高中生物競(jìng)賽蛋白質(zhì)

第一節(jié)第三講蛋白質(zhì)第一節(jié)蛋白質(zhì)概述第二節(jié)氨基酸－－蛋白質(zhì)的構(gòu)建分子第三節(jié)肽第四節(jié)蛋白質(zhì)的構(gòu)造與功能的關(guān)系第五節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)第六節(jié)蛋白質(zhì)的分別、純化授課時(shí)序：第一節(jié)蛋白質(zhì)概述一、蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能二、蛋白質(zhì)的分類(lèi)三、蛋白質(zhì)的水解四、蛋白質(zhì)的組成成分根據(jù)蛋白質(zhì)在機(jī)體的功能，分為7類(lèi)：1構(gòu)造蛋白2收縮蛋白3貯藏蛋白——卵清蛋白〔發(fā)育的胚胎〕4防御蛋白5轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6信號(hào)蛋白7酶一、蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能二、蛋白質(zhì)的分類(lèi)〔1〕根據(jù)蛋白質(zhì)的外形分類(lèi)：球狀蛋白質(zhì)：globularprotein外形接近球形或橢圓形，溶解性較好，能構(gòu)成結(jié)晶，大多數(shù)蛋白質(zhì)屬于這一類(lèi)。纖維狀蛋白質(zhì)：fibrousprotein分子類(lèi)似纖維或細(xì)棒。它又可分為可溶性纖維狀蛋白質(zhì)和不溶性纖維狀蛋白質(zhì)?！?〕根據(jù)蛋白質(zhì)的組成分類(lèi)簡(jiǎn)單蛋白(simpleprotein)結(jié)合蛋白(conjugatedprotein)。簡(jiǎn)單蛋白

1.清蛋白和球蛋白：albuminandglobulin廣泛存在于動(dòng)物組織中。清蛋白易溶于水，球蛋白微溶于水，易溶于稀酸中。2.谷蛋白(glutelin)和醇溶谷蛋白(prolamin)：植物蛋白，不溶于水，易溶于稀酸、稀堿中，后者可溶于70－80％乙醇中。3.精蛋白和組蛋白：堿性蛋白質(zhì)，存在與細(xì)胞核中。4.硬蛋白：存在于各種軟骨、腱、毛、發(fā)、絲等組織中，分為角蛋白、膠原蛋白、彈性蛋白和絲蛋白。又稱(chēng)為單純蛋白質(zhì)；這類(lèi)蛋白質(zhì)只含由-氨基酸組成的肽鏈，不含其它成分。結(jié)合蛋白質(zhì)由簡(jiǎn)單蛋白與其它非蛋白成分結(jié)合而成，色蛋白：由簡(jiǎn)單蛋白與色素物質(zhì)結(jié)合而成。如血紅蛋白、葉綠蛋白和細(xì)胞色素等。糖蛋白：由簡(jiǎn)單蛋白與糖類(lèi)物質(zhì)組成。如細(xì)胞膜中的糖蛋白等。脂蛋白：由簡(jiǎn)單蛋白與脂類(lèi)結(jié)合而成。如血清-，-脂蛋白等。核蛋白：由簡(jiǎn)單蛋白與核酸結(jié)合而成。如細(xì)胞核中的核糖核蛋白等。三、蛋白質(zhì)的水解完全水解得到各種氨基酸的混合物，

部分水解通常得到多肽片段，最后得到各種氨基酸的混合物。

所以，氨基酸是蛋白質(zhì)的根本構(gòu)造單元。大多數(shù)的蛋白質(zhì)都是由20種氨基酸組成。這20種氨基酸被稱(chēng)為根本氨基酸。1.酸水解常用6mol/L的鹽酸或4mol/L的硫酸在105-110℃條件下進(jìn)展水解，反響時(shí)間約20小時(shí)。優(yōu)點(diǎn)是不容易引起水解產(chǎn)物的消旋化。缺陷是色氨酸被沸酸完全破壞；普通用5mol/L氫氧化鈉煮沸10-20小時(shí)。優(yōu)點(diǎn)是色氨酸在水解中不受破壞。缺陷由于水解過(guò)程中許多氨基酸都遭到不同程度的破壞，產(chǎn)率不高。部分的水解產(chǎn)物發(fā)生消旋化。2.堿水解目前用于蛋白質(zhì)肽鏈斷裂的蛋白水解酶或稱(chēng)蛋白酶已有十多種。主要用于一級(jí)構(gòu)造分析以獲得蛋白質(zhì)的部分水解產(chǎn)物。運(yùn)用酶水解多肽不會(huì)破壞氨基酸，也不會(huì)發(fā)生消旋化。水解的產(chǎn)物為較小的肽段。3.酶水解蛋白質(zhì)和多肽的肽鍵可以被酸堿或蛋白酶催化水解，酸或堿可以將多肽完全水解，酶水解普通是部分水解.多肽是由氨基酸以酰胺鍵方式銜接而成的線(xiàn)性大分子。它在生物體內(nèi)可以單獨(dú)存在，但是更多的那么是作為蛋白質(zhì)的組成部分。蛋白質(zhì)是由一個(gè)或多個(gè)多肽鏈經(jīng)過(guò)共價(jià)鍵〔主要是二硫鍵〕或非共價(jià)力結(jié)合而成。運(yùn)用化學(xué)或物理方法，可以將蛋白質(zhì)拆分成多肽組分。四、蛋白質(zhì)的組成成分蛋白質(zhì)是由許多不同的α-氨基酸按一定的序列經(jīng)過(guò)酰胺鍵〔肽鍵〕縮合而成的，具有較穩(wěn)定的構(gòu)象并具有一定生物功能的大分子。蛋白質(zhì)是一類(lèi)含氮有機(jī)化合物，除含有碳、氫、氧外，還有氮和少量的硫。某些蛋白質(zhì)還含有其他一些元素，主要是磷、鐵、碘、碘、鋅和銅等。這些元素在蛋白質(zhì)中的組成百分比約為：〔一〕蛋白質(zhì)的元素組成碳50％氫7％氧23％氮16%硫0—3％其他微量N的含量平均為16%——?jiǎng)P氏〔Kjadehl〕定氮法的實(shí)際根底。氮占生物組織中一切含氮物質(zhì)的絕大部分。因此，可以將生物組織的含氮量近似地看作蛋白質(zhì)的含氮量。由于大多數(shù)蛋白質(zhì)的含氮量接近于16%，所以，可以根據(jù)生物樣品中的含氮量來(lái)計(jì)算蛋白質(zhì)的大約含量：蛋白質(zhì)含量〔克%〕=每克生物樣品中含氮的克數(shù)6.25〔二〕蛋白質(zhì)的氨基酸組成氨基酸——是蛋白質(zhì)的根本組成單位。從細(xì)菌到人類(lèi)，一切蛋白質(zhì)都由20種規(guī)范氨基酸〔20standardaminoacids)組成。構(gòu)成復(fù)雜的氨基酸長(zhǎng)鏈，中間靠肽鍵銜接，構(gòu)成多肽或蛋白質(zhì)。第二節(jié)氨基酸－－蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子一、蛋白質(zhì)的根本組成單位－氨基酸

氨基酸是具有氨基〔-NH2〕或亞氨基和羧基〔-COOH〕的有機(jī)分子。氨基酸種類(lèi)多，但構(gòu)成蛋白質(zhì)具有遺傳密碼的氨基酸只需20種，且都是L-型的α-型氨基酸，其通式為：+H3N—Cα—HCOO-R兩性離子方式氨基酸分子中既含有－NH2，又含有－COOH，所以氨基酸與強(qiáng)酸強(qiáng)堿都能成鹽。二氨基酸的分類(lèi)根據(jù)R的化學(xué)構(gòu)造〔1〕脂肪族氨基酸：1〕疏水性：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Cys；2〕極性：Arg、Lys、Asp、Glu、Asn、Gln、Ser、Thr〔2〕芳香族氨基酸：Phe、Tyr〔3〕雜環(huán)氨基酸：Trp、His〔4〕雜環(huán)亞氨基酸：Pro2.根據(jù)R的極性〔1〕極性氨基酸：1〕不帶電Ser、Thr、Asn、Gln、Tyr、Cys；2〕帶正電His、Lys、Arg；3〕帶負(fù)電：Asp、Glu〔2〕非極性氨基酸：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Met、Pro、Trp三氨基酸的重要理化性質(zhì)〔一〕普通物理性質(zhì)溶解度：水中溶解度差別較大，易溶于酸、堿，不溶于有機(jī)溶劑。光吸收性：可見(jiàn)光區(qū)無(wú)光吸收，紫外光區(qū)Phe、Trp有光吸收。旋光性：AA的物理常數(shù)，與構(gòu)造、PH值有關(guān)。味感：不同味道(與構(gòu)型有關(guān)).

〔二〕兩性解離和等電點(diǎn)

氨基酸在水溶液中或在晶體形狀時(shí)都以離子方式存在，在同一個(gè)氨基酸分子上帶有能放出質(zhì)子的—NH3+正離子和能接受質(zhì)子的—COO-負(fù)離子，為兩性電解質(zhì)。調(diào)理氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的—NH3+基和—COO-基的解離程度完全相等時(shí)，即所帶凈電荷為零，此時(shí)氨基酸所處溶液的pH值稱(chēng)為該氨基酸的等電點(diǎn)〔pI〕。H3N—CH—COOHR+在酸性溶液中的氨基酸〔pH＜pI〕H3N—CH—COO-R+在晶體形狀或水溶液中的氨基酸〔pH=pI〕H2N—CH—COO-R在堿性溶液中的氨基酸〔pH＞pI〕等電點(diǎn)的含義1.定義：當(dāng)氨基酸在其某一PH值時(shí)，氨基酸所帶正電荷和負(fù)電荷相等，即凈電荷為零，此時(shí)的PH值成為氨基酸的等電點(diǎn)，用PI表示。2.氨基酸等電點(diǎn)的特點(diǎn)：凈電荷數(shù)等于零，在電場(chǎng)中不挪動(dòng)；此時(shí)氨基酸的溶解度最小，容易沉淀。〔三〕化學(xué)性質(zhì)〔1〕與茚三酮的反響：Pro產(chǎn)生黃色物質(zhì)，其它為藍(lán)紫色。在570nm〔藍(lán)紫色〕或440nm〔黃色〕定量測(cè)定〔幾μg〕。

第三節(jié)肽一、肽一個(gè)氨基酸的α-羧基和另一個(gè)氨基酸的α-氨基脫水縮合而成的化合物。氨基酸之間脫水后構(gòu)成的鍵稱(chēng)肽鍵〔酰胺鍵〕。.如今公認(rèn)蛋白質(zhì)分子中氨基酸銜接的根本方式是肽鍵。肽鏈?zhǔn)怯山?jīng)過(guò)肽鍵銜接起來(lái)的一串氨基酸組成的。氨基酸一旦結(jié)合構(gòu)成肽鏈，就稱(chēng)為殘基。在肽鏈的一端的殘基含有一個(gè)自在的α-氨基，稱(chēng)為N端，而另一端的殘基含有一個(gè)自在的α-羧基，為C端。當(dāng)兩個(gè)氨基酸經(jīng)過(guò)肽鍵相互銜接構(gòu)成二肽，在一端依然有游離的氨基和另一端有游離的羧基，每一端銜接更多的氨基酸。氨基酸能以肽鍵相互銜接形生長(zhǎng)的、不帶支鏈的寡肽和多肽多肽依然有游離的α-氨基和α-羧基。少于10AA成為寡肽，多于10AA成為多肽或聚肽。分子量大于10000d稱(chēng)為蛋白質(zhì)，小于10000d稱(chēng)為多肽。在生物體中，多肽最重要的存在方式是作為蛋白質(zhì)的亞單位。但是，也有許多分子量比較小的多肽以游離形狀存在。這類(lèi)多肽通常都具有特殊的生理功能，常稱(chēng)為活性肽。如：腦啡肽；激素類(lèi)多肽；抗生素類(lèi)多肽；谷胱甘肽；蛇毒多肽等?！惨弧彻裙飧孰摹睪SH〕H2N-CHCH2CH2CO—COOHγ-GluNHCHCO—CH2SHCysNHCH2COOHGly2GSHGSSG〔二〕催產(chǎn)素和升壓素均為9肽，第3位和第9位氨基酸不同。催產(chǎn)素使子宮和乳腺平滑肌收縮，具有催產(chǎn)和促使乳腺排乳作用。升壓素促進(jìn)血管平滑肌收縮，升高血壓，減少排尿?！踩炒倌I上腺皮質(zhì)激素〔ACTH〕39肽，活性部位為第4~10位的7肽片段：Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly?！菜摹衬X肽腦啡肽具有劇烈的鎮(zhèn)痛作用〔強(qiáng)于嗎啡〕，不上癮。Met-腦啡肽Tyr-Gly-Gly-Phe-MetLeu-腦啡肽Tyr-Gly-Gly-Phe-Leuβ-內(nèi)啡肽〔31肽〕具有較強(qiáng)的嗎啡樣活性與鎮(zhèn)痛作用?！参濉骋雀哐撬赜梢葝uα-細(xì)胞分泌〔β-細(xì)胞分泌胰島素〕，29肽。胰高血糖素調(diào)理維持血糖濃度。第四節(jié)蛋白質(zhì)的構(gòu)造與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)是氨基酸以肽鍵相互銜接的線(xiàn)性序列。在蛋白質(zhì)中，多肽鏈折疊構(gòu)成特殊的外形〔構(gòu)象〕〔conformation〕。在構(gòu)造中，這種構(gòu)象是原子的三維陳列，由氨基酸序列決議。蛋白質(zhì)有四種構(gòu)造層次：一級(jí)構(gòu)造primary〕，二級(jí)構(gòu)造〔secondary〕，三級(jí)構(gòu)造〔tertiary〕和四級(jí)構(gòu)造〔quaternary〕〔不總是有〕。共價(jià)鍵次級(jí)鍵化學(xué)鍵肽鍵一級(jí)構(gòu)造氫鍵二硫鍵二、三、四級(jí)構(gòu)造疏水鍵鹽鍵范德華力三、四級(jí)構(gòu)造蛋白質(zhì)分子中的共價(jià)鍵與次級(jí)鍵二硫鍵一、穩(wěn)定蛋白質(zhì)的作用力一蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造一級(jí)構(gòu)造是指組成肽鏈的氨基酸的陳列順序。在生物體內(nèi)一切的蛋白質(zhì)都是在核酸所含有的遺傳信息控制下合成的。核酸中儲(chǔ)存的遺傳信息就是線(xiàn)型核酸分子中的特定堿基順序。在蛋白質(zhì)的合成過(guò)程中，遺傳信息從核酸流入蛋白質(zhì)，表現(xiàn)為線(xiàn)型氨基酸順序。蛋白質(zhì)的三維構(gòu)象歸根究竟是由一級(jí)順序決議的。一級(jí)構(gòu)造中包含的共價(jià)鍵主要指肽鍵和二硫鍵1.蛋白質(zhì)的二級(jí)構(gòu)造——蛋白質(zhì)多肽鏈本身的折疊和環(huán)繞方式〔1〕α-螺旋〔α-helix〕構(gòu)造要點(diǎn)：螺旋的每圈有3.6個(gè)氨基酸，螺旋間間隔為0.54nm，每個(gè)殘基沿軸旋轉(zhuǎn)100°。氫鍵的走向平行于螺旋軸，肽鏈內(nèi)構(gòu)成氫鍵，第一個(gè)氨基酸殘基的酰胺基團(tuán)的-CO基與第四個(gè)氨基酸殘基酰胺基團(tuán)的-NH基構(gòu)成氫鍵(13個(gè)原子)。一切肽鍵都能參與鏈內(nèi)氫鍵的構(gòu)成。蛋白質(zhì)分子為右手-螺旋?！狢—(NH—C—CO)3N—OHHR〔2〕β-折疊構(gòu)造〔β-pleatedsheet〕是一種肽鏈相當(dāng)伸展的構(gòu)造。肽鏈按層陳列，依托相鄰肽鏈上的羰基和氨基構(gòu)成的氫鍵維持構(gòu)造的穩(wěn)定性。肽鍵的平面性使多肽折疊成片，氨基酸側(cè)鏈伸展在折疊片的上面和下面。CαCαCαCαCαCαRRRRRRNNCNNCCC平行反平行β-折疊片中，相鄰多肽鏈平行或反平行〔較穩(wěn)定〕。-折疊構(gòu)造的氫鍵主要是由兩條肽鏈之間構(gòu)成的；也可以在同一肽鏈的不同部分之間構(gòu)成。-折疊有兩種類(lèi)型。一種為平行式，即一切肽鏈的N-端都在同一邊。另一種為反平行式，即相鄰兩條肽鏈的方向相反?！?〕-折疊在-轉(zhuǎn)角部分，由四個(gè)氨基酸殘基組成;彎曲處的第一個(gè)氨基酸殘基的-C=O和第四個(gè)殘基的–N-H之間構(gòu)成氫鍵，構(gòu)成一個(gè)不很穩(wěn)定的環(huán)狀構(gòu)造。這類(lèi)構(gòu)造主要存在于球狀蛋白分子中?！?〕-轉(zhuǎn)角

-turnβ-轉(zhuǎn)角〔β-turn〕為了緊緊折疊成嚴(yán)密的球蛋白，多肽鏈經(jīng)常反轉(zhuǎn)方向，成發(fā)夾外形。一個(gè)氨基酸的羰基氧以氫鍵結(jié)合到相距的第四個(gè)氨基酸的氨基氫上。N—1CH—CC2CHN—HO=C3CHNC—4CH—NRRHOHRROHOβ-轉(zhuǎn)角經(jīng)常出如今銜接反平行β-折疊片的端頭。2.超二級(jí)構(gòu)造和構(gòu)造域超二級(jí)構(gòu)造是指假設(shè)干相鄰的二級(jí)構(gòu)造中的構(gòu)象單元彼此相互作用，構(gòu)成有規(guī)那么的，在空間上能識(shí)別的二級(jí)構(gòu)造組合體。是蛋白質(zhì)二級(jí)構(gòu)造至三級(jí)構(gòu)造層次的一種過(guò)渡態(tài)構(gòu)象層次。構(gòu)造域是球狀蛋白質(zhì)的折疊單位。多肽鏈在二級(jí)構(gòu)造或超二級(jí)構(gòu)造的根底上進(jìn)一步繞曲折疊成嚴(yán)密的三級(jí)構(gòu)造的部分折疊區(qū)，具有部分生物功能。對(duì)于較大的蛋白質(zhì)分子或亞基，多肽鏈往往由兩個(gè)以上構(gòu)造域締合而成三級(jí)構(gòu)造。蛋白質(zhì)a構(gòu)造蛋白質(zhì)兩個(gè)構(gòu)造域表示圖3.蛋白質(zhì)的三級(jí)構(gòu)造蛋白質(zhì)的三級(jí)構(gòu)造(TertiaryStructure)是指在二級(jí)構(gòu)造根底上，肽鏈的不同區(qū)段的側(cè)鏈基團(tuán)相互作用在空間進(jìn)一步環(huán)繞、折疊構(gòu)成的包括主鏈和側(cè)鏈構(gòu)象在內(nèi)的特征三維構(gòu)造。維系這種特定構(gòu)造的力主要有氫鍵、疏水鍵、離子鍵和范德華力等。尤其是疏水相互作用，在蛋白質(zhì)三級(jí)構(gòu)造中起著重要作用。3、蛋白質(zhì)的四級(jí)構(gòu)造蛋白質(zhì)的四級(jí)構(gòu)造(QuaternaryStructure)是指由多條各自具有一、二、三級(jí)構(gòu)造的肽鏈經(jīng)過(guò)非共價(jià)鍵銜接起來(lái)的構(gòu)造方式；各個(gè)亞基在這些蛋白質(zhì)中的空間陳列方式及亞基之間的相互作用關(guān)系。這種蛋白質(zhì)分子中，最小的單位通常稱(chēng)為亞基或亞單位Subunit，它普通由一條肽鏈構(gòu)成，無(wú)生理活性；維持亞基之間的化學(xué)鍵主要是疏水力。由多個(gè)亞基聚集而成的蛋白質(zhì)經(jīng)常稱(chēng)為寡聚蛋白；第五節(jié)蛋白質(zhì)的性質(zhì)一、蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量蛋白質(zhì)相對(duì)分子量在10000~1000000之間。測(cè)定分子量的主要方法有浸透壓法、超離心法、凝膠過(guò)濾法、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。最準(zhǔn)確可靠的方法是超離心法二、蛋白質(zhì)的兩性解離及等電點(diǎn)蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)偏酸溶液中帶正電荷，在偏堿溶液中帶負(fù)電荷，在等電點(diǎn)pH時(shí)為兩性離子。電泳：帶電顆粒在電場(chǎng)中挪動(dòng)的景象。分子大小不同的蛋白質(zhì)所帶凈電荷密度不同，遷移率即異，在電泳時(shí)可以分開(kāi)。1.自在界面電泳：蛋白質(zhì)溶于緩沖液中進(jìn)展電泳。區(qū)帶電泳：將蛋白質(zhì)溶液點(diǎn)在浸了緩沖液的支持物上進(jìn)展電泳，不同組分構(gòu)成帶狀區(qū)域。3.紙上電泳：用濾紙作支持物。4凝膠電泳：用凝膠〔淀粉、瓊脂糖、聚丙烯酰胺〕作支持物。1〕圓盤(pán)電泳：玻璃管中進(jìn)展的凝膠電泳。2〕平板電泳：鋪有凝膠的玻板上進(jìn)展的電泳。+—-+等電聚焦電泳：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在其等電點(diǎn)時(shí)，凈電荷為零，在電場(chǎng)中不再挪動(dòng)。++－－－－+－－－－－5.06.07.0穩(wěn)定pH梯度5.06.07.0穩(wěn)定pH梯度通電++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－三、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)溶液穩(wěn)定的緣由：1〕外表構(gòu)成水膜〔水化層〕；2〕帶一樣電荷。布郎運(yùn)動(dòng)、丁達(dá)爾景象、電泳景象，不能透過(guò)半透膜，具有吸附才干四、蛋白質(zhì)的沉淀反響蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性與它的分子量大小、所帶的電荷和水化作用有關(guān)。改動(dòng)溶液的條件，將影響蛋白質(zhì)的溶解性質(zhì)在適當(dāng)?shù)臈l件下，蛋白質(zhì)可以從溶液中沉淀出來(lái)。不可逆沉淀在劇烈沉淀?xiàng)l件下，不僅破壞了蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性，而且也破壞了蛋白質(zhì)的構(gòu)造和性質(zhì)，產(chǎn)生的蛋白質(zhì)沉淀不能夠再重新溶解于水。由于沉淀過(guò)程發(fā)生了蛋白質(zhì)的構(gòu)造和性質(zhì)的變化，所以又稱(chēng)為變性沉淀。如加熱沉淀、強(qiáng)酸堿沉淀、重金屬鹽沉淀和生物堿單寧酸、苦味酸酸、三氯乙酸沉淀等都屬于不可逆沉淀可逆沉淀在溫暖條件下，經(jīng)過(guò)改動(dòng)溶液的pH或電荷情況，使蛋白質(zhì)從膠體溶液中沉淀分別。在沉淀過(guò)程中，構(gòu)造和性質(zhì)都沒(méi)有發(fā)生變化，在適當(dāng)?shù)臈l件下，可以重新溶解構(gòu)成溶液，所以這種沉淀又稱(chēng)為非變性沉淀。可逆沉淀是分別和純化蛋白質(zhì)的根本方法，如等電點(diǎn)沉淀法、鹽析法和有機(jī)溶劑沉淀法等。加高濃度鹽類(lèi)〔鹽析〕：加鹽使蛋白質(zhì)沉淀析出。分段鹽析：調(diào)理鹽濃度，可使混合蛋白質(zhì)溶液中的幾種蛋白質(zhì)分段析出。血清球蛋白〔50%(NH4)2SO4飽和度〕，清蛋白〔飽和(NH4)2SO4)。五、蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)與它們的構(gòu)造親密相關(guān)。某些物理或化學(xué)要素，可以破壞蛋白質(zhì)的構(gòu)造形狀，引起蛋白質(zhì)理化性質(zhì)改動(dòng)并導(dǎo)致其生理活性喪失。這種景象稱(chēng)為蛋白質(zhì)的變性(denaturation〕發(fā)生變性的蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造〔構(gòu)型〕和分子量不變，高級(jí)構(gòu)造〔構(gòu)象〕遭到破壞。有些蛋白質(zhì)的變性作用是可逆的，其變性如不超越一定限制，經(jīng)適當(dāng)處置后，可重新變?yōu)樘烊坏鞍踪|(zhì)〔復(fù)性作用〕。變性蛋白質(zhì)主要標(biāo)志是生物學(xué)功能的喪失。溶解度降低，易構(gòu)成沉淀析出，結(jié)晶才干喪失，分子外形改動(dòng)，肽鏈松散，反響基團(tuán)添加，易被酶消化。變性蛋白質(zhì)通常都是固體形狀物質(zhì)，不溶于水和其它溶劑，也不能夠恢復(fù)原有蛋白質(zhì)所具有的性質(zhì)。所以，蛋白質(zhì)的變性通常都伴隨著不可逆沉淀。引起變性的主要要素是熱、紫外光、猛烈的攪拌以及強(qiáng)酸和強(qiáng)堿等。變性作用蛋白質(zhì)復(fù)性反響稱(chēng)號(hào)試劑顏色反響有關(guān)基團(tuán)有此反響的蛋白質(zhì)或氨基酸雙縮脲反響NaOH、CuSO2紫色或粉紅色二個(gè)以上肽鍵一切蛋白質(zhì)米倫反響HgNO3、Hg(NO3)2及HNO3混合物紅色

Tyr黃色反響濃HNO3及NH3黃色、橘色

Tyr、Phe乙醛酸反響(Hopki