高效液相色譜儀確認(rèn)

高效液相色譜儀驗(yàn)證報(bào)告驗(yàn)證類別：口首次驗(yàn)證□再驗(yàn)證設(shè)備名稱:高效液相色譜儀設(shè)備型號：設(shè)備編號:1、概述高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC)是使用高壓輸液泵將流動相泵入到裝有填充劑的色譜柱，注入的供試品被流動相帶入柱內(nèi)進(jìn)行分離后，各成分先后進(jìn)入檢測器，用記錄儀或數(shù)據(jù)處理裝置記錄色譜圖并進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，得到測定結(jié)果。高效液相色譜儀由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。2、目的檢查并確認(rèn)型高效液相色譜儀運(yùn)行性能符合要求。3、職責(zé)驗(yàn)證小組：包含使用部門、設(shè)備工程部、質(zhì)量保證部、質(zhì)量控制部。負(fù)責(zé)儀器驗(yàn)證方案的起草及方案的培訓(xùn)。負(fù)責(zé)制定符合實(shí)際及有效的設(shè)備操作規(guī)程。負(fù)責(zé)對儀器驗(yàn)證的方案及報(bào)告審核。負(fù)責(zé)儀器驗(yàn)證檢測方法的建立，并對取樣和分析方法進(jìn)行驗(yàn)證。負(fù)責(zé)樣品的采集、分析及報(bào)告。負(fù)責(zé)儀器驗(yàn)證的執(zhí)行及操作記錄的填寫。參與儀器驗(yàn)證中的偏差調(diào)查。起草驗(yàn)證報(bào)告，并由驗(yàn)證委員會審核、批準(zhǔn)。驗(yàn)證委員會負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核。負(fù)責(zé)資源的調(diào)配。負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的審核和批準(zhǔn)。質(zhì)量保證部:負(fù)責(zé)對驗(yàn)證過程進(jìn)行監(jiān)督檢查和驗(yàn)證文件的存檔。4、相關(guān)文件文件名稱/文件存放位置文件編碼/文件版本號高效液相色譜法操作規(guī)程操作說明書、安裝手冊和維修手冊中華人民共和國藥典2010年版二部5、驗(yàn)證方法和步驟驗(yàn)證方法整個(gè)驗(yàn)證過程分為單個(gè)部件的驗(yàn)證和整機(jī)驗(yàn)證。驗(yàn)證時(shí)一般先驗(yàn)證泵、柱溫箱、自動進(jìn)樣器的性能，接著是檢測器的性能，最后是整機(jī)的性能驗(yàn)證。驗(yàn)證步驟5.2.1輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S、流量穩(wěn)定性誤差S的檢定SR將儀器的輸液系統(tǒng)，進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器聯(lián)接好，以甲醇為流動相，流量設(shè)為1.0mL/min，按說明書啟動儀器，待壓力平穩(wěn)后保持10分鐘，按表1設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集，稱重。按式(1)、式(2)計(jì)算S和S。SR表1流量設(shè)定值(mL/min)0.51.02.0測量次數(shù)333流動相收集時(shí)間(min)1055S=(F—F)/FX100%……(1)S mSSS=(F—F)/FX100%……(2)Rmaxmin式中：S――流量設(shè)定值誤差(％)；SS——流量穩(wěn)定性誤差(％)；RF=(W—W)/p?t,流量實(shí)測值(mL/min)；m2 1 TW——容量瓶+流動相的重量(g)；2W 容量瓶的重量(g)；1F——流量設(shè)定值(mL/min)；Sp 實(shí)驗(yàn)溫度下流動相的密度(g/cm3)；Tt 收集流動相的時(shí)間(min)；F——同一組測量中流量最大值(mL/min)；maxF——同一組測量中流量最小值(mL/min)；minF——同一組測量值的算術(shù)平均值(mL/min)。輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S、流量穩(wěn)定性誤差S的檢定記錄見附件一SR由測試結(jié)果可知：輸液泵泵流量設(shè)定值誤差S、流量穩(wěn)定性誤差S均符合規(guī)定SR5?2?2柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差A(yù)T和控溫穩(wěn)定性T的檢定SC將數(shù)字溫度計(jì)探頭固定在柱溫箱內(nèi)，選擇35°C和45°C進(jìn)行檢定。按儀器說明書操作，通電升溫，待溫度穩(wěn)定后，記下溫度計(jì)讀數(shù)并開始計(jì)時(shí)，以后每隔10min記錄一次讀數(shù)，共計(jì)7次，求出平均值。平均值與設(shè)定值之差為△T,7次讀數(shù)中最大值與最小值之差為控溫穩(wěn)S定性T。C柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差△T和控溫穩(wěn)定性T的檢定原始記錄見附件二。SC由測試結(jié)果可知：△T為0°C ,T值為0.1°CSC結(jié)論：符合規(guī)定自動進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定取1.5ml進(jìn)樣瓶裝入1ml水，用天平精密稱定其重量，然后置于自動進(jìn)樣器上讓其進(jìn)樣10次，每次50卩1。進(jìn)樣完成后再精密稱定其重量，由重量差計(jì)算進(jìn)樣量準(zhǔn)確度。自動進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定原始記錄見附件三。由測試結(jié)果可知：進(jìn)樣量準(zhǔn)確度為0.36%。結(jié)論：符合規(guī)定檢測器的檢定5.2.4.1檢測器基線噪聲和基線漂移的測定取C色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0m1/min，檢測器波長設(shè)定為254nm,18開機(jī)預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后(約60min)記錄基線60min，從30min內(nèi)基線上讀出噪音值；從60min基線上讀出基線漂移值。檢測器基線噪聲和基線漂移的測定記錄見附件四由測試結(jié)果可知：基線噪音為0.265X10—5AU，基線漂移為0.312X10-4AU/h結(jié)論：符合規(guī)定檢測器最小檢測濃度的測定取C色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為l.Oml/min，檢測器波長設(shè)定為254nm,18開機(jī)預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后取1X10-7g/ml的萘/甲醇溶液進(jìn)樣20pl,記錄色譜圖，由色譜峰峰高和基線噪聲峰峰高計(jì)算最小檢測濃度C。公式如下：LC=（2XNXC）/HLd式中C——最小檢測濃度，g/ml；LN——基線噪聲峰峰高，mm；dC——標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml；H——標(biāo)準(zhǔn)溶液峰峰高，mm。檢測器的檢定原始記錄見附件四。由測試結(jié)果可知：檢測器最小檢測濃度為：0.0925X10—7g/mL（萘的甲醇溶液）整機(jī)性能的檢定取C色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0ml/min，檢測器波長設(shè)定為254nm（當(dāng)18選用萘?xí)r）或272nm（當(dāng)選用咖啡因時(shí)），柱溫設(shè)定為40°C。開機(jī)預(yù)熱待儀器穩(wěn)定后取0.1mg/ml的萘/甲醇溶液或0.02mg/ml的咖啡因甲醇溶液進(jìn)樣10》1，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄其峰面積和保留時(shí)間，以保留時(shí)間計(jì)算其定性測量重復(fù)性誤差，以峰面積計(jì)算其定量測定重復(fù)性誤差。整機(jī)性能的檢定原始記錄見附件五。由測試結(jié)果可知：定性測量重復(fù)性誤差為：0.3%定量測定重復(fù)性誤差為：0.1%結(jié)論：符合規(guī)定

驗(yàn)證結(jié)果分析和綜合評價(jià)驗(yàn)證部件驗(yàn)證項(xiàng)目合格標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證結(jié)果結(jié)論輸液泵流量設(shè)定值誤差SS0.5ml/min:V5%l.Oml/min:V3%2.0ml/min:V2%0.04%0.3%0.02%符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定流量穩(wěn)定性誤差SR0.5ml/min:V3%；l.Oml/min:<2%；2.0ml/min:<2%0.6%0.4%0.04%符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差A(yù)TS<±2°C0.0C符合規(guī)定柱箱控溫穩(wěn)定性TCW1°C0.1C符合規(guī)定自動進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差W±2%0.36%符合規(guī)定檢測器基線噪聲W2X10-5AU0.265X10-5AU符合規(guī)定最小檢測濃度<1X10-7g/mL（萘的甲醇溶液）0.0925X10-7g/mL符合規(guī)定基線漂移W5X10-4AU/h0.312X10-4AU/h符合規(guī)定整機(jī)性能定性測量重復(fù)性誤差RSDW0.5%0.3%符合規(guī)定定量測量重復(fù)性誤差RSDW1.O%0.1%符合規(guī)定結(jié)論：該儀器經(jīng)驗(yàn)證，泵、柱溫箱、自動進(jìn)樣器、檢測器及整機(jī)的性能均符合規(guī)定。可用于日常檢驗(yàn)。檢定人：復(fù)核人：檢定日期：高效液相色譜儀驗(yàn)證報(bào)告7/7

附件一：泵流量設(shè)定值誤差S、流量穩(wěn)定性誤差S的檢定原始記錄SR液相色譜儀型號及編號：LC-20AT(QC-EM-096)泵型號：LC-20AT流動相：甲醇色譜柱:C18-011檢定檢定日期：復(fù)核人：FS0.5ml/min1.0ml/min第一次第二次第三次第一次第二次第三次W123.230123.242122.990023.794223.056223.52342W227.170527.187526.913527.746426.993227.47143t101010101010T262626262626PT0.786960.786960.786960.786960.786960.786960F=(W-W)/p?tm 2 1 T0.5007120.5013470.4985641.0044221.0005591.0033552.S=(F-F)/FX100%S m S S0.142320.269391-0.287180.4422080.0559110.3354680.平均SS0.04%0.3%F=(F+F+F)/3ml m2 m30.5002081.002779Fmax0.5013471.004422Fmin0.4985641.000559S=(F-F)/FX100%R max min0.6%0.4%此項(xiàng)檢定結(jié)論：

附件二：柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差厶T和控溫穩(wěn)定性T的檢定原始記錄SC液相色譜儀型號：LC-20AT 柱溫箱型號：CTO-lOASvp數(shù)字溫度儀型號：DT300-41T設(shè)定35°C45C時(shí)間讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)穩(wěn)定時(shí)08：4035.009：5045.0第1次08：4235.009：5245.0第2次08：5235.110：0245.0第3次09：0235.010：1245.1第4次09：1235.010：2245.0第5次09：2235.110：3245.0第6次09：3235.010：4245.0第7次09：4235.010：5245.1T平均35.045.0T最大35.145.1T最小35.045.0△T=T-TS 平均 設(shè)定0.00.0T=T—T C 最大 最小 0.10.1此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：附件三：自動進(jìn)樣器進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差的檢定原始記錄液相色譜儀型號：LC-20AT自動進(jìn)樣器型號：SIL-20AC；進(jìn)樣前進(jìn)樣瓶加水的總重：W=4.4704g；進(jìn)樣后進(jìn)樣瓶加水的總重：W=3.9702g；2 檢定溫度：26°C,水的密度p0.9968g/ml；進(jìn)樣量準(zhǔn)確度誤差二[(W「W)-(50X10X10-3Xp)]/(50X10X10-3Xp)X100%=[(4.4704-3.9702)-(50X10X10-3X0.9968)]/(50X10X10-3X0.9968)X100%=0.36%此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：附件四：檢測器的檢定原始記錄液相色譜儀型號：LC-20AT檢測器型號:SPD-M20A流動相：100%甲醇流速：l.Oml/min色譜柱：C18-011萘甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度C:1.012X10-7g/mL配制人：配制日期:基線噪聲:N=0.265X10-5AU基線漂移:H=0.312X10-4AU/h最小檢測濃度的計(jì)算C=(2XNXC)/HLd=(2X0.0265X1.012X10-7)/0.580=0.0925X10-7g/mL此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人： 復(fù)核人： 檢定日期：附件五：整機(jī)性能的檢定原始記錄儀器型號及編號：LC20AT（QCEM096）流動相：甲醇色譜柱：C18011檢測波長：254nm標(biāo)準(zhǔn)溶液類型：萘/甲醇溶液濃度：0.1012mg/ml配制人：配制時(shí)間：定性測定（保留時(shí)間）定量測定（峰面積）第一次3.8041331751第二次3.7841333788第三次3.7801333684第四次3.7781333291第五次3.7771333124第六次3.7771332713平均值3.7831333059測量誤差的RSD0.3%0.1%備注：RSD采用EXCEL函數(shù)表丿格計(jì)算此項(xiàng)檢定結(jié)論：檢定人：復(fù)核人：檢定日期：

驗(yàn)證結(jié)論及