面試3D講師測試題試卷及免疫比濁法測C反應(yīng)蛋白

3dsMax效果圖測試試卷單選題（每題2分，共100分）1如何關(guān)閉［軌跡欄］的顯示__________。A通過［視圖］菜單B通過［自定義用戶界面］面板C通過［顯示UI］菜單D通過［軌跡欄］右鍵菜單2如何將AutoCAD文件導(dǎo)入到3dsMax場景中________。A通過［合并］命令B通過［外部參照對象］命令C通過［外部參照場景］命令D通過［導(dǎo)入］命令3以下哪個工具，可以將場景中使用的貼圖路徑信息列成一個文件_________。A［摘要信息］工具B［歸檔］工具C［資源收集器］工具D［貼圖/光度學(xué)路徑編輯器］工具4保留原來場景的情況下，導(dǎo)入3DStudioMAX文件時應(yīng)選擇的命令是_________。A合并B替換C新建D導(dǎo)入5在3dsMax默認設(shè)置下，［限制到Y(jié)軸］的快捷鍵是_______。AF5BF6CF7DF86下列哪個命令可以用來輸入擴展名為TRC格式的文件________。A［文件＞打開］B［文件＞合并］C［文件＞導(dǎo)入］D［文件＞外部參照對象］7在系統(tǒng)單位為［毫米］的場景中，導(dǎo)入以［英寸］為基本單位設(shè)置的CAD文件，應(yīng)當如何設(shè)置尺寸最為合理_________。A先將3dsMax場景的系統(tǒng)設(shè)置改為英寸，再導(dǎo)入CAD文件。B先在AutoCAD軟件中將CAD文件的尺寸單位轉(zhuǎn)換為毫米，然后再導(dǎo)入到3dsmax中。C在3dsmax的［AutoCADDWG/DXF導(dǎo)入選項］設(shè)置面板中進行重縮放設(shè)置。D不用管，3D會自動識別更換單位8對樣條線進行［輪廓］編輯修改應(yīng)該在哪個子對象層級中進行________。A［頂點］B［線段］C［樣條線］D［整個線對象］9以下一種可編輯修改器可以直接將對象進行網(wǎng)格平滑________。A［可編輯樣條線］B［可編輯網(wǎng)格］C［可編輯多邊形］D［可編輯面片］10使用布爾工具獲取兩個幾何體重疊的部分應(yīng)該選用哪種布爾運算方式________。A［交集］B［并集］C［差集］D［切割］11以下哪個修改器不能直接將二維圖形對象轉(zhuǎn)化為三維實體________。A［放樣］B［噪波］C［倒角剖面］D［擠出］12以下一種可編輯修改器可以直接控制點對象的［Bezier］桿________。A［可編輯樣條線］B［可編輯網(wǎng)格］C［可編輯多邊形］D［可編輯面片］13一個3dsMax場景中最多可以有多少種材質(zhì)_________。A24個B100個C256個D任意多個14在［標準材質(zhì)］中以下哪個值是用來控制材質(zhì)高光強度的________。A［高光級別］值B［光澤度］值C［柔化］值D［高光反射］值15關(guān)于［建筑材質(zhì)］中的模板對以下哪些方面沒有影響________。A［漫反射顏色］B［反光度］C［透明度］D［折射率］16以下關(guān)于［多維/子對象］材質(zhì)的敘述不正確的是哪個________。A多維/子對象材質(zhì)中的每個子材質(zhì)都是一個完整的材質(zhì)。B多維/子對象材質(zhì)可以設(shè)定無數(shù)個子材質(zhì)。C當刪除該多維/子材質(zhì)時，其所有子材質(zhì)也會一同被刪除。D多維/子對象材質(zhì)不能再嵌套更多的多維/子對象材質(zhì)17［不透明度］的百分比值為______時，對象是完全透明顯示。A0B30C18材質(zhì)編輯器［明暗器基本參數(shù)］卷展欄中，哪種明暗器適合建立弧形表面的橢圓形的高光，可以用于產(chǎn)生磨沙金屬或頭發(fā)的效果_________。A［各向異性］B［Phong］C［金屬］D［Blinn］19表現(xiàn)室內(nèi)日景效果時，窗玻璃通常應(yīng)具有以下哪種效果_________。A有輕微反射B有強烈折射C沒有反射D有強烈反射20下列選項中不屬于材質(zhì)類型的是_______。A光線跟蹤B位圖C蟲漆D雙面21表現(xiàn)室內(nèi)夜景效果時，通常窗玻璃應(yīng)具有以下哪種效果_________。A具有強烈的反射B具有強烈折射C沒有反射D沒有折射22如果給一個幾何體增加了UVWMap編輯修改器，并將U向平鋪次數(shù)設(shè)置為2，同時將該幾何體貼圖通道的坐標卷展欄中U向平鋪次數(shù)設(shè)置為3，哪么貼圖的實際重復(fù)次數(shù)是幾次__________。A2B3C5D623對復(fù)雜的角色模型進行貼圖編輯，比較適合的貼圖工具是_______。A［UVW貼圖］B［UVW展開］C［貼圖縮放器］D［蒙皮］24以下哪些燈光是沒有目標點的________。A泛光燈B自由點光源C自由平行光D目標聚光燈25下列說法中正確的是_______。A［高級光線跟蹤陰影］可以對陰影的生成方式進行微調(diào)，不支持透明貼圖。B［區(qū)域陰影］可以產(chǎn)生一個有半影區(qū)域的陰影，只支持不透明度貼圖。C［光線跟蹤陰影］可以產(chǎn)生真實的陰影，只支持不透明度貼圖。D以上說法都不正確。26下列關(guān)于燈光類型的描述，其中不正確的是________。A［mr區(qū)域泛光燈］只適用于mentalray渲染器B［天光］可以控制燈光的發(fā)光范圍C［自由聚光燈］產(chǎn)生錐形的照射區(qū)域D［自由平行光］產(chǎn)生平行的照射區(qū)域27關(guān)于［天光］的描述，下列說法正確的是________。A如果使用mentalray渲染器渲染，［天光］照明的對象只能顯示為黑色。B［天光］不可以投射陰影。C［天光］可以用來模擬日照效果。D［天光］不能和其他［標準燈光］一起使用。28下列選項中，哪些不屬于標準燈光_________。A［目標聚光燈］B［目標點光源］C［天光］D［泛光燈］29在生成預(yù)覽面板當中，“幀速率”項目下有個“播放FPS”的參數(shù)設(shè)置，它的具體意義是_______。A場景中動畫物體的運動速率。B場景的幀速率（制式）。C當前預(yù)覽文件的幀速率。D以上全部。30勾選了攝影機“剪切平面”參數(shù)的“手動剪切”項之后，調(diào)節(jié)“手動剪切”數(shù)值將會________。A影響場景中霧的范圍B影響沿攝影機所注視方向的可渲染范圍C影響攝影機的景深效果D影響攝影機的運動模糊效果31以下有關(guān)粒子的描述哪些說法是錯誤的________。A粒子不能被賦予材質(zhì)。B粒子必須使用特殊的材質(zhì)而不能使用標準材質(zhì)。C粒子只能使用標準材質(zhì)。D粒子可以支持所有3dsMax自帶的材質(zhì)類型。32［抗鋸齒過濾器］在渲染面板的哪個選項卡中_______。A［公用］選項卡B［渲染器］選項卡C［高級照明］選項卡值D［光線跟蹤器］選項卡33在工具欄中有些按鈕的右下角有個三角形標記，它所代表的含義是________。A表示該按鈕必須在有對象處于選擇狀態(tài)時才可使用。B表示該按鈕同時具有多個功能。C表示該按鈕是此版本的新增功能。D表示按住這個按鈕稍停片刻后，會彈出各種相關(guān)的隱藏工具。34當主工具欄的某些工具按鈕不能完全顯示時，讓其顯示出來的最快捷方法是________。A重新啟動3dsMax軟件。B安裝最新版本的3dsMax軟件。C刪除3dsmax.ini文件后重新啟動3dsmax軟件D依據(jù)實際情況提高屏幕的分辨率。35關(guān)于3dsMax插件下列說法錯誤的是_______。A所有的3dsMax插件都應(yīng)安裝在3dsMax根目錄下的plugins目錄下。B3dsMax的插件一般都是由不同的公司進行開發(fā)的，主要為3dsMax開發(fā)插件的公司有Digimation、Chaosgroup、Afterworks等。C常見的3dsMax插件有V-Ray渲染器、Brazil巴西渲染器等。DCebas公司的插件一般放在3dsMax根目錄下的Cebas目錄下。363dsMax中每安裝一個插件，都會占去一部分資源，因此在3dsMax中提供了插件的選擇加載控制，可以有效地控制各插件的使用，它在3dsMax的位置在_________。A［自定義（Customize）］菜單＞［配置系統(tǒng)路徑（ConfigureSystemPaths）］B［自定義（Customize）］菜單＞［配置用戶路徑（ConfigureUserPaths）］C［工具（Utilities）］命令面板＞［文件鏈接管理器（FileLinkManager）］D［自定義（Customize）］菜單＞［插件管理器（Plug-inManager）］37以下對幀速率敘述錯誤的是_____。AFPS是指1幀播放所用的時間。B3dsMax中可以自定義幀速率。C電影的幀速率一般為24FPS。D中國所用的電視制式為PAL制。38以下關(guān)于3dsMax中［幫助（Help）］說法錯誤的是______。A［幫助（Help）］提供了最詳細的教學(xué)范例。B［幫助（Help）］中可以通過搜索功能，快速找到所需查找的內(nèi)容。C［學(xué)習影片（LearningMovies）］可以在安裝3dsMax軟件后的第一次啟動時顯示出來。D在［關(guān)于3dsMax（About3dsMax）］中可以查看當前3dsMax的版本信息39物體在視圖中以實體方式顯示時，如果想讓其同時顯示線框可以使用的快捷鍵是_______。AF2BF3CF4DF540下面關(guān)于［幫助（Help）］菜單說法錯誤的說法是______。A［幫助（Help）］菜單可以對3dsMax2009提供軟件激活選項。B可以查看當前3dsMax的版本信息。C可以更改界面UI設(shè)置方案。D可以提供3dsMax的索引和搜索信息。41執(zhí)行菜單［視圖（Views）］＞［視口背景（ViewportBackground）］＞［視口背景（ViewportBackground）］）命令，可以為當前激活視圖設(shè)置背景圖，如果希望背景圖跟隨視口同時進行縮放和平移，則需要在［視口背景（ViewportBackground）］面板中設(shè)置的選項有？A［匹配視口（MatchViewport）］、［顯示背景（DisplayBackground）］B［匹配位圖（MatchBitmap）］、［顯示背景（DisplayBackground）］、［鎖定縮放/平移（LockZoom/Pan）］C［匹配視口（MatchViewport）］、［顯示背景（DisplayBackground）］、［鎖定縮放/平移（LockZoom/Pan）］D［使用環(huán)境背景（UseEnvironmentBackground）］、［顯示背景（DisplayBackground）］42［安全框（SafeFrame）］的作用是提示制作的有效范圍。［安全框（SafeFrame）］有3個線框范圍，分別是最外面的黃色線框、中間的青色線框和內(nèi)部的橙色線框，三種線框依次對應(yīng)的是_________。A［活動區(qū)域（LiveArea）］、［動作安全區(qū)（ActionSafe）］、［標題安全區(qū)（TitleSafe）］B［動作安全區(qū)（ActionSafe）］、［標題安全區(qū)（TitleSafe）］、［活動區(qū)域（LiveArea）］C［活動區(qū)域（LiveArea）］、［標題安全區(qū)（TitleSafe）］、［動作安全區(qū)（ActionSafe）］D［動作安全區(qū)（ActionSafe）］、［活動區(qū)域（LiveArea）］、［標題安全區(qū)（TitleSafe）］43以下不能通過［視口配置（ViewportConfiguration）］面板進行設(shè)置的項目是_______。A［渲染方法（RenderingMethod）］B［布局（Layout）］C［時間配置（TimeConfiguration）］D［安全框（SafeFrames）］443dsMax中的默認照明燈光最多能設(shè)置幾盞？A1盞B2盞C3盞D4盞45［文件（Save）］菜單下的命令可以將當前文件另外保存一份，同時仍然繼續(xù)編輯當前文件？A［保存（Save）］。B［另存為(SaveAs)］。C［保存副本為（SaveCopyAs）］。D［保存選擇對象（SaveSelected）］。46創(chuàng)建陣列的正確步驟是？①從［工具］菜單中選擇［陣列］工具；②選擇正確的坐標系和變換中心；③選擇要陣列的一個或多個對象；④在陣列對話框中設(shè)置陣列參數(shù)，設(shè)置好后單擊［確定］按鈕。A2314B3214C1234D312447以下有關(guān)［間隔工具（Spacing）］的描述正確的是？A使用［間隔工具（Spacing）］進行復(fù)制應(yīng)用后，如果對結(jié)果不滿意，可以再次打開B［間隔工具（Spacing）］對話框進行調(diào)節(jié)。C使用［間隔工具（Spacing）］所拾取的路徑可以是包含多個樣條曲線的合成圖形。D［間隔工具（Spacing）］復(fù)制得到的物體必然存在著關(guān)聯(lián)，即對其中任何一個物體進行修改，都會影響到其它物體。使用［間隔工具（Spacing）］進行復(fù)制時，一定會在路徑的起始點上產(chǎn)生物體。48以下關(guān)于［置換］修改器的說法不正確的是_____。A［置換］修改器要求被置換物體有足夠的分段數(shù)以表現(xiàn)細節(jié)。B［置換］修改器只能識別貼圖的灰度信息。C［置換］修改器可以將一個圖像映射到三維對象表面，根據(jù)圖像的灰度值，對三維對象產(chǎn)生影響，白色部分凸起，黑色部分凹陷。D［置換］修改器的貼圖有五種貼圖Gizmo可以使用，分別是［平面］、［柱形］、［球形］、［長方體］、［收縮包裹］。49以下有關(guān)［噪波］修改器描述錯誤的是_____。A通過調(diào)節(jié)［種子］值，可以使噪波隨機產(chǎn)生不同效果B勾選［分形］可以使噪波效果更劇烈C為平面對象添加［噪波］修改器可以制作山脈、水面等D噪波動畫需要手工設(shè)置關(guān)鍵點才能產(chǎn)生50下面關(guān)于［放樣（Loft）］工具說法錯誤的是_____？A創(chuàng)建放樣對象之后，可以添加并替換橫截面圖形或替換路徑。B可以更改或設(shè)置路徑和圖形的參數(shù)動畫。C可以對截面圖形設(shè)置動畫。D不可以將放樣對象轉(zhuǎn)換為多邊形。答案：1-5CDBAB6-10CCCCA11-15BADAA16-20DAAAB21-25ADBAD26-30BCBCB31-35DBDDA36-40DAACC41-45BACBC46-50BBDDD免疫比濁法是抗原抗體結(jié)合動態(tài)測定方法。其基本原理是：當抗原與抗體在特殊稀釋系統(tǒng)中反應(yīng)而且比例合適(一般規(guī)定抗體過量)時，形成的可溶性免疫復(fù)合物在稀釋系統(tǒng)中的促聚劑（聚乙二醇等）的作用下，自液相析出，形成微粒，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當抗體濃度固定時，形成的免疫復(fù)合物的量隨著檢樣中抗原量的增加而增加，反應(yīng)液的濁度也隨之增加。通過測定反應(yīng)液的濁度與一系列標準品對照，即可計算出檢樣中抗原的含量。抗體（Ab）與可溶性抗原（Ag）反應(yīng)，形成一定結(jié)構(gòu)的免疫復(fù)合物，成為懸浮于反應(yīng)溶液中的微粒。在沉淀反應(yīng)中形成的復(fù)合物微粒具有特殊的光學(xué)性質(zhì)，可用儀器檢測，提高了檢測的速度、靈敏度和易操作性。免疫比濁測定注意事項：1、抗原或抗體量大大過剩，可出現(xiàn)可溶性復(fù)合物，造成誤差。2、應(yīng)維持反應(yīng)管中抗體蛋白始終過剩。3、易受到脂血的影響。分類1.免疫透射比濁法抗原抗體結(jié)合后，形成免疫復(fù)合物，在一定時間內(nèi)復(fù)合物聚合出現(xiàn)濁度。當光線通過溶液時，可被免疫復(fù)合物吸收。免疫復(fù)合物量越多，光線吸收越多。光線被吸收的量在一定范圍內(nèi)與免疫復(fù)合物的量成正比。利用比濁計測定光密度值，復(fù)合物的含量與光密度值成正比，同樣當抗體量一定時，光密度值也與抗原含量成正比。本法較單向瓊脂擴散試驗和火箭電泳等一般免疫化學(xué)定量方法敏感、快速簡便，但要求免疫復(fù)合物的數(shù)量和分子量達到一定高度，否則就難以測出。2.免疫散射比濁法一定波長的光沿水平軸照射，通過溶液使遇到抗原抗體復(fù)合物粒子，光線被粒子顆粒折射，發(fā)生偏轉(zhuǎn)，光線偏轉(zhuǎn)的角度與發(fā)射光的波長和抗原抗體復(fù)合物顆粒大小和多少密切相關(guān)。散射光的強度與復(fù)合物的含量成正比，即待測抗原越多，形成的復(fù)合物也越多，散射光也越強。散射光的強度還與各種物理因素，如加入抗原或抗體的時間、光源的強弱和波長、測量角度等密切相關(guān)。散射比濁法又分為速率散射比濁法和終點散射比濁法。3.免疫膠乳比濁法膠乳比濁法即是將待測物質(zhì)相對應(yīng)的抗體包被在直徑為15－60nm的膠乳顆粒上，使抗原抗體結(jié)合物的體積增大，光通過之后，透射光和散射光的強度變化更為顯著，從而提高試驗的敏感性。實驗八免疫比濁法測定C-反應(yīng)蛋白【原理】血清C反應(yīng)蛋白（CRP）與試劑中抗人CRP抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，一起吸光度增加，在波長340nm和700nm處測定免疫復(fù)合物濁度。根據(jù)吸光度增加量，即可定量檢測血清中CRP的含量?！驹噭?．0.1mol/L的Tris緩沖液。2．羊抗人CRP抗血清。3．CRP定標液。【操作步驟】見表8-1。表8-1免疫比濁法測定C反應(yīng)蛋白操作步驟加入物空白管標準管測定管血清標本(μl)－－15CRP定標液(μl)－15－生理鹽水(μl)15－－緩沖液(μl)350350350混合，于37℃讀各管吸光度(A1340、A1700)抗人CRP抗血清(μl)505050混合，于37℃讀各管吸光度(A2340、A2700)【計算】HDL-C含量(mmol/L)＝×標準液濃度⊿A＝(A2340－A2700)－(A1340－A1700)【參考范圍】血清C反應(yīng)蛋白＜4mg/L(各實驗室應(yīng)有自己的參考范圍)【注意事項】1．使用新鮮血清，并盡可能快地檢測。2．試劑不能冷凍保存?！九R床意義】CRP是一種急性相蛋白，肝臟是其主要的合成器官。最近研究表明，人體其他部位如冠狀動脈平滑肌細胞、神經(jīng)元細胞、血管內(nèi)皮細胞、脂肪細胞、腎小管上皮細胞等在炎癥刺激或病理狀態(tài)下都能合成和分泌CRP。正常情況下，CRP以微量存在于健康人的血清中，但在機體有細菌感染、組織損傷、腫瘤形成等急性相刺激時，CRP水平可升至正常的100倍甚至更高。測定CRP對于鑒別感染、監(jiān)測疾病活動情況及嚴重程度、器質(zhì)性疾病的篩檢、監(jiān)測器官移植受體排斥反應(yīng)及療效觀察、冠心病等急性血管意外事件的預(yù)測與診治等有很好的導(dǎo)向作用?！驹u價】CRP的檢測方法從靈敏度較低的免疫擴散法、火箭電泳法、膠乳凝集試驗到高靈敏度、高精密度的放射免疫、酶免疫、免疫比濁等定量試驗。多數(shù)情況下，半定量的膠乳凝集試驗適合于篩查，但其影響因素多、靈敏度較差和不能精確定量。對于需作較精確的CRP定量測定，免疫濁度法較為合適。其他方法如ELISA、免疫發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法雖然靈敏度和精確度都較高，但其成本也較高,故不是理想的臨床實驗室的常規(guī)方法。1材料與方法1.1兔抗人白蛋白免疫羧化膠乳的制備1.1.1兔抗人白蛋白抗體的制備采用25％人血漿白蛋白注射液，按常規(guī)免疫新西蘭純種白兔，獲得兔抗人白蛋白免疫血清（效價1:32），經(jīng)飽和硫酸銨沉淀后，過DE－52層析柱，IgG峰部洗脫液用Follin酚法于540nm處定量測定IgG蛋白含量，并用聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳鑒定，僅出現(xiàn)一條區(qū)帶。1.1.2兔抗人白蛋白免疫羧化膠乳的制備取10％羧化聚苯乙烯膠乳懸液（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動物中心產(chǎn)品，Φ=0.6μm），用pH8.2甘氨酸緩沖液（GBS）稀釋成1％濃度，將其于兔抗人白蛋白IgG按適當比例混合，以常規(guī)物理吸附法致敏膠乳[2]。1.2敏感性試驗取25％人血漿白蛋白20μl，加入生理鹽水180μl，再經(jīng)系列稀釋成10個濃度，其濃度范圍在25mg/ml～3.125ng/ml之間，用兔抗人免疫羧化膠乳做3次重復(fù)檢測。1.3特異性試驗將牛、馬、羊、豚鼠血清分別稀釋至5％、2.5％和1.25％，用兔抗人白蛋白免疫羧化膠乳檢測。1.4重復(fù)性試驗用四批兔抗人白蛋白免疫羧化膠乳，對5份糞微量白蛋白陽性糞便標本和2份已知濃度白蛋白溶液平行檢測，并在有效期內(nèi)用同一批免疫羧化膠乳先后7次重復(fù)檢測，同時設(shè)陰性對照。3討論兔抗人白蛋白免疫羧化膠乳試劑對糞微量白蛋白的檢測，是針對糞便中由于病變部位出血后的血漿蛋白，或組織滲出液中的白蛋白。而檢測糞微量白蛋白作為大腸腫瘤的篩檢手段之一，最早是在1987年，日本中山拓郎等曾用ELISA法對糞潛白蛋白（Occultalbmin）進行定量檢測，并認為其敏感性優(yōu)于便潛血。1993年，我們制備和建立了兔抗人白蛋白免疫羧化膠乳試劑和反向膠乳凝集試驗，檢測了378例已知患者和正常人糞便標本，其臨床結(jié)果顯示：56例大腸癌診斷敏感性55.4％，特異性82.6％；132例正常人陽性率17.4％。近來我們增加了已知患者數(shù)量，重新檢測了161例正常人糞微量白蛋白，結(jié)果表明：在增加受檢人數(shù)后，提高了大腸癌的診斷敏感性（76.8％），而特異性則無顯著差別（80.0％）；161例正常人陽性率為19.2％，比原來的132例正常人陽性率高1.8％。實驗結(jié)果顯示：在受檢人數(shù)增多的情況下，用該試劑檢測糞微量白蛋白可能會達到提高診斷敏感性，保持特異性的良好效果。C-反應(yīng)蛋白檢測試劑盒（全量程）試制工作總結(jié)

一、概述C反應(yīng)蛋白（C-reactiveprotein）是一種能與肺炎鏈球菌C多糖體反應(yīng)形成復(fù)合物的急性時相反應(yīng)蛋白，半衰期19小時；血清CRP由肝臟合成，白細胞介素1b、6以及腫瘤壞死因子是其合成的最重要的調(diào)節(jié)因子；CRP的分子量為105500，由含有五個相同的未糖基化的多肽亞單位組成，每個亞單位含有187個氨基酸，這些亞單位間通過非共價鍵連結(jié)成環(huán)狀的五聚體，并有一個鏈間二硫鍵。

1930年，Tillett和Francis首次在急性大葉性肺炎患者的血清中發(fā)現(xiàn)一種能在Ca2+存在時與肺炎球菌細胞壁中的C－多糖發(fā)生特異性沉淀反應(yīng)的物質(zhì)。1941年，Avery等測知它是一種蛋白質(zhì)，故稱為C反應(yīng)蛋白(CRP)。1944年，Jones將其作為臨床風濕熱診斷標準的次要指標之一。后來，人們在非感染性疾病和感染性疾病患者的急性期血清中都測到了CRP，于是人們認為，CRP是組織損傷的一種非特異性反應(yīng)。進一步研究發(fā)現(xiàn)：病毒或細菌感染、梗塞、免疫復(fù)合物沉積等因素都可導(dǎo)致組織損傷。在組織損傷的急性期，肝臟合成的一些血漿蛋白顯著增加，這些蛋白質(zhì)通稱為急性時相蛋白，其中CRP是急性時相蛋白中變化最顯著的一種。CRP在正常人血清中其含量極微；在組織受到損傷、炎癥、感染或腫瘤破壞時CRP可以在數(shù)小時內(nèi)急劇上升，可增高數(shù)倍或數(shù)百倍，2-3天達峰值，待病情改善時逐漸下降，恢復(fù)正常。CRP被廣泛應(yīng)用于臨床疾病的早期診斷及鑒別診斷，其升高可見于：1、組織損傷、感染、腫瘤、心肌梗塞及一系列急慢性炎癥性疾病，如風濕性關(guān)節(jié)炎、全身性血管炎、多肌痛風濕??；2、術(shù)后感染及并發(fā)癥的指標：手術(shù)后病人CRP升高，術(shù)后7—10天CRP水平應(yīng)下降，如CRP不降低或再次升高，提示可能并發(fā)感染或血栓栓塞；3、可作為細菌性感染和病毒性感染的鑒別診斷：大多數(shù)細菌性感染會引起患者血清CRP升高，而病毒性感染則多數(shù)不升高。

超敏C反應(yīng)蛋白（HighsensitivityC-reactiveprotein）與CRP并不是兩種蛋白，只是從靈敏度上加以區(qū)分,超敏C反應(yīng)蛋白(Hs-CRP)最低檢測限達0.1mg/l;原先認為CRP是正常的血清卻發(fā)現(xiàn)同未來發(fā)生心血管疾病密切相關(guān),大量研究資料表明,動脈粥樣化的血栓去除了是脂肪堆積的過程外也是一個慢性炎癥過程,；Hs-CRP輕度升高與冠狀動脈事件、中風及周圍血管病相關(guān)，是一項獨立的危險因素；HS-CRP已被證實是由慢性炎癥引發(fā)心血有較高的靈敏度但線性較低，這樣就出現(xiàn)了一種試劑兩種名稱，用途也有所區(qū)別；近幾年來，隨著檢驗技術(shù)的發(fā)展，開始出現(xiàn)了一種全量程CRP，這種CRP即能滿足較高的靈敏度，又能滿足較高的線性，如日本一化，申索佑福等，我公司通過與中科院上海生物研究所合作，近期已完成全量程CRP的試制，經(jīng)公司自檢與醫(yī)院試用，結(jié)果表明與免疫散射比濁法一致性好；公司已計劃于近期完成臨床與注冊，正式推向市場；二、國內(nèi)外研究情況2.1臨床研究CRP作為一種急性時相反應(yīng)蛋白，被廣泛應(yīng)用于臨床。2.1.1用于細菌和病毒感染的鑒別診斷當細菌感染引發(fā)炎癥，在炎癥進程開始4～7小時就可開始升高，且升高的幅度與細菌感染的嚴重程度相一致，病毒感染時CRP不增高，以此鑒別感染的性質(zhì)，指導(dǎo)臨床治療，減少不管疾病的獨立危險因素，檢測其濃度對心血管疾病的干預(yù)及預(yù)后起重要作用而被臨床重視。流行病學(xué)調(diào)查也顯示,hs-CRP水平升高者發(fā)生急性腦卒中的幾率是正常健康人的2倍,發(fā)生心肌梗死的幾率是正常者的3倍。2003年歐洲高血壓防治指南(ESH/ESC)正式推薦,高血壓患者需檢測hs-CRP水平。

目前國內(nèi)用于全自動生化儀的免疫透射比濁法試劑CRP出現(xiàn)了兩種（普通CRP與超敏CRP），普通CRP有較高的線性但靈敏度不好，超敏CRP必要的抗生素治療，有效防止抗生素的濫用。這些感染臨床上常見于肺炎、支氣管炎、咽喉炎、細菌性腦膜炎、傷寒、化膿性關(guān)節(jié)炎、尿路感染、骨盆炎、闌尾炎等等。在鑒別細菌或病毒感染方面，比白細胞計數(shù)及分類計數(shù)更準確，特別是老年人，免疫系統(tǒng)反應(yīng)順應(yīng)性下降，可能有感染發(fā)生但臨床上并無發(fā)熱、白細胞升高等情況，此時檢測CRP有助于檢出細菌感染。2.1.2腫瘤監(jiān)測CRP的測定用于腫瘤的治療和預(yù)后：CRP術(shù)前上升,術(shù)后下降，不受放療、化療和皮質(zhì)激素治療的影響，有助于臨床評估腫瘤的進程。2.1.3監(jiān)控病情變化及術(shù)后感染，并用于抗生素療效觀察CRP在血中升高的幅度與感染的程度正相關(guān)。有研究表明，術(shù)后6小時左右，CRP開始升高，如無并發(fā)癥應(yīng)在術(shù)后三天下降直至正常，如術(shù)后出現(xiàn)感染，則CRP長時間不下降；術(shù)前CRP升高者，術(shù)后感染率也遠高于術(shù)前CRP不高者。對于燒傷病人，可檢測CRP以警示是否發(fā)生敗血癥，以便及時應(yīng)對治療。對疑有敗血癥的新生兒，在24～48小時內(nèi)作CRP的動態(tài)監(jiān)測，可作為是否停止抗生素治療的可靠依據(jù)，而血培養(yǎng)的時間則需更長，培養(yǎng)結(jié)果出來之前無法排除敗血癥。對細菌感染作抗生素治療時，動態(tài)檢測CRP是必要的，它比臨床體征更早作出并發(fā)癥警報和治療效果的判定，在粒細胞缺乏癥或機體免疫狀態(tài)抑制時更有臨床意義。2.1.4用于評估急性胰腺炎的嚴重程度入院時CRP>110mg/l，可能是出血性胰腺炎（臨床靈敏度８８％，特異性９４％）；當CRP>250mg/l時,可提示為廣泛性壞死性胰腺炎。2.1.5風濕病類風濕性關(guān)節(jié)炎患者CRP與疾病相關(guān)性較大，比臨床癥狀出現(xiàn)要早4-6周。2.1.6肺部感染肺炎在年老人群中較難診斷，通常不大有發(fā)熱。在許多情況下ＣＲＰ>100mg/l，提示細菌感染，如肺炎或化膿性支氣管炎。典型的病毒性肺炎不會超過50mg/l。2.1.7兒科感染性疾?。涸趦和毙粤馨图毎籽〕０l(fā)性細菌敗血癥，CRP超過100mg/L,則視為有細菌感染;兒童CRP細菌性腦膜炎時平均195mg/L，而病毒性腦膜炎則低得多。

2.1.8腎臟移植排異

移值后8天CRP下降至正常，如發(fā)生排斥反應(yīng)則血清肌酐、尿氮、CRP皆升高。CRP升高在排斥反應(yīng)發(fā)生之前4天出現(xiàn)。但是，感染也可發(fā)生CRP升高，要注意兩者鑒別。2.1.9心血管疾病隨著檢驗技術(shù)的發(fā)展,原先認為CRP是正常的血清卻發(fā)現(xiàn)同未來發(fā)生心血管疾病密切相關(guān),大量研究資料表明,動脈粥樣化的血栓去除了是脂肪堆積的過程外也是一個慢性炎癥過程,；CRP輕度升高與冠狀動脈事件、中風及周圍血管病相關(guān)，是一項獨立的危險因素；①

未來發(fā)生心血管疾病發(fā)病率和死亡率的預(yù)測指標Hs-CRP是健康人未來發(fā)生心血管事件一個有價值的預(yù)測指標，許多研究證實Hs-CRP能預(yù)測首次心肌梗死和疾病的發(fā)作，內(nèi)科健康研究（PHS）顯示，Hs-CRP位于最高四分位數(shù)的病人未來發(fā)生卒中危險增加2倍，未來發(fā)生心肌梗死危險增加3倍，未來發(fā)生周圍血管疾病的危險增加4倍。這種預(yù)測作用長期穩(wěn)定存在于吸煙和非吸煙者中，且獨立于其他危險因素。Hs-CRP是已知CHD病人未來心血管病發(fā)病和死亡的預(yù)測指標，歐洲ECTA研究組的資料顯示，穩(wěn)定性心絞痛（SAP）和不穩(wěn)定性心絞痛（UAP）病人Hs-CRP濃度每升高一個標準差，非致命性心肌梗死或心臟性猝死的相對危險增加45%。②

急性冠脈綜合癥（ACS）的預(yù)后指標Hs-CRP測定對ACS的預(yù)后價值，首先是在急性局部缺血和不穩(wěn)定心絞痛的病人中提出的，重度不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）病人入院時若Hs-CRP≥3mg/l比Hs-CRP﹤3mg/l者心絞痛復(fù)發(fā)、冠狀動脈血管置換術(shù)、心肌梗死和心血管疾病致死等心血管事件發(fā)生率高；出院時測Hs-CRP比入院時測能更好的預(yù)測90天的不良后果；檢測Hs-CRP有助于鑒別心肌鈣蛋白（cTn）陰性而病死率增高的病人,應(yīng)聯(lián)合合使用cTn與Hs-CRP來評估ACS危險程度,ACS病人入院時Hs-CRP≥5mg/l與半年內(nèi)嚴重心臟病發(fā)病率升高相關(guān),而不管cTn值如何。③

與TC/HDL-C聯(lián)合預(yù)測冠心病危險在冠心病的危險性研究評估時,Hs-CRP與血脂指標是獨立的變量,將兩者同時檢測并聯(lián)合分析,在諸多變量分析過程中,記錄諸多冠心病危險因素如肥胖\高血壓\糖尿病\冠心病家族史等，各種生化指標中僅Hs-CRP與TC/HDL-C有單獨的預(yù)測價值,兩者聯(lián)合意義更大。

2.2國內(nèi)外試劑盒發(fā)展CRP的測定方法較多，一般分為定性與定量兩種。定性方法有：用純化了的肺炎球菌C-組分與病人血清反應(yīng)的沉淀法、肺炎球菌莢膜腫脹試驗、特異性抗血清與CRP反應(yīng)的毛細管沉淀試驗、補體結(jié)合試驗、乳膠凝集試驗、乳膠擴散沉淀試驗等，但它們的靈敏度低，只用于定性檢測。定量檢測的有：放射免疫(RIA)、熒光免疫(FIA)、酶標免疫(ELISA)、速率散射比濁法（INA）、膠乳增強透射比濁法（ITA）；定性與定量相結(jié)合的方法有：快速檢測卡結(jié)合儀器法；其中放射法對人傷輻射傷害較大，已較少使用，熒光免疫(FIA)或化學(xué)發(fā)光需專用儀器且成本高，ELISA法多數(shù)為半自動操作，出結(jié)果慢，不適合批量檢測；速率散射比濁法（INA）需與比濁儀搭配使用，增加了儀器成本；快速檢測卡結(jié)合儀器法只是半定量試劑，不能準確定量；膠乳增強透射比濁法（ITA）是目前醫(yī)院較多使用的方法之一。目前國內(nèi)有兩種試劑，即普通CRP與超敏CRP，一個項目，兩種試劑，給用戶帶來了不便；隨著檢驗技術(shù)的發(fā)展，近幾年已出現(xiàn)了一種即有高線性又有高靈敏度的試劑，即全量程CRP，目前國外已有Orion公司、日本一化，申索佑福等公司推出了此種試劑，我公司通過與中科院上海生物研究所合作，近期已完成全量程CRP的試制，經(jīng)公司自檢與醫(yī)院試用，結(jié)果表明與免疫散射比濁法一致性好；公司已計劃于近期完成臨床與注冊，正式推向市場；全量程CRP即有普通CRP的高線性，又有超敏CRP的高靈活敏度，因此，CRP即可作炎癥標志物，也可用作Hs-CRP用于心血管疾病的預(yù)測與預(yù)后。三、試制過程目前，測定CRP的方法有很多，定性或半定量方法由于不是準確定量，已較少使用；定量方法放射免疫(RIA)、熒光免疫(FIA)、酶標免疫(ELISA)、速率散射比濁法（INA）、膠乳增強透射比濁法（ITA）等中以后兩種使用較多；目前國外已有Orion公司、日本一化，申索佑福等推出了膠乳增強透射比濁法試劑，國內(nèi)大多為進口試劑，我公司通過與中科院上海生研所合作，已完成小樣制備，并計劃于近期報批上市。3.1原理與試劑成份血漿中的CRP與試劑中膠乳包被的特異性抗體相結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物產(chǎn)生混濁;在一定的抗體濃度范圍內(nèi),其濁度高低與血清CRP含量成正比。通過測定特定波長的吸光度值，查標準曲線即可求出血清中CRP的含量。試劑成份：磷酸鹽100mM表面活性劑復(fù)合抗體當光線通過個渾濁介質(zhì)溶液時,由于溶液中存在混濁顆粒,光線被吸收了一部分,吸收的多少與混濁顆粒的量成正比,這種測定光吸收量的方法稱為透射比濁法。因有抗原抗體反應(yīng)，固稱為免疫透射比濁法，為增強靈敏度，采用膠乳增強免疫比濁法?？乖c抗體在一定條件下才能形成復(fù)合物，一定條件包括：①

抗體的要求抗體要求效價高（保持高線性），純度高（如不純，則有可能含其它抗體而有非特反應(yīng)從而導(dǎo)致結(jié)果偏高），親和力要強（親和力強生成的抗原抗體復(fù)合物才穩(wěn)定，不易解離）②

抗原抗體比例要求免疫復(fù)合物形成有三個階段，第一階段是形成抗原抗體復(fù)體物，第二階段是復(fù)合物交聯(lián)形成大網(wǎng)格結(jié)構(gòu)，第三階段是復(fù)合物聚合而形成沉淀。只有在抗體過量時，其濁度才會隨著CRP的增加面增加，若抗原過剩則會出現(xiàn)HOOK效應(yīng)而導(dǎo)致結(jié)果偏低而不準；③

促進劑與穩(wěn)定劑一般要求溶液中有非離子性親水性多聚體促進免疫復(fù)合物的形成，如PEG6000，含量3-4%。④PH一般在6.5-8.0之間,過酸過堿均會破壞試劑中抗體與樣本中的抗原。3.2膠乳的選擇與制備

由于測定用的波長與粒徑大小有關(guān),因此粒徑的均一性是影響測量精密度與均確度的一個重要因素。公司選用聚苯乙烯膠乳，聚苯乙烯膠乳用乳液聚合法制備小分子納米（25-50nm），采用微孔過濾技術(shù)，保證顆粒大小的一致性，小分子納米顆粒較一般顆粒（100-300nm）顆粒更小，不易發(fā)生自沉；過濾后的膠乳進行羧化，使羧基均勻分布于膠乳的表面。再把羧化的膠乳與D-二聚體抗體結(jié)合，結(jié)合方式包含物理吸附與化學(xué)交聯(lián)兩種，以增強抗原捕獲能力，縮短反應(yīng)時間，整過反應(yīng)過程在3-5分鐘內(nèi)結(jié)束，且化學(xué)交聯(lián)后形成的抗原抗體復(fù)合物更緊密，不易解離，結(jié)果更準確，精密度更好。表一、小分子納米技術(shù)與化學(xué)交聯(lián)技術(shù)應(yīng)用后的D-二聚體的精密度與準確度

XSDCv(%)批內(nèi)（n=20）1.50.064.0012322.44批間（n=20）1.40.053.571231.61.30

靶值測量值偏差相對偏差質(zhì)控12.02.150.157.5%質(zhì)控2109.620.383.8%質(zhì)控3136138.52.51.84%膠乳粒子在100-300nm時，膠乳顆粒易自沉，造成瓶間差批間差過大，而且由于粒徑過大，造成反應(yīng)為非均相反應(yīng)，CV變異較大，我公司采用創(chuàng)新的小分子納米技術(shù)，大大的延長了定標有效期，縮小了瓶間差與批間差，為真正意義上的均相反應(yīng)。表二、膠乳粒徑與定標有效期、瓶間CV、批間CV等關(guān)系膠乳粒徑（nm）定標有效期（天）是否均相反應(yīng)是否自沉100-3007-14非均相自沉25-5028均相均相分布，不自沉

批內(nèi)CV（%），N=20瓶間CV（%），N=20批間CV（%），N=20100-3004.55.56.825-502.83.04.1普通膠乳只通過物理吸附抗體，形成共價交聯(lián)，共價交聯(lián)結(jié)合相對不牢靠，而且吸附的抗體較少，會造成試劑線性偏或靈敏度低；我公司采用物理吸附的共價交聯(lián)與化學(xué)交聯(lián)相結(jié)合技術(shù)（化學(xué)交聯(lián)通過縮合劑炭化二亞胺將膠乳上的羧基與交聯(lián)物上的氨基縮合在一起），大大提高了試劑的穩(wěn)定性與靈敏度；表三、不同交聯(lián)膠乳試劑靈敏度與試劑穩(wěn)定性共價交聯(lián)穩(wěn)定6個月靈敏度較低反應(yīng)慢，復(fù)合物不太穩(wěn)定化學(xué)交聯(lián)穩(wěn)定9個月靈敏度高反應(yīng)快，復(fù)合物穩(wěn)定共價+化學(xué)交聯(lián)穩(wěn)定12個月靈敏度高反應(yīng)快，復(fù)合物很穩(wěn)定

3.3抗體的選擇與純化抗體的純度對測定的特異性有直接影響。不純的抗體將導(dǎo)致非特異反應(yīng)，引起結(jié)果假性升高，測量值不準等情況。因此必須采用單克隆抗體與親和層析技術(shù)純化的抗體，并用SDS鑒定純度，如出現(xiàn)多條電泳帶，則多明雜蛋白較多，需更進一步純化；

公司CRP抗體采用羊抗人多克克隆抗體與鼠抗人單克隆抗體的復(fù)合抗體，采用山羊或鼠體內(nèi)誘生法產(chǎn)生，產(chǎn)生的腹水用濾紙過濾，去除脂質(zhì)與大顆粒，再用離心的方法去除細胞碎片和大的蛋白質(zhì)，制成粗抗體；將粗抗原或純化抗原交聯(lián)到瓊脂糖珠SEPHAROSE4B制成親和層析柱,將粗抗體通過親和層析柱,洗去未結(jié)合的非特異性蛋白,再用硫氰酸鉀洗脫,洗脫流出液即為純的多克隆抗體?？贵w的效價：要求效價至少大于1：16，效價為抗體能引起濁度變化的最大稀釋倍數(shù)，公司采用的復(fù)合抗體中羊抗人多克克隆抗體效價大于1:16,鼠抗人單克隆抗體效價大于1:128;多抗保證線性與高值,單抗保證靈敏度與低值;抗體的保存：凍干抗體具有穩(wěn)定性好，保質(zhì)期長等特點，適合于長期保存，配成試劑后可加適量甘油與BSA作穩(wěn)定劑；多克隆抗體、單克隆抗體等復(fù)合抗體技術(shù)即保證了靈敏度與高線性，與普通CRP與超敏CRP兩種試劑等效，方便了醫(yī)院操作；親和層析技術(shù)的應(yīng)用，大大提高了抗體的純度與效價，最大限度避免了非特異性反應(yīng)，使結(jié)果準確性有了較大提高，精密度更好；表四、親和層析與復(fù)合抗體技術(shù)應(yīng)用后D-二聚體的精密度與準確度

XSDCv(%)批內(nèi)（n=20）1.50.053.331232.62.11批間（n=20）1.40.064.01253.02.4

靶值測量值偏差相對偏差質(zhì)控122.080.084%質(zhì)控21010.30.33%質(zhì)控3136134-21.5%

3．4微孔濾膜孔徑的選擇

試劑的穩(wěn)定性因素主要有膠乳抗體的純度,緩沖液的品質(zhì),試劑中的懸浮小顆粒,此小顆粒肉眼看不到,漂浮于試劑中,影響光的吸收,且用常規(guī)過濾無法去除,其主要成份為雜質(zhì)、短纖維