________________________________，該技術(shù)可能不會(huì)按照人們的意愿表達(dá)出雙親的優(yōu)良性狀，其原因可能是________________________________________。

考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞工程任務(wù)驅(qū)動(dòng)探究突破任務(wù)1完善動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖，并填空(1)與植物細(xì)胞培養(yǎng)相比，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程所用的培養(yǎng)基一般是______培養(yǎng)基，并加入______。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶，第一次的作用是將剪碎的組織分散成________；第二次是將貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上______下來(lái)，其目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的________現(xiàn)象。(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的______；O2的作用是促進(jìn)細(xì)胞________。任務(wù)2干細(xì)胞的種類(lèi)名稱(chēng)胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞類(lèi)別全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞專(zhuān)能干細(xì)胞特點(diǎn)具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類(lèi)型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能具有組織特異性，具有分化成多種細(xì)胞或組織的潛能，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力只能分化成某一種類(lèi)型或功能密切相關(guān)的幾種類(lèi)型的細(xì)胞，不能發(fā)育成完整個(gè)體來(lái)源或舉例早期胚胎(如桑葚胚或囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞)造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞等應(yīng)用用于病人的器官移植等治療白血病，惡性腫瘤放療、化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病(帕金森病、阿爾茨海默病等)任務(wù)3比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的不同點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞核移植原理________________________過(guò)程結(jié)果獲得________獲得________應(yīng)用①生產(chǎn)生物制品②用于基因工程③檢測(cè)有毒物質(zhì)①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良種繁育②保護(hù)瀕危物種③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白④提供克隆器官、組織等易錯(cuò)警示細(xì)胞工程的兩個(gè)總結(jié)(1)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程，但植物細(xì)胞可以先分裂再分化，而動(dòng)物細(xì)胞不分化只分裂。(2)克隆動(dòng)物的起點(diǎn)是經(jīng)過(guò)核移植后形成的重組細(xì)胞，其遺傳物質(zhì)主要來(lái)自供體，因此形成的個(gè)體性狀主要同供體，但也有部分性狀同受體。任務(wù)4比較植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的不同點(diǎn)植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性____________過(guò)程細(xì)胞A、B↓去壁原生質(zhì)體A、B↓融合融合的原生質(zhì)體↓再生壁雜種細(xì)胞↓植物組織培養(yǎng)雜種植株細(xì)胞A、B↓融合雜交細(xì)胞↓有絲分裂多個(gè)相同雜交細(xì)胞相關(guān)酶____________胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法物理法：離心、電激、振動(dòng)；化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外，還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果________________意義________________突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能任務(wù)5據(jù)圖完成下列各題圖1中，a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的B淋巴細(xì)胞，圖2為單克隆抗體制備的流程(順序已被打亂)。(1)由圖1分析：①誘導(dǎo)a、b兩種細(xì)胞融合的方法有聚乙二醇(PEG)、________、電激等；②a、b兩種細(xì)胞可發(fā)生融合，融合的原理是____________；③融合后形成圖中的d細(xì)胞，d細(xì)胞的特點(diǎn)是________________________；④由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比，具有__________________________等特點(diǎn)。(2)圖2B中小鼠注射的物質(zhì)是________，其目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)。(3)在獲取C細(xì)胞時(shí)，被篩選淘汰的細(xì)胞類(lèi)型有________________________，只有融合的__________才能生長(zhǎng)。(4)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)：考向分類(lèi)對(duì)點(diǎn)落實(shí)eq\x(考向一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的考查1．[經(jīng)典高考]下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．細(xì)胞系連續(xù)分裂的細(xì)胞大多具有二倍體核型B．某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C．由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D．未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀2．(多選)實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述正確的是()A．甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B．乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶處理C．丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D．丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性[題后歸納](1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因：幼齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖能力很強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶：第一次是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；第二次是將貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，其目的是避免動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。(4)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)①原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒(méi)有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。②傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖到一定時(shí)間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過(guò)大導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)枯竭，進(jìn)而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。3．[2021·四川成都棠湖中學(xué)高三月考]食品保鮮劑——青鮮素能抑制植物細(xì)胞生長(zhǎng)與分裂從而抑制發(fā)芽，被用于蔬菜的保鮮，但其殘留會(huì)損害人體健康。根據(jù)材料回答下列問(wèn)題。(1)青鮮素是人工合成的對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學(xué)物質(zhì)，屬于________________。(2)青鮮素殘留毒性可能會(huì)使____________________發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂失控而變成癌細(xì)胞。(3)科研人員以小兔為實(shí)驗(yàn)材料，用“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)”對(duì)青鮮素的毒害性進(jìn)行了檢測(cè)。①請(qǐng)完善檢測(cè)青鮮素毒性的實(shí)驗(yàn)：主要實(shí)驗(yàn)步驟：第一步：取大小相同的六只培養(yǎng)瓶編號(hào)為1～6，分別加入等量的相同培養(yǎng)液和小兔細(xì)胞。第二步：向1號(hào)培養(yǎng)瓶中加入生理鹽水，向2～6號(hào)培養(yǎng)瓶中分別加入________________________________________。第三步：培養(yǎng)一段時(shí)間后，取樣制成臨時(shí)裝片，用顯微鏡觀察，______________________，________________________。結(jié)果如下表：培養(yǎng)瓶編號(hào)123456添加劑中青鮮素濃度(mg/L)水103090270810變異細(xì)胞比例001/1061/1062/1068/106分析表中數(shù)據(jù)可得出結(jié)論：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②該實(shí)驗(yàn)檢測(cè)有毒物質(zhì)毒性的指標(biāo)是____________________________，所用培養(yǎng)液中需要加入的特殊營(yíng)養(yǎng)成分是____________。eq\x(考向二)體細(xì)胞克隆技術(shù)及應(yīng)用4．[2016·全國(guó)卷Ⅱ，40]下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_(kāi)_____________。過(guò)程①表示去除細(xì)胞核，該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用______________的方法。②代表的過(guò)程是______________。(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后，供體細(xì)胞中__________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是____________________________________________________。(4)與克隆羊“多利”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了____________________________________________________________。題后反思(1)克隆技術(shù)形成的重組細(xì)胞可發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性，而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(2)克隆屬于無(wú)性繁殖，產(chǎn)生新個(gè)體的性別以及絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。(3)核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀不完全相同：①克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核，但其核外線粒體中的DNA主要來(lái)自于受體卵細(xì)胞。②性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果。供核動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其性狀也不可能和供核動(dòng)物完全相同。③在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中有可能發(fā)生基因突變，產(chǎn)生供核動(dòng)物沒(méi)有的性狀。eq\x(考向三)單克隆抗體的制備及應(yīng)用5．(多選)下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是()A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用聚乙二醇有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群6．(多選)關(guān)于下面制備單克隆抗體過(guò)程示意圖的敘述，正確的是()A．①表示已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的B．②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)C．④中的篩選是通過(guò)抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的D．⑤可以無(wú)限增殖7．[全國(guó)卷Ⅰ，40]某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是__________小鼠，理由是________________________________________________________。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有__________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是__________________________________________________。(3)雜交瘤細(xì)胞中有__________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是__________條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是________________________________________________________________________。[題后反思]比較制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞細(xì)胞特點(diǎn)漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能無(wú)限增殖骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖8.[2021·黑龍江省大慶市鐵人中學(xué)高三模擬]CD3分子是輔助性T細(xì)胞表面的標(biāo)記分子，在抗原識(shí)別和免疫信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中具有重要的作用。利用抗CD3單克隆抗體阻斷免疫細(xì)胞活化信號(hào)傳導(dǎo)，可為防治器官移植排斥反應(yīng)與治療自身免疫性疾病提供新的方法和手段。下圖為獲取抗CD3抗體(Ab－3)的兩種方法，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)a過(guò)程為從小鼠的________中提取抗體；經(jīng)b、c、d過(guò)程獲得抗體相對(duì)于a過(guò)程獲得抗體的優(yōu)勢(shì)是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)b過(guò)程一般從小鼠的________(填器官)中分離免疫細(xì)胞，甲和乙試管中的細(xì)胞分別是____________和____________。(3)過(guò)程c需要在具有________作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，分離獲得的丙試管中細(xì)胞的特點(diǎn)是__________________________________________。(4)d過(guò)程是對(duì)丙試管中的細(xì)胞進(jìn)行____________和________________，以獲得足夠數(shù)量的能夠分泌抗CD3特異性抗體的細(xì)胞。9．[2021·重慶市開(kāi)州區(qū)鐵橋中學(xué)高三質(zhì)量檢測(cè)]用噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)獲得人的單克隆抗體，方法是將人抗體基因插入噬菌體載體，然后讓該噬菌體感染大腸桿菌，抗體可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式，附著在噬菌體表面，也可能通過(guò)大腸桿菌分泌出去?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)獲取人抗體基因時(shí)，可從人的________(填“B”“T”或“體”)細(xì)胞中獲取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增出抗體基因。在PCR反應(yīng)體系中，加入dNTP(dCTP、dATP、dGTP和dTTP)的作用是__________________________。(2)在噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程中，理論上可以不利用Ca2＋處理大腸桿菌，依據(jù)是________________________________________。(3)從噬菌體抗體庫(kù)中篩選特異性抗體的方法是________________，原理是______________________。(4)在抗體基因與噬菌體基因之間設(shè)計(jì)了一個(gè)終止密碼子(UAG)的對(duì)應(yīng)序列在終止密碼子突變型的菌株表達(dá)時(shí)，抗體基因的表達(dá)產(chǎn)物是____________(填“融合蛋白”或“分泌型抗體”)。(5)與利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體相比，用該技術(shù)省去了________________(步驟)，使制備更簡(jiǎn)單易行。[網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)提升][長(zhǎng)句應(yīng)答必備]1．植物組織培養(yǎng)的過(guò)程主要包括脫分化和再分化兩個(gè)階段，脫分化的結(jié)果是形成愈傷組織，再分化的結(jié)果是形成根和芽。2．植物體細(xì)胞雜交需要用酶解法制備原生質(zhì)體，所用的酶包括纖維素酶和果膠酶。3．無(wú)論是植物體細(xì)胞雜交，還是動(dòng)物細(xì)胞融合，都需要誘導(dǎo)。4．植物組織培養(yǎng)需要各種營(yíng)養(yǎng)成分和植物激素，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要各種營(yíng)養(yǎng)成分及血清。5．植物體細(xì)胞雜交可用于作物育種，動(dòng)物細(xì)胞融合可用于單克隆抗體的制備。6．產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，它既能產(chǎn)生單克隆抗體，又能無(wú)限增殖。[等級(jí)選考研考向]1．[2018·江蘇卷，22](多選)如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是()A．若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合B．a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C．c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D．c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因2．[2020·天津卷]某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種B的最佳激素配比(如表)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。品種B組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素濃度(μmol/L)生長(zhǎng)素濃度(μmol/L)Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織m1n1Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽m2n2Ⅲ誘導(dǎo)生根m3n3據(jù)表回答：(1)Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是__________________________________________。(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是________階段。(3)為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照品種B的激素配比(m1>2.0)，以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為_(kāi)_______μmol/L。(4)Ⅲ階段時(shí)，科研人員分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長(zhǎng)素處理品種A幼芽都能達(dá)到最佳生根效果，原因是處理幼芽時(shí)，選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為_(kāi)_______，選用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為_(kāi)_______________。(5)在________階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。3．[2020·江蘇卷]新型冠狀病毒可通過(guò)表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面，被________細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活該細(xì)胞。(2)B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經(jīng)過(guò)細(xì)胞的________，形成________________________細(xì)胞。(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測(cè)病毒的________；采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測(cè)________________________________________________________________________。(4)據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞，再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得________細(xì)胞。因?yàn)橥环N抗原可能激活________細(xì)胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。4．[2017·海南卷，31]甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是____________________________________________。(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到________________。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗，該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是____________________(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是______________________________。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)________形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時(shí)，________(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。[國(guó)考真題研規(guī)律]1．[2020·全國(guó)卷Ⅰ，38]為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。回答下列問(wèn)題：(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是________________________________________________________________________。(2)寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于______________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是________________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是____________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有______________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。2．[2019·全國(guó)卷Ⅱ]植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有______________________________________(答出2點(diǎn)即可)。(2)通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過(guò)人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長(zhǎng)。人工種皮具備透氣性的作用是____________________________________。人工胚乳能夠?yàn)榕郀铙w生長(zhǎng)提供所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有植物激素、__________________和________________等幾類(lèi)物質(zhì)。(3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的________________進(jìn)行組織培養(yǎng)。(4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整植株的基本程序是________________________________________________________________________(用流程圖表示)。3．[2019·全國(guó)卷Ⅲ]培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過(guò)程如圖所示。回答下列問(wèn)題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有________________________________________________________________________。(2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是________________________________________。(3)從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過(guò)細(xì)胞的______________過(guò)程，最終可形成試管苗。(4)步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的________________，這種繁殖方式屬于__________繁殖。4．[2017·全國(guó)卷Ⅲ，38節(jié)選]編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示。圖1圖2回答下列問(wèn)題：(3)現(xiàn)通過(guò)基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對(duì)照，培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。①由圖2可知：當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是________________。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是________________________________________________________________________。②僅根據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。5．[2018·全國(guó)卷Ⅲ]2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過(guò)程，核移植是指____________________________________________。通過(guò)核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目____________(填“減半”“加倍”或“不變”)。(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度______(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是________________________________。(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過(guò)程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目________(填“相同”或“不相同”)，性染色體組合________(填“相同”或“不同”)。eq\x(請(qǐng)完成課后定時(shí)檢測(cè)案40)第二單元現(xiàn)代生物科技課堂互動(dòng)探究案1高效課堂師生互動(dòng)提考能考點(diǎn)一【任務(wù)驅(qū)動(dòng)探究突破】任務(wù)1(1)分子生物學(xué)(2)細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平(3)細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)(4)動(dòng)物細(xì)胞工程任務(wù)2(1)離體的植物組織、器官或細(xì)胞完整的植株(2)脫分化愈傷組織再分化任務(wù)3(1)雜種細(xì)胞新的植物體(3)細(xì)胞壁纖維素酶和果膠酶細(xì)胞膜的流動(dòng)性離心、振動(dòng)、電激聚乙二醇(PEG)細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)細(xì)胞的全能性(4)克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙任務(wù)4(1)微型繁殖作物脫毒(2)突變體的利用任務(wù)5細(xì)胞的全能性愈傷組織根、芽或胚狀體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B融合的原生質(zhì)體AB雜種細(xì)胞AB不同種的植物體細(xì)胞融合后形成雜種細(xì)胞脫分化、再分化等植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交【考向分類(lèi)對(duì)點(diǎn)落實(shí)】1．解析：PEG是促細(xì)胞融合劑，但植物細(xì)胞不能直接融合，需先去壁形成原生質(zhì)體后才能融合，A錯(cuò)誤；制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞，不需制備原生質(zhì)體，B錯(cuò)誤；骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，C錯(cuò)誤；通過(guò)核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體只來(lái)自卵細(xì)胞，即線粒體DNA來(lái)自供卵母體，D正確。答案：D2．解析：農(nóng)桿菌可通過(guò)侵染宿主細(xì)胞，從而通過(guò)Ti質(zhì)粒上的T－DNA將目的基因轉(zhuǎn)入到宿主細(xì)胞中，A正確；通過(guò)對(duì)已經(jīng)導(dǎo)入目的基因并含有標(biāo)記基因的細(xì)胞進(jìn)行篩選，從而淘汰沒(méi)有成功導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞并保留導(dǎo)入了目的基因的細(xì)胞，B正確；聚乙二醇多用于植物體細(xì)胞融合，用于培養(yǎng)異源多倍體，與此處的基因工程的操作無(wú)關(guān)，C錯(cuò)誤；進(jìn)一步對(duì)篩選出來(lái)的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，得到轉(zhuǎn)基因植株，這一過(guò)程需用到適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素以誘導(dǎo)愈傷組織生芽，D正確。答案：ABD3．解析：(1)植物組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基，其中，無(wú)機(jī)鹽的元素可分為大量元素和微量元素兩類(lèi)，前者如N、P、K、Ca、Mg、S等，后者如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo等。MS培養(yǎng)基中還常需要添加能誘導(dǎo)細(xì)胞分裂、脫分化、再分化的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。(2)該實(shí)驗(yàn)中，各組6－BA的濃度均為0.5mg/L，IAA的濃度不相同，故自變量為IAA濃度，IAA濃度范圍為0～0.5mg/L。據(jù)表可知，該實(shí)驗(yàn)的因變量是再生叢芽外植體的比率(m)以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)。(3)由表格中的數(shù)據(jù)可知，1號(hào)培養(yǎng)基誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少。(4)生長(zhǎng)素常用于誘導(dǎo)細(xì)胞分裂和根的分化，6－BA一般用于誘導(dǎo)植物的愈傷組織分化出叢芽，故誘導(dǎo)菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入6－BA。答案：(1)大量元素微量元素細(xì)胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)0～0.5mg·L－1(3)1(4)6－BA4．答案：(1)無(wú)菌離體固體培養(yǎng)基愈傷組織(2)本物種的全部遺傳信息細(xì)胞全能性(3)組織細(xì)胞eq\o(→,\s\up7(①脫分化))②愈傷組織eq\o(→,\s\up7(③再分化))④胚狀體(4)兩個(gè)物種之間的基因相互影響，導(dǎo)致某些基因無(wú)法正常表達(dá)5．解析：(1)離體植物細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織，通過(guò)再分化形成具有根和芽的胚狀體，再通過(guò)細(xì)胞分裂、分化發(fā)育成一個(gè)完整的植株。該技術(shù)稱(chēng)為植物組織培養(yǎng)，其原理為植物細(xì)胞的全能性。培養(yǎng)基的成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等)等；培養(yǎng)基要求進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。(2)三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，將三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織即可；獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體；棉花為雙子葉植物，導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體的過(guò)程中必須經(jīng)過(guò)脫分化和有絲分裂形成愈傷組織，再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。答案：(1)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素滅菌(2)愈傷組織胚狀體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(3)②⑧⑨6．解析：(1)利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育新品種的過(guò)程中，應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，獲得有活力的原生質(zhì)體，經(jīng)誘導(dǎo)融合后培養(yǎng)成愈傷組織，再經(jīng)再分化形成完整植物體。(2)多倍體是指由受精卵發(fā)育來(lái)的、細(xì)胞內(nèi)含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體。(3)欲通過(guò)人工種子大量繁殖這種雜種植株，則可將經(jīng)再分化形成的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料經(jīng)人工薄膜包裝來(lái)獲得人工種子。答案：(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)由受精卵發(fā)育而來(lái)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(其他合理答案也可)在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(其他合理答案也可)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(答對(duì)其中一個(gè)即可)7．解析：(1)根據(jù)表中兩種藻的特性可知，A藻具有產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn)，B藻具有快速增長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，選育的融合藻應(yīng)該具有兩種藻的優(yōu)點(diǎn)。(2)由于植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁，影響了原生質(zhì)體的融合，所以在融合前，需用纖維素酶和果膠酶處理以獲得原生質(zhì)體。(3)在篩選融合藻的過(guò)程中，要根據(jù)兩種藻及融合藻的特性進(jìn)行篩選。從題中信息可以看出，篩選過(guò)程是通過(guò)培養(yǎng)過(guò)程觀察或測(cè)定DHA含量進(jìn)行的，在培養(yǎng)過(guò)程中，最先觀察到不能生長(zhǎng)的是B藻，淘汰B藻，生長(zhǎng)比較慢的是A藻，最后再通過(guò)測(cè)定DHA含量獲得所需的融合藻。(4)①甲組條件是光照下，培養(yǎng)基中含有無(wú)機(jī)物，該條件下的融合藻既可以進(jìn)行呼吸作用，也可以進(jìn)行光合作用，可產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器有線粒體和葉綠體；而在丙組條件下，黑暗中培養(yǎng)基中含有葡萄糖，該條件下融合藻只進(jìn)行呼吸作用，產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器只有線粒體。②乙組條件既有光照，培養(yǎng)基中又含有有機(jī)物－葡萄糖，融合藻既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)，所以融合藻生長(zhǎng)速度較快；甲組中不需要添加葡萄糖，可降低成本，同時(shí)甲組的培養(yǎng)基中不含有機(jī)物，雜菌無(wú)法生長(zhǎng)，所以在實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件。答案：(1)產(chǎn)生DHA，自養(yǎng)特性快速生長(zhǎng)(2)原生質(zhì)體(3)bac(4)①線粒體、葉綠體線粒體②融合藻既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能生長(zhǎng)，不需要添加葡萄糖，可降低成本，也可防止雜菌生長(zhǎng)8．解析：(1)圖示表示植物體細(xì)胞雜交過(guò)程，①是去壁過(guò)程，最常用的方法是酶解法，即用纖維素酶和果膠酶處理去除細(xì)胞壁。(2)②表示誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過(guò)程，方法有物理方法(離心、電刺激)和化學(xué)方法(聚乙二醇)。(3)“雜種細(xì)胞”具有兩個(gè)細(xì)胞的染色體，有a＋b條染色體。細(xì)胞A產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中含有a/2條染色體，細(xì)胞B產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中含有b/2條染色體，利用雜交育種獲得的后代體細(xì)胞中所含有的染色體數(shù)為兩親本的一半，即(a＋b)/2條，此植株是高度不育的，必須利用秋水仙素處理，使其染色體數(shù)目加倍，即細(xì)胞中染色體數(shù)目恢復(fù)為a＋b條，此時(shí)該植株可育。說(shuō)明體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。答案：(1)酶解法(纖維素酶、果膠酶)(2)誘導(dǎo)融合物理化學(xué)(3)a＋b(a＋b)/2秋水仙素a＋b克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙9．解析：(1)植物組織培養(yǎng)技術(shù)：在無(wú)菌和人工控制的條件下，讓離體的組織和細(xì)胞在特定培養(yǎng)基上先脫分化得到愈傷組織，再分化得到胚狀體、叢芽等，進(jìn)而得到新植株。該過(guò)程的原理是植物細(xì)胞的全能性。(2)植物原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)：首先用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段，轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中，在高爾基體的作用下再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、得到胚狀體，最終發(fā)育成完整的植株。(3)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：該技術(shù)是先用酶解法將兩種不同植物的細(xì)胞壁去除，再添加聚乙二醇(化學(xué)法)或離心、電刺激(物理法)誘導(dǎo)兩種原生質(zhì)體相融合，再生出細(xì)胞壁后形成雜種細(xì)胞，經(jīng)組織培養(yǎng)技術(shù)得到雜種植株。該項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(或克服生殖隔離)，該技術(shù)可能不會(huì)按照人們的意愿表達(dá)出雙親的優(yōu)良性狀，其原因可能是不同物種的基因在表達(dá)時(shí)相互干擾，從而不能有序表達(dá)。答案：(1)無(wú)菌脫分化植物細(xì)胞的全能性(2)纖維素酶和果膠高爾基體(3)聚乙二醇克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(或克服生殖隔離)不同物種的基因在表達(dá)時(shí)相互干擾，從而不能有序表達(dá)考點(diǎn)二【任務(wù)驅(qū)動(dòng)探究突破】任務(wù)1胰蛋白酶胰蛋白酶(1)液體動(dòng)物血清(2)單個(gè)細(xì)胞分離接觸抑制(3)pH有氧呼吸任務(wù)3細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性原代胰蛋白酶?jìng)鞔ズ寺涯讣?xì)胞重組細(xì)胞早期胚胎細(xì)胞群克隆動(dòng)物任務(wù)4細(xì)胞膜的流動(dòng)性纖維素酶和果膠酶雜種植株雜交細(xì)胞克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株任務(wù)5(1)滅活的病毒細(xì)胞膜的流動(dòng)性既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備(2)特定抗原(3)未融合細(xì)胞、同種細(xì)胞相互融合后的細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞(4)【考向分類(lèi)對(duì)點(diǎn)落實(shí)】1．解析：細(xì)胞系連續(xù)分裂的細(xì)胞其核型已發(fā)生改變；一個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群才為一個(gè)克??；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞可能是不同細(xì)胞分裂形成的，其性狀可能不同。答案：B2．解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)毒、無(wú)菌的環(huán)境，甲過(guò)程指從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織，該過(guò)程需要對(duì)小鼠進(jìn)行消毒處理，A正確；乙過(guò)程表示將得到的皮膚組織分散成單個(gè)細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理，B正確；丙過(guò)程表示原代培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞仍能保持正常的二倍體核型，C錯(cuò)誤；丁過(guò)程表示傳代培養(yǎng)，此時(shí)得到的細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生突變，正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展，D正確。答案：ABD3．解析：(1)人工合成的植物激素類(lèi)似物叫植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)細(xì)胞癌變的機(jī)理是原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞分裂失控而癌變。(3)①?gòu)谋碇锌梢钥闯鰧?shí)驗(yàn)的自變量為青鮮素濃度，在第二步中分別向各組加入等量10、30、90、270、810mg/L的青鮮素溶液。第三步：培養(yǎng)一段時(shí)間后，取樣制成臨時(shí)裝片，用顯微鏡觀察并記錄細(xì)胞分裂中期的變異細(xì)胞數(shù)目和正常細(xì)胞數(shù)目，統(tǒng)計(jì)其變異細(xì)胞的百分比。最后得出結(jié)論：濃度在10mg/L以下沒(méi)有影響，大于90mg/L毒性增加明顯。②檢查青鮮素的毒性，通常用變異細(xì)胞占全部正常細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)作為指標(biāo)，培養(yǎng)液中特殊的成分是動(dòng)物血清。答案：(1)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(2)原癌基因和抑癌基因(3)等量的不同濃度(10、30、90、270、810mg/L)的青鮮素溶液記錄變異細(xì)胞的數(shù)目統(tǒng)計(jì)變異細(xì)胞百分比低濃度的青鮮素毒性很小，濃度90mg/L以上毒性增加明顯變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(變異細(xì)胞比例)動(dòng)物血清(或血漿)4．解析：(1)提供體細(xì)胞的供體可能為雌性，也可能為雄性，因此圖中A(正常細(xì)胞核)的性染色體組成為XX或XY。常采用顯微操作去核法來(lái)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。②過(guò)程表示將早期胚胎移入受體，其過(guò)程為胚胎移植。(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。超過(guò)10代繼續(xù)培養(yǎng)，則其遺傳物質(zhì)(或核型)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來(lái)自供體，因此大部分性狀與供體相同，但細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)源于受體(或提供卵母細(xì)胞的個(gè)體)，即卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，這就決定了克隆動(dòng)物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的培育采用的是核移植技術(shù)，核移植技術(shù)的原理是已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。答案：(1)XX或XY顯微操作(去核法)胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性5．解析：①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞；②中使用聚乙二醇或滅活的病毒等有利于雜交瘤細(xì)胞的形成；③同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性；④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。答案：BD6．解析：已免疫的B淋巴細(xì)胞可以從小鼠的脾臟中提取，也可以從血漿中提取，骨髓瘤細(xì)胞是從小鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞得到的，融合方法可以用化學(xué)方法——聚乙二醇，生物方法——滅活的病毒等。如果要篩選能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群，可以通過(guò)檢測(cè)抗原—抗體反應(yīng)，如果有反應(yīng)說(shuō)明產(chǎn)生了抗體。融合細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn)，既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。答案：BCD7．解析：(1)據(jù)圖分析，第4次免疫后，X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上，小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。(3)兩個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核融合成一個(gè)細(xì)胞核標(biāo)志著融合的完成，雜交瘤細(xì)胞中有一個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)量為兩者之和，即100條染色體。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，最終不能存活。答案：(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)正常細(xì)胞不能無(wú)限增殖8．解析：(1)a過(guò)程是從小鼠的血清中提取Ab－3，過(guò)程bcd獲得的Ab－3是單克隆抗體，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備等特點(diǎn)；(2)根據(jù)以上分析已知，甲試管中的細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞，一般從小鼠的脾臟中提取，乙試管中的細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞；(3)過(guò)程c表示誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過(guò)程，需要使用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，分離獲得的丙試管中細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，丙試管中的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體；(4)d過(guò)程是對(duì)雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)，并進(jìn)行專(zhuān)一抗體檢測(cè)。答案：(1)血清特異性強(qiáng)，靈敏度高(純度高)，可大量制備(產(chǎn)量高)(2)脾臟B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞(3)篩選既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體(4)克隆化培養(yǎng)專(zhuān)一抗體(陽(yáng)性)檢測(cè)9．解析：(1)抗體基因在B細(xì)胞中表達(dá)，在T細(xì)胞、體細(xì)胞中均不表達(dá)，因此只能從B細(xì)胞中才能獲取到人的抗體基因的mRNA。dNTP斷裂兩個(gè)高能磷酸鍵后可以得到4種脫氧核苷酸和能量，因此在PCR技術(shù)中，dNTP的作用是提供合成DNA的原料和能量。(2)Ca2＋處理大腸桿菌的目的是使大腸桿菌易于吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子，但由于噬菌體可以侵染大腸桿菌，可將重組DNA分子注入大腸桿菌，因此在噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程中，理論上可以不利用Ca2＋處理大腸桿菌。(3)由于抗原和抗體特異性結(jié)合，因此可以采用抗原—抗體雜交技術(shù)從噬菌體抗體庫(kù)中篩選特異性抗體。(4)在抗體基因與噬菌體基因之間設(shè)計(jì)了一個(gè)終止密碼子(UAG)的對(duì)應(yīng)序列，終止密碼子為翻譯的終點(diǎn)，由于終止密碼子突變型菌株轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物無(wú)原來(lái)設(shè)計(jì)的終止密碼子，因此抗體基因的表達(dá)產(chǎn)物是融合蛋白(抗體和噬菌體的蛋白質(zhì))。(5)由于利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體，需要對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞進(jìn)行融合，然后篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，最后獲得單克隆抗體。但用噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)獲得人的單克隆抗體無(wú)需動(dòng)物細(xì)胞融合，使制備更簡(jiǎn)單易行。答案：(1)B提供合成DNA的原料和能量(2)噬菌體可以侵染大腸桿菌，可將重組DNA分子注入大腸桿菌(3)抗原—抗體雜交抗原和抗體特異性結(jié)合(4)融合蛋白(5)動(dòng)物細(xì)胞融合課堂總結(jié)網(wǎng)絡(luò)聚焦大概念網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)提升①細(xì)胞的全能性②植物組織培養(yǎng)③動(dòng)物細(xì)胞融合④動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)⑤細(xì)胞核移植歷屆真題分類(lèi)集訓(xùn)培素養(yǎng)等級(jí)選考研考向1．解析：若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，應(yīng)該先用酶解法去掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；無(wú)論是動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞的融合都要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)，B正確；兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，C正確；c細(xì)胞同時(shí)具備了a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因，但是基因是選擇性表達(dá)的，因此c細(xì)胞中基因不一定都能夠表達(dá)，D錯(cuò)誤。答案：BC2．解析：(1)選擇莖尖、幼葉等作為外植體是因?yàn)槠涓缓稚M織，細(xì)胞分化程度低，誘導(dǎo)其脫分化形成愈傷組織更容易。(2)階段Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別涉及脫分化、再分化和再分化過(guò)程，細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能在這些階段都發(fā)生了變化，都存在基因的選擇性表達(dá)。(3)因?yàn)閙1μmol/L為品種B在Ⅰ階段的最佳激素配比中的細(xì)胞分裂素濃度，所以確定品種A在Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度時(shí)，若以0.5μmol/L為梯度設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平，設(shè)置的濃度由低到高應(yīng)依次為m1－1.0、m1－0.5、m1、m1＋0.5、m1＋1.0(單位均為μmol/L)。(4)用浸泡法處理幼芽時(shí)使用的生長(zhǎng)素濃度較低，處理時(shí)間較長(zhǎng)，用沾蘸法處理幼芽的時(shí)間較短，使用的生長(zhǎng)素濃度較高，二者均可以得到最佳生根效果。(5)秋水仙素通過(guò)抑制分裂期紡錘體的形成使染色體加倍；Ⅱ、Ⅲ階段中部分細(xì)胞可能已發(fā)生分化，失去了分裂能力，故用秋水仙素處理這兩個(gè)階段的材料，并非所有細(xì)胞的染色體數(shù)目都會(huì)加倍；而Ⅰ階段形成的愈傷組織細(xì)胞都由已分化細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化形成，分化程度較低，分裂能力