失血性休克實(shí)驗(yàn)

失血性休克實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)性失血性休克

【目的】了解失血性休克動(dòng)物模型的復(fù)制方法；觀察失血性休克時(shí)的主要體征及血流動(dòng)力學(xué)變化特點(diǎn)；探討失血性休克的發(fā)病機(jī)理及救治措施。

【原理】根據(jù)微循環(huán)學(xué)說，休克定義為各種原因引起有效循環(huán)血量減少，微循環(huán)灌流障礙，引起重要生命器官血液灌注不足，從而導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂的全身性病理過程。休克的病因有多種，本實(shí)驗(yàn)采用頸動(dòng)脈放血的方法，直接減少有效循環(huán)血量，復(fù)制低血容量性休克模型。由于放血一定程度后可使循環(huán)血量不足，靜脈回心血量減少，血壓下降，通過壓力感受器反射，引起交感神經(jīng)興奮，外周血管收縮，組織灌流量急劇減少，導(dǎo)致失血性休克。通過輸液，補(bǔ)充血容量，搶救休克，同時(shí)使用不同血管活性藥物，比較其療效，分析它們?cè)谑а孕菘酥委熤械淖饔谩?/p>

【器材】

BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，壓力換能器兩套，張力換能器一套，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械一套，靜脈輸液裝置一套，尿量測(cè)定裝置一套，10ml量筒一個(gè)，注射器（2ml、5ml、10ml、30ml），兔臺(tái)，嬰兒秤。

【藥品】

20%烏拉坦溶液，0.9%生理鹽水，1%肝素生理鹽水，1%去甲基腎上腺素，10%葡萄糖水注射液。

【動(dòng)物】家兔。

【觀察指標(biāo)】動(dòng)脈血壓（Bp，mmHg）、中心靜脈壓（CVP，mmHg）、呼吸（頻率、深度）、尿量。

【方法】1.手術(shù)操作

(1)家兔稱重后，腹腔注射20%烏拉坦(5ml/kg)進(jìn)行麻醉，將動(dòng)物仰臥固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，頸部和腹部剪毛備皮；

(2)從甲狀軟骨至胸骨切跡之間切開頸部正中皮膚，切口長(zhǎng)度約5cm；

(3)翻開右側(cè)皮膚，見顏色暗紅且較粗大的頸外靜脈。由于靜脈血管壁很薄且不易與筋膜區(qū)分，應(yīng)使用血管鉗沿血管走行方向小心鈍性分離，將血管外層筋膜分離干凈。分離出約2～3cm左右的右側(cè)頸外靜脈后，穿雙線備用。

(4)在氣管左側(cè)胸骨舌骨肌和胸鎖乳突肌之間鈍性分離，其深層即可見頸動(dòng)脈鞘，觸之有明顯搏動(dòng)感。以血管鉗仔細(xì)分離出左側(cè)頸總動(dòng)脈(注意：勿損傷迷走神經(jīng))，穿雙線備用(圖1)。

圖

1

家兔頸外靜脈和頸總動(dòng)脈示意圖

(5)下腹部恥骨聯(lián)合上作下腹正中切口，長(zhǎng)3～5cm，找出膀胱后，用小圓針細(xì)線在少血管區(qū)域進(jìn)行斷續(xù)荷包縫合。在荷包內(nèi)作一直切口，插管后拉緊縫線固定之。收集尿液于10ml量筒內(nèi)(圖2)。

(6)由耳緣靜脈注入l%肝素(1：ml/kg)抗凝。圖2膀胱插管示意圖

(7)先用血管夾夾閉右側(cè)頸外靜脈的近心端，再用縫線結(jié)扎遠(yuǎn)心端，用眼科剪在靠近結(jié)扎處管壁上剪一小口(約為血管直徑的1/4～l/3)，仔細(xì)插入事先已注滿生理鹽水并排除氣泡的靜脈插管。小心調(diào)整角度，輕輕將插管插入靜脈約5cm，結(jié)扎固定。通過三通開關(guān)連接中心靜脈壓壓力換能器和靜脈輸液裝置，以測(cè)定中心靜脈壓(以mmHg表示)。

(8)結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端，再用血管夾夾閉其近心端，按如上方法插入頸總動(dòng)脈插管，結(jié)扎固定，通過三通開關(guān)連接動(dòng)脈血壓壓力傳感器，以測(cè)定動(dòng)脈血壓(以mmHg表示)。(9)在動(dòng)物胸腹部呼吸最明顯處，以彎針穿線固定于張力傳感器，調(diào)整傳感器的方向及縫線的松緊程度，以描記出呼吸曲線。

2.實(shí)驗(yàn)步驟

(1)動(dòng)物穩(wěn)定10min后，記錄正常狀態(tài)下的血壓(mmHg)、中心靜脈壓(mmHg)、呼吸曲線及尿量(ml/10min)。

(2)由頸總動(dòng)脈插管的三通開關(guān)處放血，盛于80ml的小燒杯中。開始時(shí)每放血10ml即關(guān)閉開關(guān)，監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血壓變化，隨著血壓的下降，逐漸縮短放血時(shí)間和放血量，待血壓降到40mmHg時(shí)停止放血。此時(shí)若血壓回升，可繼續(xù)少量放血，使血壓維持于40mmHg20～30min后，即可造成失血性休克模型。記錄失血量并連續(xù)觀察失血過程中上述指標(biāo)變化。

注意：由于放血時(shí)壓力傳感器一側(cè)開關(guān)被關(guān)閉，因此此時(shí)系統(tǒng)顯示的血壓并不能代表體內(nèi)的真實(shí)血壓!必須停止放血后才能正確測(cè)得動(dòng)脈血壓的變化。切不可一次放血過多而造成動(dòng)物死亡!

(3)由耳緣靜脈緩注l%去甲基腎上腺素(1ml/kg)，觀察和記錄上述指標(biāo)變化(重點(diǎn)記錄血壓上升的最高值及變化時(shí)間)。

(4)以40～60滴/分的速度由靜脈輸人生理鹽水，輸液總量約為失血量的2～3倍。每輸液50ml即觀察并記錄各項(xiàng)指標(biāo)的變化。

(5)另可根據(jù)休克的病理生理改變自行設(shè)計(jì)方案搶救。

【結(jié)果】

BP

CVP

尿量

放血前放血至60mmHg放血至40mmHg10min后靜脈輸入藥物后治療結(jié)束時(shí)

【注意事項(xiàng)】

1.操作中應(yīng)盡量減少手術(shù)性出血，如有少量出血，切勿驚慌，可用生理鹽水紗布?jí)浩戎寡?/p>

2.插管內(nèi)事先應(yīng)加入少量肝素，以防凝血。

3.動(dòng)脈插管容易滑脫，故應(yīng)結(jié)扎和固定牢靠。

【思考題】

1.失血性休克時(shí)，血液動(dòng)力學(xué)有何改變?

2.對(duì)失血性休克應(yīng)如何進(jìn)行搶救?請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)出一套搶救方案。

【附錄】腸系膜微循環(huán)觀察

實(shí)驗(yàn)中也可觀察腸系膜的微循環(huán)變化，其方法如下：

1.取顯微鏡一臺(tái)，卸下載物臺(tái)，將鏡身由縱軸位拉至水平位，將一塊帶孔的泡沫塑料固定于載物臺(tái)上，然后，將鏡身側(cè)位安置在接近家兔上腹部切口處，用無齒卵圓鑷自腹腔輕輕提出大網(wǎng)膜，將其游離末端平鋪于預(yù)先浸滿生理鹽水的海綿墊上，并用大頭針固定于鏡臺(tái)泡沫上方，調(diào)整恒溫恒流滴數(shù)(30滴/分)。

2.在低倍鏡下找一個(gè)較為標(biāo)準(zhǔn)的微循環(huán)單位，認(rèn)準(zhǔn)小動(dòng)脈，小靜脈，直捷通路，動(dòng)-靜脈短路及真毛細(xì)血管網(wǎng)，仔細(xì)觀察血管形態(tài)、管徑大小以及微血流的流速、流態(tài)。

3.從股動(dòng)脈放血，至血壓