高分辨氣相色譜-高分辨質譜法（征求意見稿）

1水質二噁英類的測定同位素稀釋/高分辨氣相色譜-高分辨質譜法警告：實驗中使用的溶劑和標準樣品等具有毒性，試劑配制及樣品前處理過程應在通風櫥中進行；操作時應按要求佩戴防護器具，避免吸入呼吸道或接觸皮膚和衣物。1適用范圍本標準規(guī)定了測定水中二噁英類的同位素稀釋/高分辨氣相色譜-高分辨質譜法。本標準適用于地表水、地下水、海水、生活污水和工業(yè)廢水中二噁英類的測定。樣品取樣量為10.0L，定容體積為20μl時，2,3,7,8-氯代二噁英類的方法檢出限為0.04pg/L～0.4pg/L，測定下限為0.16pg/L～1.6pg/L。詳見附錄A。2規(guī)范性引用文件本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本標準。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運輸GB/T14581水質湖泊和水庫采樣技術指導HJ/T52水質河流采樣技術指導HJ91.1污水監(jiān)測技術規(guī)范HJ91.2地表水環(huán)境質量監(jiān)測技術規(guī)范HJ164地下水環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范HJ493水質樣品的保存和管理技術規(guī)定HJ494水質采樣技術指導HJ916環(huán)境二噁英類監(jiān)測技術規(guī)范3術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1多氯代二苯并-對-二噁英polychlorinateddibenzo-p-dioxins（PCDDs）一氯代二苯并-對-二噁英～八氯代二苯并-對-二噁英的統(tǒng)稱，有75種同類物，參見附錄B。3.22四氯代二苯并-對-二噁英tetrachlorodibenzo-p-dioxins(T4CDDs)四氯代二苯并-對-二噁英的統(tǒng)稱，有22種異構體。3.3五氯代二苯并-對-二噁英pentachlorodibenzo-p-dioxins(P5CDDs)五氯代二苯并-對-二噁英的統(tǒng)稱，有14種異構體。3.4六氯代二苯并-對-二噁英hexachlorodibenzo-p-dioxins(H6CDDs)六氯代二苯并-對-二噁英的統(tǒng)稱，有10種異構體。3.5七氯代二苯并-對-二噁英heptachlorodibenzo-p-dioxins(H7CDDs)七氯代二苯并-對-二噁英的統(tǒng)稱，有2種異構體。3.6八氯代二苯并-對-二噁英octachlorodibenzo-p-dioxin(O8CDD)八氯代二苯并-對-二噁英，無異構體。3.7多氯代二苯并呋喃polychlorinateddibenzofurans(PCDFs)一氯代二苯并呋喃～八氯代二苯并呋喃的統(tǒng)稱，有135種同類物，參見附錄B。3.8四氯代二苯并呋喃tetrachlorodibenzofurans(T4CDFs)四氯代二苯并呋喃的統(tǒng)稱，有38種異構體。3.9五氯代二苯并呋喃pentachlorodibenzofurans(P5CDFs)五氯代二苯并呋喃的統(tǒng)稱，有28種異構體。3.10六氯代二苯并呋喃hexachlorodibenzofurans(H6CDFs)六氯代二苯并呋喃的統(tǒng)稱，有16種異構體。3.11七氯代二苯并呋喃heptachlorodibenzofurans(H7CDFs)七氯代二苯并呋喃的統(tǒng)稱，有4種異構體。3.12八氯代二苯并呋喃octachlorodibenzofuran(O8CDF)八氯代二苯并呋喃，無異構體。3.13二噁英類polychlorinateddibenzo-p-dioxinsandpolychlorinateddibenzofurans多氯代二苯并-對-二噁英和多氯代二苯并呋喃的統(tǒng)稱，有210種同類物。3.1432,3,7,8-氯代二噁英類2,3,7,8-chlorinesubstitutedPCDDsandPCDFs第2、3、7、8位氫原子被氯原子取代的所有二噁英類化合物的統(tǒng)稱，包括7種多氯代二苯并-對-二噁英和10種多氯代二苯并呋喃，共17種化合物。參見附錄C。3.15毒性當量因子toxicityequivalencyfactor(TEF)各二噁英類化合物與2,3,7,8-四氯代二苯并-對-二噁英（2,3,7,8-T4CDD）對芳香烴受體（AhR）的親和性能之比。2,3,7,8-氯代二噁英類毒性當量因子參見附錄C，非2,3,7,8-氯代二噁英類化合物毒性當量因子為0。3.16毒性當量質量濃度toxicequivalentquantity(TEQ)各二噁英類化合物質量濃度折算為相當于2,3,7,8-T4CDD毒性的等價質量濃度，毒性當量質量濃度為實測質量濃度與該化合物毒性當量因子（TEF）的乘積。3.17二噁英類毒性當量質量濃度toxicequivalentquantityofPCDD/Fs17種2,3,7,8-氯代二噁英類毒性當量質量濃度之和。4方法原理水樣添加提取內標后，采用液液萃取方式對水樣中的二噁英類提取，或首先使用玻璃纖維濾膜和固相萃取膜對水樣過濾與萃取，再使用提取裝置對玻璃纖維濾膜和固相萃取膜提取，提取液經凈化、分離、濃縮等操作后，加入進樣內標并定容，采用高分辨氣相色譜-高分辨質譜儀檢測，根據保留時間和監(jiān)測離子豐度比定性，同位素稀釋法定量。水樣中二噁英類的過濾、提取、凈化、分離及儀器分析流程參見附錄D。5干擾和消除5.1樣品提取時，多氯二苯醚、溴代二噁英類、多氯聯苯、多溴二苯醚等常見干擾物會隨目標化合物一并提取。采用本方法中推薦的凈化分離技術可減少或降低其干擾水平。5.2當樣品中存在目標化合物的同分異構體干擾測定時，可通過改變色譜分離條件或更換不同性能色譜柱提高分離度。6試劑和材料除非另有說明，分析時均用符合國家標準的分析純試劑，有機溶劑濃縮1.0×104倍后不得檢出二噁英類，實驗用水為新制備的不含目標化合物的純水。6.1甲醇（CH3OH）：農殘級。46.2丙酮（CH3COCH3）：農殘級。6.3甲苯（C7H8）：農殘級。6.4二氯甲烷（CH2Cl2）：農殘級。6.5正己烷（C6H14）：農殘級。6.6壬烷（C9H20）：優(yōu)級純。6.7硫酸（H2SO4ρ=1.84g/ml，w∈[95%，98%]，優(yōu)級純。6.8氫氧化鈉（NaOH）。6.9硝酸銀（AgNO3優(yōu)級純。6.10氯化鈉（NaCl）：優(yōu)級純。380℃下烘烤4h，置于干燥器中冷卻至室溫，轉移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。6.11無水硫酸鈉（Na2SO4）。380℃下烘烤4h，置于干燥器中冷卻至室溫，轉移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。6.12正己烷洗凈水：用正己烷（6.5）充分洗滌過的純水。6.13二氯甲烷-正己烷溶液I。二氯甲烷（6.4）與正己烷（6.5）以體積比1:49混合。6.14二氯甲烷-正己烷溶液II。二氯甲烷（6.4）與正己烷（6.5）以體積比1:3混合。6.15二氯甲烷-正己烷溶液III。二氯甲烷（6.4）與正己烷（6.5）以體積比1:1混合。6.16氫氧化鈉溶液：ρ(NaOH)=40g/L。稱取4g氫氧化鈉（6.8）溶于少量水中，稀釋至100ml。6.17氯化鈉溶液：ρ(NaCl)=50g/L。稱取5g氯化鈉（6.10）溶于少量水中，稀釋至100ml。6.18硝酸銀溶液：ρ(AgNO3)=400g/L。稱取40g硝酸銀（6.9）溶于少量水中，稀釋至100ml。6.19二噁英類標準溶液。指用壬烷（6.6）或甲苯（6.3）配制的2,3,7,8-氯代二噁英的類標準溶液?？少徺I市售有證標準溶液，參照標準溶液證書要求保存。6.20二噁英類校準溶液。指用壬烷（6.6）或甲苯（6.3）配制的二噁英類標準物質與相應內標物質的混合溶液，至少應包括5種不同的質量濃度梯度，參見附錄E?？少徺I市售有證標準溶液，參照標準溶液證書要求保存。6.21提取內標。選擇同位素標記的二噁英類作為提取內標，參見附錄E?？少徺I市售有證標準溶液，參照標準溶液證書要求保存。6.22進樣內標。選擇同位素標記的二噁英類作為進樣內標，參見附錄E?？少徺I市售有證標準溶液，參照標準溶液證書要求保存。56.23全氟煤油（PFK）：純度≥98%。市售有證標準溶液，參照標準溶液證書要求保存。6.24全氟三丁胺（PFTBA）：ρ=1000μg/ml。市售有證標準溶液，參照標準溶液證書要求保存。6.25石墨化炭黑：150μm～178μm（100目～80目）。6.26硅藻土：20μm～100μm（600目～150目）。6.27硅膠：60μm～230μm（230目～65目）。用二氯甲烷（6.4）洗凈，待二氯甲烷（6.4）全部揮發(fā)后，攤放在蒸發(fā)皿或燒杯中，厚度小于10mm，在130℃溫度下烘烤18h，放在干燥器中冷卻至室溫，轉移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。6.28氫氧化鈉硅膠：w(NaOH)=33%。取硅膠（6.27）67g，加入氫氧化鈉溶液（6.16）33g，充分攪拌，使之呈流體粉末狀。制備完成后裝入玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。6.29硫酸硅膠：w(H2SO4)=44%。取硅膠（6.27）56g，加入硫酸（6.7）44g，充分攪拌，使之呈流體粉末狀。制備完成后裝入玻璃瓶中密封，于干燥器中保存。6.30硝酸銀硅膠：w(AgNO3)=10%。取硅膠（6.27）90g，加入硝酸銀溶液(6.18)25ml，使用旋轉蒸發(fā)裝置在約50℃下減壓充分脫水。制備完成后裝入棕色玻璃試劑瓶中密封，于干燥器中保存。配制過程中使用棕色遮光板或鋁箔遮擋光線，避免硝酸銀見光分解。亦可購買市售商品，避光保存。6.31氧化鋁。層析填充柱用氧化鋁（堿性，活性度I），也可使用活性氧化鋁。必要時可按照如下步驟活化：將氧化鋁在燒杯中鋪成厚度小于10mm的薄層，在130℃溫度下烘烤18h，或在培養(yǎng)皿中鋪成厚度小于5mm的薄層，在500℃溫度下灼燒8h，活化后的氧化鋁在干燥器內冷卻至室溫后，轉移至玻璃瓶中密封，于干燥器中保存，保存時間不超過5d。6.32活性炭或活性炭硅膠。在內襯聚四氟乙烯螺帽的玻璃瓶中將9.0g石墨化炭黑（6.25）與41g硅藻土（6.26）混合均勻，于130℃下烘烤6h，置于干燥器中冷卻至室溫，轉移至玻璃瓶中密封，在干燥器中保存。使用前，使用甲苯（6.3）索氏提取48h以上，確認甲苯不變色，若甲苯變色，重復索氏提取。索氏提取后，在180℃下烘烤4h，再用旋轉蒸發(fā)裝置在50℃下減壓干燥1h，在干燥器中密封保存?zhèn)溆?。亦可購買活性炭硅膠市售商品，避光保存。6.33樣品自動凈化柱。包括多層硅膠柱、硅酸鎂柱或氧化鋁柱、活性炭硅膠柱，滿足2,3,7,8-氯代二噁英類凈化分離要求。市售，避光保存。6.34石英棉。使用前用二氯甲烷（6.4）回流提取6h，干燥后保存于密閉玻璃容器中。6.35固相萃取膜：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）的萃取膜。6.36濾膜：玻璃纖維材質，濾膜孔徑約0.45μm。66.37氮氣：純度≥99.999%。6.38氦氣：純度≥99.999%。7儀器和設備7.1采樣工具采樣工具應符合HJ164、HJ494及GB17378.3等要求，選用不銹鋼、聚四氟乙烯等材質。使用前用甲醇（6.1）或丙酮（6.2）等溶劑清洗。7.2樣品容器或丙酮（6.2）等溶劑清洗。7.3分析儀器7.3.1高分辨氣相色譜儀7.3.1.1進樣口：具有分流/不分流進樣功能，使用溫度不低于280℃,也可使用柱上進樣或程序升溫大體積進樣方式；7.3.1.2柱溫箱：具有程序升溫功能，溫度可在50℃~350℃范圍內調節(jié)；7.3.1.3色譜柱：60m（柱長）×250μm（內徑）×0.25μm（膜厚），固定相為改性5%苯基-95%甲基聚硅氧烷或其他等效的低流失毛細管色譜柱。2,3,7,8-氯代二噁英類分離效果良好，并能分辨目標化合物的色譜峰流出順序；7.3.1.4載氣：氦氣（6.38）。7.3.2高分辨質譜儀7.3.2.1高分辨質譜儀為磁質譜儀，具有氣質聯機接口，使用溫度不低于280℃;7.3.2.2具有電子轟擊離子源（EI），電子轟擊能量可在25eV～70eV范圍內調節(jié)；7.3.2.3具有選擇離子監(jiān)測功能，質量校正使用鎖定質量模式；7.3.2.4動態(tài)分辨率大于1.0×104（10%峰谷定義，下同）并至少可穩(wěn)定24h以上，當使用的內標包含13C12-O8CDF時，動態(tài)分辨率應大于1.2×104；7.3.2.5高分辨狀態(tài)下（動態(tài)分辨率大于1.0×104），1s內能夠重復監(jiān)測12個監(jiān)測離子；7.3.2.6數據處理系統(tǒng)能夠實時采集、記錄及存儲質譜數據。7.4水樣過濾裝置：玻璃三角漏斗、錐形瓶或抽濾裝置等。7.5水樣萃取裝置：分液漏斗、固相萃取裝置。7.6干燥裝置：冷凍干燥儀、干燥器等。77.7提取裝置：索氏提取器、加壓流體萃取儀或其他性能相當的提取裝置。7.8樣品自動凈化系統(tǒng)：對樣品自動凈化柱（6.33）具有自動選擇不同類別溶劑預淋洗、樣品淋洗及淋洗液收集的功能。7.9濃縮裝置：旋轉蒸發(fā)裝置、氮吹儀以及功能相當的其他濃縮裝置。7.10填充柱：內徑8mm～15mm，長100mm～300mm的玻璃填充柱。7.11玻璃管：內徑約8mm，長約160mm的可翻轉玻璃管，配套聚四氟乙烯接頭。7.12一般實驗室常用儀器和設備。8樣品8.1樣品采集和保存水樣參考GB17378.3、GB/T14581、HJ/T52、HJ91.1、HJ91.2和HJ164的相關要求采集。樣品采樣量應滿足檢測分析的需求，且符合HJ916技術要求。水樣保存參照HJ493技術要求執(zhí)行，應密封、避光運輸，送至實驗室的水樣0℃~10℃密封、避光保存，30d內開展試樣的制備。樣品提取液可于-10℃以下密封、避光保存1a。8.2試樣的制備8.2.1添加提取內標用量筒量取約10L水樣，添加提取內標（6.21），充分混合。若分批次提取樣品，每次均需添加提取內標。提取內標推薦添加總量為四氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.2ng～1.0ng，八氯代二噁英類0.4ng～2.0ng。如果提取液需要分取，則取樣量和提取內標添加量應適當增加。注2：為保證提取內標與樣品混合均勻，可選擇甲8.2.2過濾樣品中懸浮固體較多時，先用水樣過濾裝置（7.4）過濾量取的全部樣品，收集濾液用于下一步樣品的萃取。過濾后的玻璃纖維濾膜置于干燥裝置（7.6）中充分干燥。若水樣無需過濾處理，可直接進行樣品的萃取。8.2.3萃取8.2.3.1液液萃取將濾液（8.2.2）或量取的水樣（8.2.1）轉移至分液漏斗（7.5）中，使用二氯甲烷（6.4）進行液液萃取，至少萃取3次。合并萃取液，經無水硫酸鈉（6.11）脫水后，濃縮至1ml～2ml。88.2.3.2固相萃取使用丙酮（6.2）或二氯甲烷（6.4）清洗固相萃取裝置（7.5）。將固相萃取膜（6.35）和濾膜（6.36）（可選）順次放在支撐網上，放置固相萃取漏斗，用夾子固定。按照以下程序進行潤洗、活化和膜固相萃取：a）加入約10ml甲苯（6.3），開啟抽濾泵抽去甲苯（6.3），重新加入約10ml甲苯（6.3），浸潤5min，抽濾除去甲苯（6.3）；b)加入約10ml丙酮（6.2），開啟抽濾泵抽去丙酮（6.2），重新加入約10ml丙酮（6.2），浸潤5min，抽濾除去丙酮（6.2）；c）加入約10ml甲醇（6.1），并使其浸潤約1min，開啟抽濾泵緩慢抽去甲醇（6.1），使液面降至距萃取膜2mm～5mm，關閉抽濾泵，保持固相萃取膜（6.35）濕潤；d）再用約10ml純水清洗固相萃取漏斗及活化固相萃取膜（6.35），并保持固相萃取膜（6.35）濕潤；e）將濾液（8.2.2）或量取的水樣（8.2.1）緩慢注入固相萃取裝置（7.5）中進行萃取，通過調節(jié)泵的抽力控制萃取流量，萃取流量不宜大于100ml/min；f）樣品添加完畢后，立即用純水清洗樣品容器，并將清洗液注入固相萃取漏斗中，漏斗內壁也用少量純水清洗；g）待清洗液全部經過固相萃取膜（6.35）后，繼續(xù)維持抽氣，除去萃取膜上水分；h）取出玻璃纖維濾膜（6.36）和固相萃取膜（6.35），置于干燥裝置（7.6）中充分干燥；i）用二氯甲烷（6.4）或丙酮（6.2）清洗樣品容器和固相萃取裝置（7.5）內壁，單獨收集清洗液，清洗液經無水硫酸鈉（6.11）脫水后，濃縮至1ml～2ml。8.2.4提取8.2.4.1索氏提取若濾液（8.2.2）選用液液萃取方式，將干燥后的玻璃纖維濾膜（8.2.2）轉移至索氏提取器（7.7）中提取。用甲苯（6.3）為溶劑提取16h以上，回流速度控制在4次/h～6次/h。將索氏提取液與液液萃取步驟（8.2.3.1）的萃取液合并，濃縮至1ml～2ml。若濾液（8.2.2）選用固相萃取方式，將干燥后的玻璃纖維濾膜（8.2.2）和固相萃取膜（8.2.3.2）轉移至索氏提取器（7.7）中提取。用甲苯（6.3）為溶劑提取16h以上，回流速度控制在4次/h～6次/h。將索氏提取液與固相萃取（8.2.3.2）過程有機溶劑清洗液合并，濃縮至1ml～2ml。8.2.4.2加壓流體萃取若濾液（8.2.2）選用液液萃取方式，將玻璃纖維濾膜（8.2.2）轉移至萃取池中，萃取池中加入一定量無水硫酸鈉（6.11）或硅藻土（6.26進行加壓流體萃取。提取液轉移至燒瓶，與液液萃?。?.2.3.1）步驟的萃取液合并，濃縮至1ml～2ml。若濾液（8.2.2）選用固相萃取方式，將玻璃纖維膜（8.2.2）和固相萃取膜（8.2.3.2）轉移至萃取池9中，萃取池中加入一定量無水硫酸鈉（6.11）或硅藻土（6.26），進行加壓流體萃取。提取液轉移至燒瓶，與固相萃?。?.2.3.2）過程有機溶劑清洗液合并，濃縮至1ml～2ml。加壓流體萃取參考萃取條件為：壓力10.3MPa，溫度120℃,萃取溶劑為甲苯（6.3），靜態(tài)萃取時間5min，循環(huán)3次。8.2.4.3其他提取方式在滿足本方法質量控制要求的情況下，可使用其他提取溶劑或提取方法。8.2.5分取將合并、濃縮后提取液（8.2.4）定容，根據留樣需求和樣品中預估二噁英類質量濃度的高低，分取25%～100%（整數比例）的提取液作為凈化分析樣品，剩余樣品溶液作為留樣，-10℃以下密封、避光保存。8.2.6凈化及分離8.2.6.1硫酸處理-硅膠柱凈化如提取液顏色較深，可使用硫酸處理-硅膠柱凈化。將分取的提取液（8.2.5）用50ml～150ml正己烷（6.5）洗入分液漏斗（7.5）中，再加入10ml~20ml硫酸（6.7），輕微振蕩，靜置分層，棄去硫酸層，重復操作至硫酸層變淺或無色。加入適量氯化鈉溶液（6.17）洗滌有機相，重復數次洗至中性，有機相經無水硫酸鈉（6.11）脫水后，濃縮至1ml～2ml。在內徑8mm～12mm填充柱（7.10）底部墊一小團石英棉（6.34），干法裝填3g硅膠（6.27）和約10mm厚的無水硫酸鈉（6.11）。填充后硅膠柱用50ml正己烷（6.5）預淋洗，保持液面與無水硫酸鈉齊平，棄去預淋洗液。將硫酸處理后的濃縮液轉移至硅膠柱上，用150ml正己烷（6.5）淋洗樣品，調節(jié)淋洗速度約為2.5ml/min（大約1滴/s），收集淋洗液。將淋洗液濃縮至1ml～2ml。8.2.6.2多層硅膠柱凈化在內徑12mm～15mm填充柱（7.10）底部墊一小團石英棉（6.34自下而上依次干法裝填3g硅膠（6.27）、5g氫氧化鈉硅膠（6.28）、2g硅膠（6.27）、10g硫酸硅膠（6.29）、2g硅膠（6.27）、3g硝酸銀硅膠（6.30）和5g無水硫酸鈉（6.11）。填充后多層硅膠柱用100ml正己烷（6.5）預淋洗，保持液面與無水硫酸鈉齊平，棄去預淋洗液。將分取的提取液（8.2.5）轉移至多層硅膠柱上，用100ml正己烷（6.5）淋洗，調節(jié)淋洗速度約為2.5ml/min（大約1滴/s收集淋洗液。將淋洗液濃縮至1ml~2ml。8.2.6.3氧化鋁柱凈化分離在內徑8mm～12mm填充柱（7.10）底部墊一小團石英棉（6.34自下而上依次干法裝填約10mm厚的無水硫酸鈉（6.11）、10g氧化鋁（6.31）、約10mm厚的無水硫酸鈉（6.11），填充后氧化鋁柱用50ml正己烷（6.5）預淋洗，保持液面與無水硫酸鈉（6.11）齊平，棄去預淋洗液。將經過硫酸處理-硅膠柱凈化（8.2.6.1）或多層硅膠柱凈化（8.2.6.2）后的樣品濃縮液轉移到氧化鋁柱上。先用100ml二氯甲烷-正己烷溶液I（6.13）淋洗，棄去淋洗液。再用150ml二氯甲烷-正己烷溶液III（6.15）淋洗，調節(jié)淋洗速度約為2.5ml/min（大約1滴/s），收集淋洗液。將淋洗液濃縮至1ml以下，待濃縮定容后儀器分析。8.2.6.4活性炭硅膠柱凈化分離在內徑8mm玻璃管（7.11）一端填入石英棉（6.34依次裝填約10mm厚的無水硫酸鈉（6.11）、1.0g活性炭硅膠（6.32）、約10mm厚的無水硫酸鈉（6.11）、石英棉（6.34），使活性炭硅膠（6.32）或多層硅膠柱凈化（8.2.6.2）的樣品濃縮液轉移到活性炭硅膠柱上。活性炭硅膠柱淋洗可選取以下任意1種方式：a）活性炭硅膠柱反向淋洗。依次使用25ml正己烷（6.5）、40ml二氯甲烷-正己烷溶液Ⅱ（6.14）淋洗活性炭硅膠柱，待淋洗液全部流出后，棄去淋洗液。然后翻轉活性炭硅膠柱，使用60ml甲苯（6.3）淋洗，調節(jié)淋洗速度約為2.5ml/min（大約1滴/s），收集淋洗液。將淋洗液濃縮至1ml以下，待濃縮定容后儀器分析；b）活性炭硅膠柱正向淋洗。依次使用25ml正己烷（6.5）、200ml二氯甲烷-正己烷溶液Ⅱ（6.14）淋洗活性炭硅膠柱，待淋洗液全部流出后，棄去淋洗液。使用200ml甲苯（6.3）淋洗，調節(jié)淋洗速度約為2.5ml/min（大約1滴/s），收集淋洗液。將淋洗液濃縮至1ml以下，待濃縮定容后儀器分析。8.2.6.5自動凈化將樣品自動凈化柱（6.33）按順序連接在樣品自動凈化系統(tǒng)（7.8）上，按程序配好各淋洗溶液并連接好管路，設定淋洗程序。將分取的提取液（8.2.5）注入樣品定量環(huán)中，對樣品進行凈化、分離，收集含有二噁英類組分的淋洗液，將淋洗液濃縮至1ml以下，待濃縮定容后儀器分析。樣品自動凈化系統(tǒng)淋洗過程和凈化分離程序參見附錄G。注：在滿足本方法質量控制要求的前提下，可選擇使用不同8.2.6.6其他凈化分離方法可以使用其他方法或裝置進行樣品的凈化分離處理。使用前應用標準溶液進行凈化和分離效果試驗，并確認滿足本方法質量保證和質量控制的要求。8.2.7濃縮定容將濃縮后的淋洗液（8.2.6.3、8.2.6.4或8.2.6.5）用濃縮裝置（7.9）進一步濃縮至近干。添加進樣內標（6.22），加入壬烷（6.6）或甲苯（6.3），定容至20μl～50μl，將定容后的樣品混勻后轉移至樣品瓶中，待測。進樣內標推薦添加量為0.1ng～1.0ng。8.3空白試樣的制備用正己烷洗凈水（6.12）代替樣品，按與試樣的制備（8.2）相同步驟制備空白試樣。9分析步驟9.1儀器參考條件9.1.1高分辨氣相色譜參考條件進樣口溫度：280℃;進樣方式：不分流；進樣量：1μl；載氣流量：1.2ml/min。以5℃/min的速度升溫至320℃,9.1.2高分辨質譜參考條件二噁英類及質量校準物質監(jiān)測離子質量數見表1。表1二噁英類及質量校準物質監(jiān)測離子質量數M（M＋2）（M＋4）1/2/3/4/5/6/7P5CDFs/8/9////13C12-H6CDDs/13C12-H7CDDs//13C12-T4CDFs/13C12-P5CDFs//M（M＋2）（M＋4）/13C12-O8CDF/9.2校準9.2.1儀器性能檢查儀器使用前，應調諧高分辨質譜儀，導入質量校準物質PFK（6.23）或PFTBA（6.24）得到穩(wěn)定的響應后，手動或自動優(yōu)化質譜儀參數，使質量校準物質的監(jiān)測離子質量數動態(tài)分辨率大于1.0×104，且峰形呈正態(tài)分布。當使用的內標包含13C12-O8CDF時，動態(tài)分辨率應大于1.2×104。9.2.2標準曲線的建立二噁英類校準溶液（6.20）濃度系列至少應有5個非零質量濃度梯度，參見附錄E。按照儀器參考條件（9.1），由低濃度到高濃度依次進樣，記錄各目標化合物的保留時間和監(jiān)測離子質譜峰的峰面積。校準溶液中目標化合物的2個監(jiān)測離子豐度比應與理論離子豐度比（參見附錄H）大體一致，變化范圍應在±15%以內。校準溶液中，最低質量濃度的待測化合物色譜峰信噪比應大于10。以目標化合物濃度為橫坐標，目標化合物與提取內標監(jiān)測離子峰面積的比值和提取內標濃度的乘積為縱坐標，建立標準曲線。9.3試樣測定將待測樣品（8.2.7）按照與標準曲線的建立（9.2.2）相同條件測定。9.4空白試驗按照與試樣測定（9.3）相同條件測定空白試樣（8.3）。10結果計算與表示10.1定性分析10.1.1二噁英類二噁英類的2個監(jiān)測離子在指定保留時間窗口內同時存在，且其豐度比應與理論離子豐度比一致(參見附錄H),變化范圍應在±15%以內。10.1.22,3,7,8-氯代二噁英類除滿足10.1.1節(jié)要求外，色譜峰的保留時間應與校準溶液一致(±3s以內),同時內標物質與二噁英類校準溶液的相對保留時間亦一致(±0.5%以內)。2,3,7,8-氯代二噁英類標準物質總離子色譜圖見圖1。13——1,2,3,4,6,7,8-H?CDF/13C12-1,2,3,4,6,7,8-H-CDF;14——1,2,3,4,6,7,8-H?CDD/l3圖12,3,7,8-氯代二噁英類標準物質總離子色譜圖(色譜柱：固定相為改性5%苯基-95%甲基聚硅氧烷，60m(柱長)×0.25mm(內徑)×0.25μm(膜厚))RSD10.2定量分析根據監(jiān)測離子峰面積，采用同位素稀釋法定量。10.3結果計算10.3.1平均相對響應因子目標化合物相對于提取內標的相對響應因子，按照公式（1）計算。m mA A式中：RRFes,i——第i個濃度校準溶液中目標化合物相對于提取內標的相對響應因子；mes,i——第i個濃度校準溶液中提取內標物質的絕對量，pg；ms,i——第i個濃度校準溶液中目標化合物的絕對量，pg；As,i——第i個濃度校準溶液中目標化合物的監(jiān)測離子峰面積之和；Aes,i——第i個濃度校準溶液中提取內標物質的監(jiān)測離子峰面積之和。提取內標相對于進樣內標的相對響應因子，按照公式（2）計算。A AA Am式中：RRFrs,i——第i個濃度校準溶液中提取內標相對于進樣內標的相對響應因子；mrs,i——第i個濃度校準溶液中進樣內標的絕對量，pg；mes,i——第i個濃度校準溶液中提取內標的絕對量，pg；Aes,i——第i個濃度校準溶液中提取內標的監(jiān)測離子峰面積之和；Ars,i——第i個濃度校準溶液中進樣內標的監(jiān)測離子峰面積之和。目標化合物相對于提取內標的平均相對響應因子，按照公式（3）計算。nRRFes,nRRFes,iRRFesi1nRRFes——目標化合物相對于提取內標的平均相對響應因子；RRs,i——第i個濃度校準溶液中目標化合物相對提取內標的相對響應因子；n——校準溶液系列的數量。目標化合物相對提取內標的相對響應因子的相對標準偏差，按照公式（4）計算。((RRFes,i-RRFes)2 nRRFes式中：RSD——目標化合物相對提取內標的相對響應因子的相對標準偏差，%；RRFes,i——第i個濃度校準溶液中目標化合物相對于提取內標的相對響應因子；RRFes——目標化合物相對于提取內標的平均相對響應因子；n——校準溶液系列的數量。提取內標相對于進樣內標的平均相對響應因子，按照公式（5）計算。nRRFrs,nRRFrs,iRRFrsi1（5）n 式中：RRFrs——提取內標相對于進樣內標的平均相對響應因子；RRs,i——第i個濃度校準溶液中提取內標相對于進樣內標的相對響應因子；n——校準溶液系列的數量。10.3.2提取內標回收率試樣中提取內標回收率，按照公式（6）計算。R=R1rs式中：R——試樣中提取內標回收率，%；As——試樣中提取內標的監(jiān)測離子峰面積之和；As——試樣中進樣內標的監(jiān)測離子峰面積之和；'mrs——試樣中進樣內標的添加量，pg；''mes——試樣中提取內標的添加量，pg；'RRFrs——提取內標相對于進樣內標的平均相對響應因子。10.3.3目標化合物的量試樣中目標化合物的量按照公式（7）計算，對于四氯代～八氯代的多氯代二苯并-對-二噁英和多氯代二苯并呋喃的量，采用具有相同氯原子取代數的2,3,7,8-氯代二噁英類RRFes計算，參見附錄F。mj（7）式中：mj——試樣中目標化合物j的量，pg；Aj——試樣中目標化合物j的監(jiān)測離子峰面積之和；'Aes——試樣中提取內標的監(jiān)測離子峰面積之和；''mes——試樣中提取內標的添加量，pg；'RRFes——目標化合物相對于提取內標的平均相對響應因子。10.3.4樣品中目標化合物的質量濃度樣品中目標化合物的質量濃度，按照公式（8）計算。mjD式中：j——樣品中目標化合物j的質量濃度，pg/L；mj——試樣中目標化合物j的量，pg；V——添加了提取內標的樣品取樣體積，L；D依據試樣分取比例計算的稀釋倍數。10.4結果表示10.4.1實測質量濃度四氯代二噁英類～八氯代二噁英類的質量濃度根據各氯代異構體質量濃度累加計算。10.4.2毒性當量質量濃度2,3,7,8-氯代二噁英類毒性當量質量濃度為實測質量濃度與對應的毒性當量因子（參見附錄C）的乘積。若實測質量濃度低于方法檢出限，則以0計算毒性當量質量濃度。樣品中二噁英類毒性當量質量濃度為17種2,3,7,8-氯代二噁英類毒性當量質量濃度之和。按照公式（9）計算。j1式中：ρ——樣品中二噁英類毒性當量質量濃度，pgTEQ/L；ρj——樣品中目標化合物j的質量濃度，pg/L；TEFj——目標化合物j的毒性當量因子。10.4.3質量濃度單位實測質量濃度單位以pg/L表示，毒性當量質量濃度單位以pgTEQ/L表示。10.4.4數值修約與表達測定結果小數點后位數應與檢出限一致，最多保留3位有效數字。11準確度11.1精密度6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的空白樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類實驗室內相對標準偏差分別為2.3%～16%、3.2%～20%、1.5%～14%；實驗室間相對標準偏差分別為7.3%～21%、7.9%～22%、5.4%～17%；重復性限分別為0.02pg/L～0.23pg/L、0.15pg/L~1.4pg/L、0.72pg/L～8.6pg/L；再現性限分別為0.04pg/L～0.47pg/L、0.26pg/L～2.9pg/L、1.8pg/L~20pg/L。二噁英類毒性當量質量濃度的實驗室內相對標準偏差分別為2.3%～6.3%、3.9%～13%、2.0%~8.0%；實驗室間相對標準偏差分別為9.5%、11%、8.9%；重復性限分別為0.11pgTEQ/L、1.1pgTEQ/L、7.1pgTEQ/L；再現性限分別為0.27pgTEQ/L、1.7pgTEQ/L、13pgTEQ/L。6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的地表水樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類實驗室內相對標準偏差分別為3.2%～23%、3.8%～18%、1.8%～16%；實驗室間相對標準偏差分別為5.8%～30%、6.6%～17%、5.0%～16%；重復性限分別為0.03pg/L～0.29pg/L、0.14pg/L~1.3pg/L、1.2pg/L～12pg/L；再現性限分別為0.03pg/L～0.66pg/L、0.17pg/L～2.3pg/L、1.6pg/L～21pg/L。二噁英類毒性當量質量濃度實驗室內相對標準偏差分別為1.5%～4.4%、3.4%～5.4%、2.0%～5.3%；實驗室間相對標準偏差分別為7.3%、7.7%、7.3%；重復性限分別為0.09pgTEQ/L、0.60pgTEQ/L、4.7pgTEQ/L；再現性限分別為0.23pgTEQ/L、1.2pgTEQ/L、11pgTEQ/L。6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的工業(yè)廢水樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英實驗室內相對標準偏差分別為2.6%～18%、4.7%～18%、3.0%～22%；實驗室間相對標準偏差分別為6.8%～12%、7.3%～12%、8.0%～17%；重復性限分別為0.03pg/L～0.25pg/L、0.13pg/L～1.2pg/L、1.1pg/L～11pg/L；再現性限分別為0.04pg/L～0.26pg/L、0.18pg/L～1.3pg/L、1.8pg/L~18pg/L。二噁英類毒性當量質量濃度的實驗室內相對標準偏差分別為1.9%～3.9%、3.0%～5.9%、2.9%~6.7%；實驗室間相對標準偏差分別為8.8%、9.0%、11%；重復性限分別為0.08pgTEQ/L、0.64pgTEQ/L、6.7pgTEQ/L；再現性限分別為0.27pgTEQ/L、1.3pgTEQ/L、16pgTEQ/L。6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的海水樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類實驗室內相對標準偏差分別為2.9%～13%、1.9%～17%、3.4%～21%；實驗室間相對標準偏差分別為8.5%～14%、8.5%～15%、7.7%～18%；重復性限分別為0.02pg/L～0.18pg/L、0.08pg/L~0.85pg/L、0.81pg/L～11pg/L；再現性限分別為0.04pg/L～0.28pg/L、0.17pg/L～1.6pg/L、1.8pg/L~21pg/L。二噁英類毒性當量質量濃度的實驗室內相對標準偏差分別為2.0%～4.4%、3.1%～8.0%、2.9%~6.2%；實驗室間相對標準偏差分別為12%、12%、10%；重復性限分別為0.09pgTEQ/L、0.63pgTEQ/L、5.9pgTEQ/L；再現性限分別為0.33pgTEQ/L、1.7pgTEQ/L、14pgTEQ/L。6家實驗室分別對有2種2,3,7,8-氯代二噁英類檢出的地表水樣品進行6次重復測定，實驗室內相對標準偏差為13%和25%，實驗室間相對標準偏差為2.5%和19%，重復性限為0.25pg/L和15pg/L，再現性限為0.32pg/L和15pg/L。二噁英類毒性當量質量濃度實驗室內相對標準偏差為10%~21%，實驗室間相對標準偏差為3.3%；重復性限為0.02pgTEQ/L，再現性限為0.02pgTEQ/L。6家實驗室分別對有7種2,3,7,8-氯代二噁英類檢出的工業(yè)廢水樣品進行6次重復測定，實驗室內相對標準偏差為6.4%～40%，實驗室間相對標準偏差為10%～29%，重復性限為0.09pg/L～2.2pg/L，再現性限為0.11pg/L～2.7pg/L。二噁英類毒性當量質量濃度實驗室內相對標準偏差為12%～22%，實驗室間相對標準偏差為9.1%；重復性限為0.11pgTEQ/L，再現性限為0.12pgTEQ/L。方法精密度數據分別參見附錄I中表I.1、表I.2和表I.3。11.2正確度6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的空白樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類回收率范圍分別為55.1%～133%、53.9%～130%、57.1%～116%；加標回收率最終值分別為85.1%±30.6%～101%±14.6%、83.0%±36.6%～96.5%±36.1%、81.1%±26.8%～93.8%±10.2%。二噁英類毒性當量質量濃度的加標回收率范圍分別為87.3%～110%、79.8%～110%、82.3%～105%；加標回收率最終值分別為95.3%±18.0%、93.4%±19.6%、92.6%±16.6%。6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的地表水樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類加標回收率范圍分別為60.4%～124%、59.5%～111%、66.4%～122%；加標回收率最終值分別為68.8%±8.0%～104%±28.3%、73.8%±14.7%～99.0%±16.9%、76.1%±10.0%～101%±22.3%。二噁英類毒性當量質量濃度的加標回收率范圍分別為89.2%～112%、82.8%～105%、85.0%～105%；加標回收率最終值分別為101%±14.8%、94.3%±14.6%、93.8%±12.8%。6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的工業(yè)廢水樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類加標回收率范圍分別為51.8%～124%、51.9%～117%、55.6%～125%；加標回收率最終值分別為56.6%±11.4%～107%±19.0%、64.8%±11.5%～99.4%±17.4%、73.2%±21.8%～97.5%±34.0%。二噁英類毒性當量質量濃度的加標回收率范圍分別為87.6%～116%、83.1%～110%、79.0%~110%；加標回收率最終值分別為103%±18.2%、96.2%±17.2%、93.0%±19.9%。6家實驗室分別對加標質量濃度為四氯代二噁英類0.10pg/L、0.50pg/L、5.0pg/L，五氯代二噁英類～七氯代二噁英類0.50pg/L、2.5pg/L、25pg/L，八氯代二噁英類1.0pg/L、5.0pg/L、50pg/L，對應加標毒性當量濃度為1.0pgTEQ/L、5.0pgTEQ/L、50pgTEQ/L的海水樣品進行7次重復測定。2,3,7,8-氯代二噁英類加標回收率范圍分別為50.8%～124%、54.4%～121%、58.0%～115%；加標回收率最終值分別為66.2%±16.0%～104%±21.5%、69.8%±14.3%～98.2%±23.3%、77.5%±27.7%～95.3%±22.9%。二噁英類毒性當量質量濃度的加標回收率范圍分別為78.3%～113%、72.6%～107%、74.5%～107%；加標回收率最終值分別為98.9%±22.7%、92.9%±22.6%、92.4%±20.9%。方法正確度數據參見附錄I中表I.4。12質量保證和質量控制12.1空白試驗每20個樣品或每批次樣品（少于20個）至少分析1個實驗室空白。實驗室空白中四氯代二噁英類~七氯代二噁英類測定結果應低于方法檢出限，八氯代二噁英類測定結果應低于測定下限。12.2儀器性能確認樣品分析按一定周期或頻次（每24h或每批樣品測定至少1次），需檢查高分辨質譜儀的儀器性能，驗證分辨率及質量校正，質量校準物質的監(jiān)測離子質量數動態(tài)分辨率需大于1.0×104，否則該批次樣品需重新測定。12.3儀器檢出限確認選擇計算相對響應因子的最低質量濃度的二噁英類校準溶液進行7次重復測定，定量校準溶液中2,3,7,8-氯代二噁英類，計算測定結果的標準偏差，儀器檢出限按照公式（10）計算，修約為1位有效數字。IDLt(n1,0.99)S（10）式中：IDL——儀器檢出限，pg；n——校準溶液的平行測定次數；t——自由度為n–1，置信度為99%時的t分布值（單側），t(6,0.99)＝3.143；S——n次平行測定的標準偏差，pg。儀器檢出限規(guī)定為四氯代、五氯代二噁英類0.1pg，六氯代、七氯代二噁英類0.2pg，八氯代二噁英類0.5pg。應經常檢查儀器，并確認儀器檢出限，當測得的儀器檢出限計算結果高于規(guī)定限值時，應查找原因，解決后重新測定，使其滿足要求。12.4標準曲線二噁英類校準溶液系列各質量濃度點目標化合物相對于提取內標的平均相對響應因子相對標準偏差不大于20%，否則應重新繪制標準曲線。儀器連續(xù)開機時，同一臺儀器的同一條標準曲線在儀器正常運行下的使用期限不得超過90d。12.5連續(xù)校準選擇中間質量濃度的二噁英類校準溶液，按一定周期或頻次（每24h或每批樣品測定至少1次）測定，測定結果峰面積應不低于初始標準曲線在該點峰面積的70%，質量濃度變化應在±35%以內，否則應查找原因，解決后重新連續(xù)校準，或者重新繪制標準曲線計算相對響應因子。12.6進樣內標確認同一濃度水平下，樣品進樣內標的峰面積應不低于二噁英類校準溶液中進樣內標峰面積的70%，否則應查找原因，重新測定。12.7提取內標回收率提取內標回收率應滿足表2要求，否則應查找原因，直至回收率滿足要求，才能進行樣品定量分析。表2提取內標回收率范圍12313C12-2,3,4,7,8-P5CDF45613C12-2,3,4,6,7,8-H6CDF78913C12-2,3,7,8-T4CDD12.8平行樣測定每20個樣品或每批次樣品（少于20個）應至少測定1個平行樣，當2,3,7,8-氯代二噁英類的測定結果大于方法測定下限時，平行樣之間的相對偏差絕對值不大于40%。12.9正確度測定每批次應至少測定1個基體加標樣品。2,3,7,8-氯代二噁英類基體加標樣品的回收率范圍為50%~150%，二噁英類毒性當量質量濃度基體加標樣品回收率范圍為70%～130%。13報告測定對象包括2,3,7,8-氯代二噁英類、四氯代～八氯代的多氯代二苯并-對-二噁英和多氯代二苯并呋喃（T4CDDs～O8CDD和T4CDFs～O8CDF）。結果報告宜采用表格的形式，應包括目標化合物、實測質量濃度、毒性當量因子以及毒性當量質量濃度等內容，參見附錄J。14廢物處置實驗中產生的廢物應集中收集，分類保管，并做好相應標識，依法處置。15注意事項15.1實驗過程中使用的玻璃器皿可能污染樣品，使用前應清洗干凈，并用甲醇（6.1）或丙酮（6.2）、二氯甲烷（6.4）或甲苯（6.3）和正己烷（6.5）依次沖洗。所有接口處嚴禁使