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中低海拔因素下冠心病患者EPCs數(shù)量及其與相關(guān)因子關(guān)系的實(shí)驗(yàn)性研究目的:探討中低海拔因素差異下,蘭州地區(qū)(海拔:1520m)與咸陽地區(qū)(海拔:386m)冠心病患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)數(shù)量對比情況以及與一些相關(guān)因子的關(guān)系。對比分析蘭州市健康組與冠心病組、咸陽市健康組與冠心病組、蘭州市健康組與咸陽市健康組、咸陽市健康組與冠心病組EPCs數(shù)量、CRP、VEGF、IL-8、HCF、HIF-1α、SDF-1α、CXCR2、CXCR4、CXCR7之間的關(guān)系和差異。以及比較性別因素下各因子差異。為研究海拔因素下EPCs與冠心病及一些密切相關(guān)的因子之間的聯(lián)系提供研究基礎(chǔ),為冠心病的診斷與治療提供一些相關(guān)對策與指導(dǎo)。方法:根據(jù)入組標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)選取兩地樣本并記錄樣本一般情況。流式細(xì)胞法測定兩地區(qū)冠心病患者及健康組外周血EPCs表面特異性抗原標(biāo)記CD45、CD34、KDR的陽性表達(dá)率;檢驗(yàn)科生化室檢測樣本甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等生化指標(biāo)。免疫散色比濁法測得兩組樣本外周血血清hs-CRP(超敏C反應(yīng)蛋白)的濃度;通過ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附法)測定其外周血血清中功能因子IL-8(白介素因子8)、VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)、HCY(高同型半胱氨酸)、HIF-1a(低氧誘導(dǎo)因子la)、SDF-1a(基質(zhì)細(xì)胞衍生因子la)的表達(dá)情況;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測外周血單核細(xì)胞因子CXCR2(趨化因子受體2)mRNA、CXCR4(趨化因子受體4)mRNA、CXCR7(趨化因子受體7)mRNA表達(dá)情況;Western-bloting檢測單核細(xì)胞HIF-1a的蛋白表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析比較兩地EPCs數(shù)量與相關(guān)因子關(guān)系情況。結(jié)果:兩地健康組EPCs數(shù)量都較冠心病組增多,而蘭州市和咸陽市冠心病組EPCs數(shù)量無明顯差異,咸陽市健康組較蘭州市健康組EPCs數(shù)量增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。咸陽市冠心病與健康組對比TC(甘油三酯)、LDL(低密度脂蛋白)、hs-CRP間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。都是冠心病組高于健康組。而腹圍、BMI、TG之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。兩地hs-CRP對比分析得出冠心病組均高表達(dá)于對照組且蘭州市冠心病組hs-CRP濃度與EPCs數(shù)量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.631);而海拔對CRP結(jié)果影響差異不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。ELISA檢測結(jié)果:①IL-8:組內(nèi)比較男性冠心病組兩地冠心病組較健康組表達(dá)上調(diào)(519.1±272;241.23±209)(428±295.72;97.92±41.8);冠心病組較健康組表達(dá)上調(diào)(628±273.59;218±180.6);組間比較只有男性健康組中海拔地區(qū)較低海拔表達(dá)上調(diào)(241.23±209;97.92±41.8)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②VEGF:組內(nèi)比較咸陽市男女性冠心病組都較健康組表達(dá)下調(diào)(534.2±180.7;874.3±201.6)(156.78±1.38;287±134.64)。組間比較男性健康組中海拔地區(qū)較低海拔表達(dá)上調(diào)(1348.7±389;874.3±201.6);女性冠心病組中海拔地區(qū)較低海拔表達(dá)上調(diào)(767.16±102.2;156.78±1.38)。差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。③HCY:組內(nèi)比較低海拔地區(qū)男性冠心病組較健康組表達(dá)上調(diào)(17.23±5.19;2.99±0.86);中海拔地區(qū)女性冠心病組較健康組表達(dá)上調(diào)(34.7±17.86;12.79±4.23)組間比較男性健康組中海拔較低海拔表達(dá)上調(diào)(19.7±12.6;12.99±0.86);女性冠心病組中海拔較低海拔表達(dá)上調(diào)(34.7±17.86;12.14±12.06)差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。④SDF-1a:組內(nèi)比較中海拔地區(qū)男性冠心病組較健康組表達(dá)下調(diào)(3.9±1.7;10.03±5.18)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑤HIF-la:組內(nèi)比較中海拔地區(qū)女性冠心病組較健康組表達(dá)上調(diào)(4.75±2.92;0.90±0.72);組間比較男性健康組中海拔地區(qū)較低海拔表達(dá)上調(diào)(6.57±2.81;1.6±0.79);差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果:蘭州市較咸陽市CXCR2mRNA表達(dá)下降,差異顯著(P=-0.032);兩地CXCR4.CXCR7表達(dá)無顯著性差異。western-blot結(jié)果:蘭州市健康組HIF-1a表達(dá)較咸陽市上調(diào),冠心病組HIF-1a表達(dá)較咸陽市也上調(diào);差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:兩地冠心病組較健康組EPCs數(shù)量有所降低。低海拔健康組較中海拔健康組數(shù)量增加。中海拔冠心病EPCs數(shù)量與CRP關(guān)系呈負(fù)相關(guān)。中海拔HIF-1a因子表達(dá)更強(qiáng);IL-8HIF-1a、CXCR2對研究兩地間冠心病發(fā)病差異有意義,兩地VEGF、HIF-1a、SDF-1a屬于抑炎因子,結(jié)果是健康組都高表達(dá)于冠心病組。說明VEGF、HIF-1a、SDF-1a有可能對促進(jìn)EPCs數(shù)量的增高有意義;IL-8、HCY屬于促炎因子,結(jié)果是冠心病組高表達(dá)于健康組,這與
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