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現(xiàn)代生物技術(shù)專題宣城中學閆立2021-12-4結(jié)合圖片來說一說什么是基因工程?基因工程是指按照人們的愿望,進展嚴厲的設(shè)計,并經(jīng)過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而發(fā)明出更符合人們需求的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子程度上進展設(shè)計和施工的,因此又叫做DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)?;蚬こ膛嘤瓜x棉的簡要過程:普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因棉花細胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)重組DNA導入拼接上述培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟是什么?普通棉花不具有抗蟲性,科學家發(fā)現(xiàn)蘇云金芽孢桿菌可以產(chǎn)生一種毒蛋白,對棉鈴蟲有一定的殺傷作用。試設(shè)計一個簡單的方案,使棉花對棉鈴蟲也有抵抗作用.一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞思索:1、怎樣從蘇云金芽孢桿菌體內(nèi)提取毒蛋白基因?2、這類酶主要在哪些生物中可以找得到?為什么主要存在于這一類生物?3、這一類酶有什么作用?ATGC黏性末端黏性末端黏性末端:被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口,帶有幾個伸出的核苷酸,他們之間正好互補配對,這樣的切口叫黏性末端。一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成,例如,EcoRΙ、SmaΙ,也有少數(shù)有4、5或8個核苷酸組成。GAATTCCTTAAG中軸線CTTAAGAATTCG大腸桿菌的一種限制酶〔EcoRⅠ)能識別GAATTC序列,SmaI識別CCCGGG序列:
CCCGGGGGGCCCCCCGGGGGGCCC黏性末端平末端一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時,產(chǎn)生的是平末端。當限制酶從識別序列的中心軸線兩側(cè)切開時,產(chǎn)生的是黏性末端。一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞主要是從原核生物中分別純化出來的一類酶。1、來源:4000種2、種類:3、作用:識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(6個,4、5、8個)構(gòu)成兩種末端黏性末端平末端4、結(jié)果:要想獲得某個目的基因必需求用限制酶切幾個切口?可產(chǎn)生幾個黏性末端?一個目的基因有幾個黏性末端?要切兩個切口,產(chǎn)生四個黏性末端,兩個。假設(shè)把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割,會怎樣呢?會產(chǎn)生一樣的黏性末端。是不是把兩者的黏性末端黏合起來,這樣就真的合成重組的DNA分子了?思索題:磷酸二酯鍵DNA銜接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來,即把梯子兩邊扶手的斷口銜接起來,這樣一個重組的DNA分子就構(gòu)成了。二、DNA銜接酶——“分子縫合針〞GAATTCCTTAAG即脫氧核糖、磷酸基之間的銜接GPAP思索:DNA銜接酶作用是什么?是不是把兩者的黏性末端黏合起來,這樣就真的合成了重組的DNA分子?DNA銜接酶和DNA聚合酶的區(qū)別是什么?
1、種類:2、作用部位:E·coliDNA銜接酶〔黏性末端〕T4DNA銜接酶〔黏性末端和平末端〕磷酸二酯鍵DNA銜接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來,即把梯子兩邊扶手的斷口銜接起來,這樣一個重組的DNA分子就構(gòu)成了。二、DNA銜接酶——“分子縫合針〞GAATTCCTTAAG即脫氧核糖、磷酸基之間的銜接GPAP三、基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車〞思索討論:1、怎樣把毒蛋白基因裝載到分子運輸車上?2、毒蛋白基因進入棉花細胞后,分子運輸車怎樣保證它能穩(wěn)定的存在?3、毒蛋白基因能否進入棉花細胞我們怎樣才干覺察?4、分子運輸車進入到棉花細胞后能否對棉花本身的平安呵斥要挾?三、基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車〞能自
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