丙泊酚對卵巢早衰小鼠學習記憶的影響及其機制

丙泊酚對卵巢早衰小鼠學習記憶的影響及其機制目的:比較順鉑及卵巢切除法誘導小鼠卵巢功能早衰模型及其對小鼠學習記憶功能的影響,尋找適合本研究的卵巢早衰模型;研究丙泊酚對卵巢早衰小鼠學習記憶的影響及其可能的分子機制。方法:1、雌性6～8周ICR小鼠隨機分成四組:空白對照組,順鉑模型組,假手術組和卵巢切除模型組。觀察四組小鼠一般情況、動情周期;稱量空白對照組和順鉑模型組小鼠的卵巢、子宮濕重;采用HE染色觀察順鉑造模后卵巢及子宮的病理改變;采用ELISA檢測小鼠血清中FSH、LH、P及E2的水平;采用避暗實驗檢測小鼠的學習記憶行為。2、雌性6～8周ICR小鼠隨機分成六組:假手術對照組(sham-operated)、50mg/kg丙泊酚組(Pro50)、250mg/kg丙泊酚組(Pro250)、卵巢切除模型對照組(OVX)、50mg/kg丙泊酚應用于卵巢切除模型組(Pro50+OVX)、250mg/kg丙泊酚應用于卵巢切除模型組(Pro250+OVX)。觀察小鼠一般情況;采用避暗實驗檢測小鼠的學習記憶行為;采用westernblot及免疫組化檢測給藥lh及24h后海馬中GSK-3β、p-GSK-3β-Ser9、CREB、p-CREB-Ser133及caspase-3的水平;采用尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元的損傷情況。結果:1、順鉑模型組:與空白對照組比較,順鉑模型組小鼠體重明顯減輕(P<0.01),行動緩慢,整體狀態(tài)較差,動情間期持續(xù)或延長;卵巢、子宮濕重明顯減輕(P<0.01),順鉑造模后卵巢及子宮病理改變明顯;避暗潛伏期顯著縮短(P<0.01),錯誤次數(shù)顯著增加(P<0.01);血清FSH、LH和E2濃度均無顯著改變(P>0.05),P濃度顯著降低(P<0.01)。卵巢切除模型組:與假手術組比較,卵巢切除模型組小鼠體重無明顯變化(P>0.05),動情周期停滯于動情間期;避暗潛伏期顯著縮短(P<0.01),錯誤次數(shù)無顯著性差異(P>0.05);血清FSH和LH的濃度顯著升高(P<0.01),P和E2的濃度顯著降低(P<0.01)。2、各小鼠在丙泊酚給藥前后及組間自主活動均無顯著差異(P>0.05);與sham-operated組相比,Pro50、Pro250及OVX組避暗潛伏期顯著縮短(P<0.0001),Pro50+OVX組較OVX組潛伏期顯著延長(P<0.0001)。3、給藥后lh:不同劑量丙泊酚均會導致正常成年小鼠p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133表達下調、caspase-3表達上調,亞麻醉劑量的丙泊酚會使得卵巢切除小鼠p-GSK-3p-Ser9表達上調;給藥后24h:不同劑量丙泊酚均會導致正常成年小鼠caspase-3表達上調,亞麻醉劑量的丙泊酚會使得卵巢切除小鼠p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133表達上調、caspase-3表達下調;與Sham-operated組相比,Pro50、Pro250、OVX及Pro250+OVX組小鼠海馬區(qū)可見神經(jīng)細胞部分缺失,細胞輪廓模糊且排列紊亂,神經(jīng)元胞漿內尼氏體減少,神經(jīng)元數(shù)量減少;Pro50+OVX組僅偶可見細胞形態(tài)異常,神經(jīng)元受損較OVX組有明顯改善。結論:1、小鼠卵巢切除模型能夠更好地模擬小鼠卵巢早衰的癥狀,且對全身系統(tǒng)及學習記憶的影響較順鉑模型組小;2、丙泊酚劑量依賴性的損傷正常成年雌性小鼠的記憶鞏固功能;亞麻醉劑量的丙泊酚可以改善卵巢切除小鼠的記憶鞏固功能。3、丙泊酚可以降低假手術小鼠海馬區(qū)p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133的水平,影響小鼠的記憶鞏固功能;丙泊酚可以升高假手術小鼠海馬區(qū)caspase-3的水平,加重海馬區(qū)神經(jīng)元的損傷;亞麻醉劑量的丙泊酚可以升高卵巢切除小鼠海馬區(qū)p-GSK