細菌的檢查與防治原則課件

第七章感染病病原學診斷與預防細菌真菌病毒感染病如何診斷？標本的采集和送檢六原則遵守無菌操作選擇不同采集時機和標本種類盡早采集在抗生素應用前采集正確的保存和運送第一節(jié)細菌感染病病原學檢查直接關系到檢測的準確性作好標記,化驗單核對常見的臨床標本1）血液標本：正常人的血液是無菌的。采集血液標本主要用于病原體培養(yǎng)、核酸檢測及血清中抗原抗體檢測。2）呼吸道標本：上呼吸道有正常菌群的存在，進行普通培養(yǎng)無特別意義，僅在疑似化膿性扁桃體炎、白喉、百日咳患者及腦膜炎奈瑟菌帶菌者的檢查時，采集咽拭子、鼻咽拭子或化膿部位的分泌物，下呼吸道正常情況下無菌或僅有少量細菌侵入，但很快被清除。懷疑有支氣管炎、肺炎及結(jié)核病的患者需采集下呼吸道標本，包括痰液、支氣管灌洗液和氣管鏡毛刷等。采集下呼吸道標本應防止上呼吸道正常菌群的污染。3）尿液標本：正常人尿液是無菌的。但在前尿道有正常菌群和過路菌存在（大腸埃希菌、葡萄球菌），而后者又是常見尿路感染的病原菌。因此正確的采集尿液，避免其他菌群的污染是尿液細菌檢驗正確與否的關鍵。一些抗菌藥物和代謝產(chǎn)物通過尿液排泄，因此尿液標本必須在使用抗菌藥物之前采集。女性月經(jīng)期不易采集標本。常用的尿液細菌培養(yǎng)標本包括中段尿、腎盂尿、膀胱穿刺尿及晨尿。常見的臨床標本致病菌的分離鑒定藥物敏感試驗標本涂片檢查---染色和不染色---分離培養(yǎng)生化試驗血清學鑒定動物試驗明確診斷初步診斷病原菌抗原檢測—EIA、協(xié)同凝集試驗、IF、CIE等涂片檢查不染色標本的形態(tài)檢查：觀察細菌的動力及運動等活體狀況。常用的方法有懸滴法、壓滴法，該法不能看清細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征。染色標本的形態(tài)檢查：1）染色的原理和染料2）常用染料：酸性、堿性、復合、單純?nèi)玖系?）染色方法：單染法、復染法（革蘭染色、抗酸染色）、特殊染色致病菌的分離鑒定藥物敏感試驗標本涂片檢查---染色和不染色---分離培養(yǎng)生化試驗血清學鑒定動物試驗明確診斷初步診斷病原菌抗原檢測—EIA、協(xié)同凝集試驗、IF、CIE等細菌的接種與分離培養(yǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)基（culturemedium）供細菌生長用的，由人工方法將多種營養(yǎng)物質(zhì)根據(jù)細菌的需要組合成的混合營養(yǎng)基質(zhì)。常用培養(yǎng)基種類（culturemedium）特殊培養(yǎng)基基礎培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基的制備過程稱量溶解調(diào)PH過濾分裝滅菌質(zhì)量檢驗保存細菌的分離接種法平板劃線接種（使標本中混在的多種細菌在培養(yǎng)基表面分散生長，形成各自菌落。便于根據(jù)菌落特征，挑取單個菌落進行純培養(yǎng)）細菌的分離接種法平板劃線接種細菌的分離接種法平板劃線接種第二次劃線區(qū)第三次劃線區(qū)待分離標本涂布點第一次劃線區(qū)平板劃線接種細菌的分離接種法斜面接種（用于已獲得的單個菌落的移種、純種培養(yǎng)細菌和保存菌種及觀察細菌的某些特性）細菌的分離接種法液體接種法（用于增菌培養(yǎng)）細菌的分離接種法穿刺接種法:此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。用接種針取細菌少許，從半固體培養(yǎng)基中央，平行于管壁垂直刺入，接近管底但不可接觸管底，然后接種針沿原路退出細菌的分離接種法測定牛乳、飲水和尿液等標本細菌數(shù)時常用此方法。常用于紙片法藥物敏感性測定，也可用于被檢標本中的細菌計數(shù)。細菌的培養(yǎng)方法1）普通培養(yǎng)法：是指需氧菌或兼性厭氧菌等在普通大氣環(huán)境下的培養(yǎng)條件，又稱需氧培養(yǎng)法。將已接種過的培養(yǎng)基,置35℃培養(yǎng)箱內(nèi)18-24小時,即可于培養(yǎng)基上生長.少數(shù)生長緩慢的細菌,需培養(yǎng)3-7天直至一個月才能生長.為使培養(yǎng)箱內(nèi)保持一定濕度,可在其內(nèi)放置一杯水.培養(yǎng)時間較長的培養(yǎng)基,接種后應將試管口塞棉塞后用石臘凡士林封固,以防培養(yǎng)基干裂.

2）二氧化碳培養(yǎng)法：某些細菌,如布氏桿菌和腦膜炎奈瑟菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養(yǎng)要求更為嚴格.將已接種的培養(yǎng)基置于二氧化碳環(huán)境中進行培養(yǎng)的方法即二氧化碳培養(yǎng)法,常用方法有以下幾種:

(1)二氧化碳培養(yǎng)箱可將已接種的培養(yǎng)基直接放入箱內(nèi)孵育,即可獲得二氧化碳環(huán)境.

(2)燭缸法將已接種的培養(yǎng)基,置于容量為2000ml的磨口標本缸或干燥器內(nèi).缸蓋或缸口處均需涂以凡士林,然后點燃蠟燭直立置入缸中,密封缸蓋.待燃自行熄滅時,容器內(nèi)約含5-10%的CO2容器置37℃培養(yǎng).

(3)重碳酸鈉-鹽酸法每升容積的容器內(nèi),重碳酸鈉與鹽酸按0.4g與3.5ml的比例,分別將兩種藥各置一器皿內(nèi)(如平皿內(nèi)),連同器皿置于標本缸或干燥器內(nèi),蓋嚴后使容器傾斜,兩種藥品接觸后即可產(chǎn)生二氧化碳.

細菌的培養(yǎng)方法致病菌的分離鑒定藥物敏感試驗標本涂片檢查---染色和不染色---分離培養(yǎng)生化試驗血清學鑒定動物試驗明確診斷初步診斷病原菌抗原檢測—EIA、協(xié)同凝集試驗、IF、CIE等細菌的生理生化特征檢測碳水化合物的代謝試驗糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗

【原理】

兼性厭氧菌和厭氧菌一般都能發(fā)酵糖類，不同細菌分解糖類后產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物因菌種而異，有的僅產(chǎn)酸，有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣，據(jù)此來鑒別細菌。如大腸桿菌既可發(fā)酵葡萄糖也可發(fā)酵乳糖，沙門菌只發(fā)酵葡萄糖不發(fā)酵乳糖。+—氣泡不發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)酸產(chǎn)氣糖發(fā)酵試驗+細菌的生理生化特征檢測碳水化合物的代謝試驗氧化-發(fā)酵試驗（O-F試驗）

【原理】

細菌在分解葡萄糖的過程中，必須以分子氧作為電子受體的稱為氧化型。這類細菌通常是專性需氧菌，在無氧環(huán)境中不能分解葡萄糖。細菌在分解葡萄糖的過程中，可以進行無氧酵解的，稱為發(fā)酵型，此類細菌無論在有氧或無氧環(huán)境中都能分解葡萄糖，通常為兼性厭氧菌。不分解葡萄糖的細菌，稱為產(chǎn)堿型。利用此試驗可區(qū)分細菌的代謝類型，意義：用于細菌種屬間的鑒別。腸桿菌科細菌為發(fā)酵型，非發(fā)酵菌通常為氧化型或產(chǎn)堿型，微球菌屬可氧化葡萄糖，葡萄球菌屬則能發(fā)酵葡萄糖。七葉苷水解試驗原理：有的細菌可將七葉苷分解成葡萄糖和七葉素，后者與培養(yǎng)基中的枸櫞酸鐵的二價鐵離子反應生成黑色化合物，使培養(yǎng)基呈黑色方法：將待測菌接種于七葉苷培養(yǎng)基，培養(yǎng)后觀察結(jié)果結(jié)果：培養(yǎng)基變黑為陽性，不變?yōu)殛幮砸饬x：腸球菌、D群鏈球菌與其他鏈球菌的區(qū)別，前者為陽性；肺炎克雷伯、陰溝腸桿菌多陽性細菌的生理生化特征檢測碳水化合物的代謝試驗淀粉水解試驗

【原理】

某些細菌可以產(chǎn)生分解淀粉的酶，把淀粉水解為麥芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再變藍色，而在菌落周圍出現(xiàn)透明圈。白喉棒狀桿菌可產(chǎn)生淀粉酶，分解淀粉。接種菌，可產(chǎn)生淀粉酶細菌的生理生化特征檢測碳水化合物的代謝試驗甲基紅試驗

【原理】

細菌在代謝過程中分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，某些細菌可進一步將丙酮酸分解為乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產(chǎn)物，可使培養(yǎng)基PH值下降至pH4.5以下，使甲基紅指示劑變紅。（陽性）有些細菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或進一步將酸轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)如醇、酮、醛、氣體和水，則培養(yǎng)基的PH在6.2以上，加入甲基紅指示劑呈黃色（陰性）。主要用于大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別。甲基紅試驗葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇pH值>6.2pH<4.4（—）（+）（指示劑紅色）（指示劑黃色）M-甲基紅（methylred）實驗葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇甲基紅-葡萄糖→丙酮酸甲基紅+-+細菌的生理生化特征檢測碳水化合物的代謝試驗五、V-P試驗

【原理】

某些細菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進一步脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強堿環(huán)境下，被空氣中的氧氧化為二乙酰，二乙酰與培養(yǎng)基中的精氨酸所含的胍基發(fā)生反應，生成紅色化合物，稱V－P（+）反應。與甲基紅試驗一起使用，甲基紅試驗陽性，則V-P試驗陰性。反之也如此。VP試驗葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰紅色OH-+含胍基化合物（—）（+）

VP試驗葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙?！t色化合物+

胍基化合物葡萄糖→丙酮酸××乙酰甲基甲醇-

-+細菌的生理生化特征檢測蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗：不同細菌分解蛋白質(zhì)能力不同，可用于鑒別細菌。一、苯丙氨酸脫氨酶試驗

【原理】

細菌具有苯丙氨酸脫氨酶，能將培養(yǎng)基中的苯丙氨酸脫氨變成苯丙酮酸，加入三氯化鐵試劑與苯丙酮酸螯合后變?yōu)榫G色。主要用于鑒定變形桿菌屬、摩根菌屬、普羅威登菌屬細菌，均為強陽性，腸桿菌科其他細菌均為陰性。細菌的生理生化特征檢測陰性陽性細菌的生理生化特征檢測蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗三、精氨酸雙水解酶試驗【原理】

原理：精氨酸經(jīng)兩次水解，先生成瓜氨酸和氨，瓜氨酸又在瓜氨酸酶的作用下，形成鳥氨酸、氨及二氧化碳。鳥氨酸又在鳥氨酸酶的作用下生成腐氨和二氧化碳，酸堿指示劑轉(zhuǎn)為堿性指示為陽性。精氨酸可通過雙水解和脫羧酶兩個途徑進行分解，兩個途徑可單獨進行或同時進行。如培養(yǎng)基的PH指示劑急劇變堿，可能是雙水解途徑，如PH變化弱而慢，且不形成氨，可能是以脫羧酶途徑分解的，但僅從培養(yǎng)基PH變化來確定何種途徑并不可靠，如欲鑒別應作氣相色譜分析。細菌的生理生化特征檢測蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗四、尿素酶試驗

原理：具有尿素酶的細菌能分解尿素產(chǎn)生氨，使培養(yǎng)基呈堿性，酚紅指示劑變?yōu)榧t色。變形桿菌、摩根、雷氏普羅維登、克雷伯為陽性（—）（+）尿素氨培養(yǎng)基變堿性紅色細菌的生理生化特征檢測（—）（+）色氨酸+二甲基氨基苯甲醛

細菌的生理生化特征檢測硫化氫試驗（—）（+）含硫氨基酸硫化氫黑色硫化物+鐵離子或鉛離子細菌的生理生化特征檢測蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗七、明膠液化試驗

【原理】

某些細菌具有明膠酶，能分解明膠為多肽，多肽進一步分解為氨基酸，使明膠失去凝固力。沙雷菌、普通變形桿菌、奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌等可液化明膠，腸桿菌科其他細菌很少液化明膠。

細菌的生理生化特征檢測碳源和氮源利用試驗一、枸櫞酸鹽利用試驗

【原理】

細菌能利用銨鹽和枸櫞酸鹽作為唯一氮源和碳源時，則可在枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上生長，并分解枸櫞酸鹽為碳酸鹽，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，指示劑（溴麝香草酚藍）由綠色變?yōu)樯钏{色者為枸櫞酸鹽（檸檬酸鹽）利用試驗陽性，若細菌不能利用枸櫞酸鹽作為碳源時，則細菌不能生長，培養(yǎng)基不變顏色（仍為綠色），為櫞酸鹽利用試驗陰性。

用于腸桿菌科的鑒定：克雷伯菌屬、沙門菌屬常為陽性C-枸櫞酸鹽利用（citrateutilization）試驗利用枸櫞酸鹽生長+不能利用--+IMViC試驗

大腸埃希菌

++--

產(chǎn)氣桿菌

--++細菌的生理生化特征檢測細菌的生理生化特征檢測呼吸酶類試驗二、過氧化氫酶試驗

【原理】

有些細菌具有過氧化氫酶，能分解過氧化氫，釋放出初生態(tài)氧，生成氧分子而出現(xiàn)氣泡。

用于革蘭陽性球菌的鑒別，葡萄球菌和微球菌為陽性，鏈球菌和腸球菌為陰性，腸球菌多假陽性。注意事項：1）做觸酶試驗不宜用血瓊脂平板上的菌落，因紅細胞內(nèi)含有觸酶，會出現(xiàn)假陽性反應。2)做此實驗一定要用陽性及陰性菌株做對照。

細菌的生理生化特征檢測陽性陰性細菌的生理生化特征檢測DNA酶試驗【原理】

DNA酶可使DNA長鏈水解成幾個單核苷酸，組成寡核苷酸鏈。DNA長鏈可被酸沉淀，而水解后形成的寡核苷酸則溶于酸，故于DNA瓊脂平板上加入鹽酸后，可在菌落周圍形成透明環(huán)。金黃色葡萄球菌、沙雷氏菌、變形桿菌陽性

細菌的生理生化特征檢測抑菌試驗1．Optochin敏感試驗

(1)原理：Optochin(奧普托欣)是鹽酸乙基氫化羥基奎寧的商品名。對肺炎鏈球菌有特異抑制作用，其作用機制可能是干擾葉酸生物合成作用，而對其它鏈球菌則無此作用。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌的肉湯培養(yǎng)物均勻涂布于血瓊脂平板上，貼上一張含5μg奧普托欣紙片，置燭缸或二氧化碳孵箱，35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于14mm為敏感，小于或等于14mm為陰性。

(4)應用：主要用于肺炎鏈球菌（敏感）與其它鏈球菌（耐藥）的鑒別。

2．桿菌肽敏感試驗

(1)原理：A群鏈球菌對桿菌肽幾乎是100%敏感，而其它群鏈球菌對桿菌肽通常耐藥。故此試驗可對鏈球菌進行鑒別。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌的肉湯培養(yǎng)物均勻涂布于血瓊脂平板上，稍干后貼一張含0.04U的桿菌肽紙片，置35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于10mm為敏感，小于10mm為耐藥。

(4)應用：主要用于A群與非A群鏈球菌的鑒別。從臨床分離的菌株中有5%~15%非A群鏈球菌也對桿菌肽敏感，如6%的B群鏈球菌、7.5%的C群鏈球菌和G群鏈球菌等。

細菌的生理生化特征檢測抑菌試驗3．O/129試驗

(1)原理：O/129（2，4二氨基-6，7-二異丙基喋啶）能抑制弧菌屬、發(fā)光桿菌屬和鄰單胞菌屬細菌生長，而氣單胞菌屬和假單胞菌屬細菌則耐藥。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌菌懸液均勻涂布于堿性瓊脂平板上，將10μg/片及150μg/片的O/129診斷紙片貼于平板上，置35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：出現(xiàn)抑菌圈者表示敏感，無抑菌圈者為耐藥。

(4)應用：主要用于弧菌屬、鄰單胞菌屬與氣單胞菌屬的鑒別，弧菌屬和鄰單胞菌屬菌為敏感，氣單胞菌屬菌為耐藥。其它菌屬有發(fā)光桿菌屬為敏感，假單胞菌屬為耐藥。4、新生霉素敏感試驗原理：表皮葡萄球菌對新生霉素敏感；腐生葡萄球菌對新生霉素耐藥培養(yǎng)基：MH瓊脂方法：同紙片法藥敏5ug/片結(jié)果：抑菌環(huán)直徑＞16mm敏感；≤16mm耐藥意義：區(qū)別表皮葡萄球菌與腐生葡萄球菌

細菌的生理生化特征檢測其他試驗1、凝固酶試驗：【原理】致病性葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶。一種是結(jié)合凝固酶，結(jié)合在細胞壁上，使血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白而附著于細菌表面，使細菌發(fā)生凝集：可用玻片法測出。另一種是分泌至菌體外的游離凝固酶。作用類似凝血酶原物質(zhì)，可被血漿中的協(xié)同因子激活變?yōu)槟笜游镔|(zhì)，而使纖維蛋白原變成纖維蛋白，從而使血漿凝固，可用試管法測出。致病性葡萄球菌；金黃色葡萄球菌多陽性細菌的生理生化特征檢測其他試驗3、CAMP試驗：【原理】B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子，可促進葡萄球菌的B-溶血素溶解紅細胞的活性，因此在兩菌（B群鏈球菌和葡萄球菌）的交界處溶血力增加，出現(xiàn)矢形（半月形）的溶血區(qū)。在鏈球菌中，只有B群鏈球菌CAMP試驗陽性，故可作為特異性鑒定?！痉椒ā浚涸谘蜓蝰R血瓊脂平板上，先以β-溶血的金黃色葡萄球菌劃一橫線接種。再將待檢菌與前一劃線作垂直接種，兩者應相距1cm，于35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。每次試驗應做陰陽性對照。

金葡B鏈4、膽汁溶菌試驗：【原理】膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌，可能是由于膽汁降低細胞膜表面的張力，使細胞膜破損或使菌體裂解；或者是由于膽汁加速了肺炎鏈球菌本身自溶過程，促使細菌發(fā)生自溶。主要用于肺炎鏈球菌與甲型鏈球菌的鑒別，前者陽性，后者陰性。方法

1）平板法：取10％去氧膽酸鈉溶液一接種環(huán)，滴加于被測菌的菌落上，置35℃30min后觀察結(jié)果。

2）試管法：被檢菌培養(yǎng)物2支，各0.9ml，分別加入l0％去氧膽酸鈉溶液和生理鹽水（對照管）0.1ml，搖勻后置35℃水浴10～30min，觀察結(jié)果結(jié)果：平板法以“菌落消失”判為陽性；試管法以"加膽鹽的培養(yǎng)物變透明，而對照管仍“混濁”判為陽性。應用：主要用于肺炎鏈球菌與甲型鏈球菌的鑒別，前者陽性，后者陰性。毒素測定1、內(nèi)毒素的檢測對注射液和生物制品采用家兔發(fā)熱法，即將可疑標本注射進家兔的靜脈中，觀察有無發(fā)熱反應；對臨床標本采用鱟試驗。鱟系海邊棲生的一種大型節(jié)肢動物,屬蜘蛛綱。其多功能血細胞(變形細胞)的溶解物中含有凝固酶原和凝固蛋白原，在極微量內(nèi)毒素(0.0005vg/ml)存在時，可激活凝固酶原使凝固蛋白成凝膠狀態(tài)。本試驗即利用此原理測定血液或其他樣品中的微量內(nèi)毒素。

毒素測定1、外毒素的檢測1）生物學檢測：選用敏感動物，根據(jù)可疑毒素的作用特點進行接種。2）免疫學測定：雙向瓊脂擴散、瓊脂擴散法、酶聯(lián)免疫吸附試驗、反向血凝等。3）毒素編碼基因的測定：可用探針雜交、PCR等測定一些外毒素的編碼基因?？乖瓬y定1、凝集試驗1）玻片法凝集試驗：2）膠乳凝集法：3）協(xié)同凝集試驗：4）反向間接血凝試驗凝集反應類型：1、玻片法凝集試驗2、膠乳凝集法用膠乳顆粒包被已知的抗血清，與標本中存在的細菌抗原結(jié)合產(chǎn)生凝集，以鑒定細菌協(xié)同凝集試驗——用于檢測傳染病早期血液及分泌液中的微量Ag。反向間接凝集試驗——某些傳染病和原發(fā)性肝癌的早期診斷。2024/2/29652024/2/2966酶聯(lián)免疫吸附測定基因檢測血清學檢測當細菌通過各種途徑感染免疫功能正常的機體時，機體免疫系統(tǒng)經(jīng)過免疫應答產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細胞及細胞因子。用免疫學方法可以測定這些抗體的滴度，用于感染的輔助診斷。（一）特異性抗體測定1、直接凝集試驗2、膠乳凝集試驗（二）非特異性凝集素的測定1、冷凝集試驗由肺炎支原體感染引起的原發(fā)性非典型性肺炎患者的血清中常含有較高的寒冷紅細胞凝集素，簡稱冷凝集素，它能與患者自身紅細胞或“O”型人紅細胞于4℃條件下發(fā)生凝集，在37℃時又呈可逆性完全散開。

2、異嗜性凝集試驗傳染性單核細胞增多癥患者血清中?？沙霈F(xiàn)一種能凝集異種動物（如綿羊）紅細胞的抗體，稱為嗜異性抗體，這種異嗜性凝集反應稱為【血清的異嗜性凝集反應】3、費梅毒螺旋體血清試驗4、外斐試驗致病菌的檢驗程序標本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗體檢測

其它檢測形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性涂片鏡檢菌落特征生化鑒定藥敏試驗血清學鑒定直接凝集反應協(xié)同凝集免疫熒光對流免疫電泳酶免疫測定免疫印跡細菌代謝產(chǎn)物（氣相色譜）細菌核酸（PCR）噬菌體分離細菌素測定分子生物學技術動物試驗細菌的鑒定數(shù)字編碼鑒定【具體內(nèi)容】：是將鑒別細菌的各種生化反應微量化與綜合系列化，將各種生化反應培養(yǎng)基分裝在微量板或微量管內(nèi)，組成系列試劑；操作時，把持檢細菌純培養(yǎng)物接種于每個微量孔或微量管內(nèi)，經(jīng)一定溫度和時間培養(yǎng)后，再加入指示劑或直接根據(jù)顔色變化得出生化反應結(jié)果，將結(jié)果進行編碼。號碼編出后，輸入電腦或通過編碼本，找出與該號碼相對應的細菌名稱，便可作出初步鑒定。2024/2/2972菌群分析正常情況下腸道菌群在體內(nèi)與外部環(huán)境保持著動態(tài)平衡，并對人體健康起著重要作用。如果這種平衡在某些情況下被打破，便形成腸道菌群失調(diào)（ID），其表現(xiàn)為腸道菌群在種類、數(shù)量、比例、定位和生物學特性上的改變。菌群分析是腸道菌群失調(diào)的主要檢查方法，定性分析以直接涂片法為主，定量檢查以需氧菌和厭氧菌培養(yǎng)為主。1、直接涂片通過顯微鏡觀察革蘭染色糞便涂片的菌群像，估計細菌總數(shù)、球菌與桿菌的比例，革蘭陽性菌與陰性菌的比例及有無特殊形態(tài)的細菌增多。2、培養(yǎng)法是通過接種一定重量新鮮糞便于各種不同的培養(yǎng)基上，對生長出來的菌落進行菌種鑒定及計數(shù)，對腸道菌群各菌種進行定量培養(yǎng)。將每種細菌的數(shù)量與參考值進行比較，或計算雙歧桿菌/腸桿菌（B/E）值，即可評估腸道菌群的狀況。B/E﹥1，表示腸道菌群組成正常。B/E﹤1，