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文檔簡介
第2章
細(xì)胞工程第1節(jié)
植物細(xì)胞工程第1課時
植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)從社會中來
我國人民都把蘭花看作高潔、典雅的象征,很多人喜歡養(yǎng)蘭花,但是,蘭花種子通常發(fā)育不全,在自然條件下萌發(fā)率極低;傳統(tǒng)分株繁殖的方法又存在繁殖周期長、繁殖率低等問題,如果靠自然繁殖,蘭花的價格可想而知了。
利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以大量、快速地培育蘭花。蘭花是觀賞植物中最常見的一類,依靠植物組織培養(yǎng)繁育種苗的植物,其組培苗的數(shù)量約占觀賞植物組培苗總量的40%。
如何能讓名貴的蘭花大量、快速地繁殖,從而走入尋常百姓家呢?
細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法,通過細(xì)胞器、細(xì)胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個體或其產(chǎn)品的一門綜合性的生物工程。原理和方法操作水平目的分類細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)細(xì)胞器、細(xì)胞或組織獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個體或其產(chǎn)品動物細(xì)胞工程和植物細(xì)胞工程一、細(xì)胞工程概念:細(xì)胞經(jīng)過
后,仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能?!参锛?xì)胞的全能性2、具有全能性的原因:一般生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種的
。即都有發(fā)育成
所必需的全部遺傳信息。全套遺傳信息完整個體3、體現(xiàn)全能性的標(biāo)志:細(xì)胞→完整個體或其他各種細(xì)胞實例:胡蘿卜韌皮部細(xì)胞發(fā)育成完整植株受精卵發(fā)育成個體(動植物)蜜蜂受精卵發(fā)育成工蜂,卵細(xì)胞發(fā)育成雄峰
用一片葉子、一片花瓣、一?;ǚ鄯敝吵鲂碌闹仓甓⒅参锛?xì)胞工程的理論基礎(chǔ)1、定義:分裂和分化實例:芽原基只能發(fā)育為芽,葉原基只能發(fā)育為葉4、生物體內(nèi)細(xì)胞不體現(xiàn)全能性的原因:基因在特定的時間和空間條件下
表達(dá)的結(jié)果。選擇性5、全能性大小比較:(1)分化程度低的
分化程度高的(2)細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的
細(xì)胞分裂能力弱>>(3)受精卵
胚胎干細(xì)胞
生殖細(xì)胞
體細(xì)胞
植物細(xì)胞
動物細(xì)胞>>>>——植物細(xì)胞的全能性二、植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)1、植物細(xì)胞工程發(fā)展歷程哈伯蘭特提出了細(xì)胞全能性的理論,但相關(guān)的實驗嘗試沒有成功。斯圖爾德等發(fā)現(xiàn)胡蘿卜的體細(xì)胞可以分化為胚,為細(xì)胞全能性理論提供了強(qiáng)有力的支持。科金用真菌的纖維素酶分解番茄根的細(xì)胞壁,成功獲得了原生質(zhì)體。古哈等在培養(yǎng)毛曼陀羅的花藥時,首次得到了由花藥中的花粉粒發(fā)育而來的胚。卡爾森誘導(dǎo)煙草種間原生質(zhì)體融合,獲得了第一株體細(xì)胞種間雜種植株。土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒被發(fā)現(xiàn)。之后,該質(zhì)粒應(yīng)用于植物分子生物學(xué)領(lǐng)域,促進(jìn)了植物細(xì)胞工程與分子生物學(xué)技術(shù)的緊密結(jié)合。1902年1958年1960年1964年1971年1974年三、植物細(xì)胞工程2、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)三、植物細(xì)胞工程2、一般過程:外植體愈傷組織脫分化芽、根等再分化試管苗接種外植體移栽成活誘導(dǎo)愈傷組織脫分化誘導(dǎo)生芽再分化誘導(dǎo)生根再分化分化狀態(tài)未分化狀態(tài)四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)完整植株生長發(fā)育1、定義:指
的植物器官、組織或細(xì)胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其分化為
的技術(shù)。離體完整植株外植體(無菌條件)4、脫分化:
在一定的
和
等條件的
下,
的細(xì)胞
,轉(zhuǎn)變成
,進(jìn)而形成愈傷組織的過程。激素營養(yǎng)誘導(dǎo)已經(jīng)分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能未分化的細(xì)胞(1)光照條件:(2)過程中涉及的生命活動:一般不需要光照只有細(xì)胞增殖(有絲分裂),沒有細(xì)胞分化
在植物組織培養(yǎng)過程中,從植物體上被分離下來的,接種在培養(yǎng)基上供培養(yǎng)用的原生質(zhì)體、細(xì)胞、組織、器官等。3、外植體:四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)注意說明①外植體脫分化的難易因植物種類、器官來源及生理狀況的不同而不同。一般來說,植物的花和幼嫩的組織脫分化相對較易,而植物的莖、葉等成熟的組織脫分化則較難。②該過程添加的外源激素主要是細(xì)胞分裂素和生長素(比例適中),因為二者能強(qiáng)烈地促進(jìn)愈傷組織的形成。(3)結(jié)果:形成愈傷組織③無菌操作——植物組織培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。4、脫分化:四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)5、愈傷組織:
細(xì)胞排列疏松且無規(guī)則、高度液泡化、呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)拓展:植物組織培養(yǎng)的兩種途徑胚狀體途徑器官發(fā)生途徑四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)5、愈傷組織:
細(xì)胞排列疏松且無規(guī)則、高度液泡化、呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。6、胚狀體:
離體培養(yǎng)條件下,沒有經(jīng)過受精過程,但是經(jīng)過了胚胎發(fā)育過程所形成的胚狀類似物,因而統(tǒng)稱為體細(xì)胞胚或胚狀體。四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)7、再分化:
脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以
出芽或根等器官的過程。重新分化(1)實質(zhì):(2)光照條件:基因的選擇性表達(dá)需要給予適當(dāng)強(qiáng)度的光照誘導(dǎo)葉綠素的合成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用原因:(3)過程中涉及的生命活動:既有細(xì)胞增殖(有絲分裂),又有細(xì)胞分化。(4)結(jié)果:愈傷組織芽低高根生長素細(xì)胞分裂素胚狀體四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)①外植體的遺傳特征和取材的位置會影響愈傷組織的再分化能力。②培養(yǎng)基的成分和物理性質(zhì)對器官的形成有一定的影響,但起決定作用的是植物激素,特別是生長素和細(xì)胞分裂素的配比。8、生長發(fā)育:
將試管苗移到大田中栽培或進(jìn)行無土栽培,使之進(jìn)一步生長發(fā)育為具有根、莖、葉且能開花、結(jié)果的完整植株。7、再分化:(5)影響植物組織再分化的因素:四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)脫分化再分化過程外植體→愈傷組織愈傷組織→幼苗結(jié)果形成愈傷組織形成根、芽需要條件①離體②適宜的營養(yǎng)③生長素與細(xì)胞分裂素的比例適中④一般不需光①離體②適宜的營養(yǎng)③生長素與細(xì)胞分裂素的比例高或低誘導(dǎo)生根或生芽④光照決定植物脫分化、再分化的關(guān)鍵因素四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)脫分化與再分化的區(qū)別(1)離體狀態(tài)(2)無菌操作(3)種類齊全、比例適合的營養(yǎng)物質(zhì)(4)植物激素(主要是生長素和細(xì)胞分裂素)誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)(5)適宜的外界條件(溫度、pH、光照等)細(xì)胞表現(xiàn)全能性的條件課堂小結(jié)1、下列最容易表達(dá)出細(xì)胞的全能性的是()A.人的口腔上皮細(xì)胞B.葡萄枝韌皮部細(xì)胞C.兔的肝臟細(xì)胞D.鼠的神經(jīng)細(xì)胞B2、下列有關(guān)細(xì)胞全能性的敘述,正確的是()A.植物體只有體細(xì)胞才具有發(fā)育成完整個體所必需的全套基因B.高度分化的植物細(xì)胞只有處于離體狀態(tài)時才有可能表現(xiàn)出全能性C.植物體內(nèi)某些體細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性,其原因是所含基因不同D.紫色糯性玉米種子培育成植株,這反映植物種子具有全能性B課堂練習(xí)3、下圖表示植物組織培養(yǎng)過程中形成的愈傷組織,這體現(xiàn)了植物細(xì)胞的()BA.再分化過程 B.脫分化過程C.具有選擇性屬性 D.具有全能性本質(zhì)課堂練習(xí)1、下列實例中,能夠體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是()A.小鼠腺細(xì)胞的自我復(fù)制B.克隆羊多莉的獲得C.壁虎斷尾后重新長出尾部D.胡蘿卜韌皮部細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株D2、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述,不正確的是()A.植物組織培養(yǎng)利用的原理是細(xì)胞的全能性B.脫分化和再分化所用培養(yǎng)基的物理狀態(tài)不同C.脫分化和再分化過程中,細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)不變D.操作和培養(yǎng)過程中要保持無菌狀態(tài)B作業(yè)3、番茄根尖經(jīng)過植物組織培養(yǎng)可以形成完整的番茄植株。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.此過程中發(fā)生了細(xì)胞的脫分化、再分化B.植物激素在此過程中起調(diào)節(jié)作用C.
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