川芎貯藏過程中質(zhì)量變化及影響因素研究

川芎貯藏過程中質(zhì)量變化及影響因素研究川芎為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品,具有活血祛瘀、祛風(fēng)止痛的功效,為臨床常用中藥。川芎富含苯酞、多糖、揮發(fā)油等成分,在貯藏過程中極易出現(xiàn)走油、蟲蛀、霉變等劣變現(xiàn)象,嚴(yán)重影響臨床用藥的有效性和安全性。本課題研究川芎在不同貯藏條件下,外觀性狀、化學(xué)成分和藥效作用的變化過程,找到影響其質(zhì)量變化的關(guān)鍵因素,為川芎的貯藏養(yǎng)護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。研究內(nèi)容如下:1川芎藥材收集及貯藏條件設(shè)置2017年4月至5月從眉山東坡區(qū)、彭山謝家鎮(zhèn)、彭州敖平鎮(zhèn)等川芎主產(chǎn)區(qū)收集樣品15批。每批樣品分別采用聚乙烯塑料袋,聚丙烯編織袋包裝,貯藏于不同溫度(常溫、15℃、5℃)條件下。分別于貯藏的0月、1月、2月、3月、4月、5月、6月取樣,觀察樣品外觀性狀、測定樣品化學(xué)成分和藥效作用變化,研究川芎貯藏過程中的質(zhì)量變化及影響因素。另取7批樣品,貯藏前進(jìn)行殺蟲處理,采用聚丙烯編織袋包裝于常溫儲藏,與未殺蟲樣品比較,研究川芎害蟲的主要侵染環(huán)節(jié)。2川芎貯藏過程中外觀性狀變化及影響因素研究采用傳統(tǒng)的眼觀、手摸、鼻聞及現(xiàn)代分光測色技術(shù),研究川芎在不同貯藏條件下外觀性狀變化。研究表明:貯藏溫度是影響川芎外觀性狀的主要因素。5℃、15℃條件下,樣品均未發(fā)生明顯蟲蛀或霉變,其外觀性狀基本無變化。常溫條件下,聚丙烯編織袋包裝樣品在貯藏3月開始發(fā)生蟲蛀,蟲蛀樣品質(zhì)地變脆,產(chǎn)生蟲孔和蛀蟲排泄物,香氣濃郁程度顯著降低,與未發(fā)生蟲蛀樣品比較,重量明顯減輕,重量下降率范圍為:29.74~46.72%,中部圍粗顯著減小,減小率范圍為:10.31~30.11%。采用聚乙烯塑料袋包裝的部分樣品于貯藏3月開始發(fā)生霉變,霉變樣品質(zhì)地變軟,表面顏色變深,特異香氣消失,并產(chǎn)生異味,樣品斷面顏色顯著加深,將顏色數(shù)據(jù)化,表證亮度的L~*值,霉變前范圍為:61.86~69.71,霉變后范圍為:34.57~59.46,表證紅綠顏色的b~*值,霉變前范圍為:21.37~29.39,霉變后范圍為:33.12~47.68,表明斷面顏色經(jīng)霉變后由黃白色變?yōu)樯钭厣?。?jīng)殺蟲處理樣品采用聚丙烯編織袋包裝常溫貯藏均發(fā)生蟲蛀,而未殺蟲樣品采用聚乙烯塑料袋包裝相同溫度貯藏均未發(fā)生蟲蛀,表明蛀蟲浸染主要發(fā)生在貯藏環(huán)節(jié),而非采收、加工、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)。因此,川芎在貯藏過程中應(yīng)當(dāng)采用密閉包裝防止蟲蛀。3川芎貯藏過程中水分變化及影響因素研究依據(jù)2015年版《中國藥典》四部通則0832第四法測定川芎樣品水分含量。研究表明:初始水分和包裝材料是影響川芎貯藏過程中水分變化的主要因素。聚乙烯塑料袋包裝,樣品處于密封狀態(tài),水分在貯藏期間基本無變化,而采用聚丙烯編織袋包裝,樣品處于非密封狀態(tài),水分受外界濕度和自身初始水分影響,當(dāng)樣品初始水分低于9.63%時,在儲藏過程中含水量逐漸量增加,而初始水分高于12.80%,含水量逐漸降低,這也解釋了常溫條件下采用聚乙烯包裝霉變樣品初始水分均高于12.80%,而同一樣品相同貯藏溫度,采用聚丙烯編織袋包裝樣品未發(fā)生霉變的原因。因此,川芎應(yīng)控制初始水分,并置于通風(fēng)干燥處貯藏。4川芎貯藏過程中化學(xué)成分變化及影響因素研究4.1川芎貯藏過程中多糖含量變化及影響因素研究采用紫外分光光度法測定不同貯藏條件下川芎樣品多糖含量變化。研究表明:各川芎樣品多糖含量均呈下降趨勢。貯藏溫度是影響多糖含量變化的主要因素,溫度越高,多糖含量下降率越大。5℃條件下,多糖含量下降率范圍為:7.04~19.89%。15℃條件下,多糖含量下降率范圍為:10.53~29.58%。常溫條件下,未蟲蛀和霉變樣品多糖含量下降率范圍為:24.25~36.86%。蟲蛀或霉變樣品,多糖下降速率明顯加快,含量顯著降低,蟲蛀或霉變前多糖含量基本無變化,而蟲蛀后多糖含量下降率范圍為:32.16~55.21%,霉變后多糖含量下降率范圍為:35.21~54.97%。4.2川芎貯藏過程中總酚含量變化及影響因素研究采用紫外分光光度法測定不同貯藏條件下川芎樣品總酚含量變化。各貯藏條件下樣品總酚含量均呈下降趨勢,霉變對總酚含量有重要影響。未霉變樣品總酚含量下降率范圍為:2.59~15.45%,而霉變樣品總酚含量下降率范圍為:36.21~47.47%,霉變使總酚下降速率明顯加快,含量顯著降低。4.3川芎貯藏過程中阿魏酸等10種有效成分含量變化及影響因素研究HPLC法同時測定川芎嗪、綠原酸和阿魏酸、苯酞(以洋川芎內(nèi)酯I、洋川芎內(nèi)酯H、阿魏酸松柏酯、洋川芎內(nèi)酯A、正丁基苯酞、Z-藁本內(nèi)酯、丁烯基苯酞七者總含量計(jì))10種有效成分。各貯藏條件下樣品中川芎嗪、綠原酸和阿魏酸、苯酞三者含量均呈下降趨勢。貯藏溫度是影響三者含量變化的主要因素,溫度越高,含量下降率越大。5℃條件下,三者含量下降率范圍分別為:4.61~18.74%,4.22~15.64%、7.41~25.46%。15℃條件下,三者含量下降率范圍分別為:9.45~29.39%、9.15~29.98%、12.11~30.93%。常溫條件下,未霉變或蟲蛀樣品三者含量下降率范圍分別為:21.46~38.16%、20.42~41.52%、16.06~42.03%。蟲蛀或霉變樣品,三者含量下降速率明顯加快,含量顯著降低,蟲蛀或霉變前三者含量無顯著性變化,變質(zhì)后三者含量下降率范圍分別為:29.68~60.42%、30.74~62.67%、26.13~66.83%。4.4川芎貯藏過程中揮發(fā)性成分變化依據(jù)2015年版《中國藥典》四部通則2204甲法測定川芎樣品揮發(fā)油含量。研究表明:各貯藏條件下樣品揮發(fā)油含量均呈下降趨勢。貯藏溫度和包裝材料是影響揮發(fā)油含量變化的主要因素。貯藏溫度越高,揮發(fā)油下降率越大。同一溫度下,聚乙烯塑料帶包裝樣品揮發(fā)油比聚丙烯編織包裝樣品下降率低。5℃、15℃、常溫條件下,采用聚丙烯編織包裝樣品下降率范圍分別為:11.29~28.90%、16.13~44.53%、49.46~66.67%,而聚乙烯塑料包裝樣品揮發(fā)油含量下降率范圍分別為:7.53~13.28%、11.29~23.44%、23.53~35.48%。從6批川芎樣品中,共分離出揮發(fā)性成分75種,鑒定出65種,主要為苯酞、烯萜醇、脂肪酸類化合物。在川芎貯藏過程中,主要揮發(fā)性成分相對含量發(fā)生顯著變化,其中Z-藁本內(nèi)酯、洋川芎內(nèi)酯A相對含量降低,而正丁基苯酞、丁烯基苯酞相對含量升高,其他主要揮發(fā)性成分相對含量無明顯變化規(guī)律。霉變樣品霉變后檢測到8種新增化合物,為二十一碳烯(Heneicosene)、十九烷醇(Nonadecanol)、鄰異丙烯基甲苯(o-Isopropenyltoluene)等,且相對含量均小于1%,其他批次樣品揮發(fā)性成分種類基本無變化。5川芎貯藏過程中對大鼠體外凝血功能影響作用變化研究運(yùn)用全自動血凝儀,以凝血四項(xiàng)(PT、APTT、TT、FIB)為評價指標(biāo),研究貯藏過程中川芎對大鼠體外凝血作用的影響。研究表明:川芎隨著貯藏時間延長,抗凝血活性逐漸減弱,發(fā)生蟲蛀或霉變時,抗凝血活性顯著降低。與空白組比較,樣品未霉變或蟲蛀時,能明顯延長PT、APTT、TT(P<0.01),具有顯著抗凝血活性,隨著貯藏時間延長,抗凝血活性逐漸減弱,仍具有較強(qiáng)抗凝血活性;與貯藏2月未蟲蛀或霉變樣品比較,蟲蛀樣品對PT、APTT、TT的延長作用隨貯藏時間延長而顯著降低