實驗3-環(huán)境微生物的檢測

實驗三環(huán)境微生物的檢測一、實驗?zāi)康?.了解周圍環(huán)境中微生物的分布情況。2.懂得無菌操作在微生物實驗中的重要性。3.了解四大類微生物的菌落特征。二、實驗原理在我們周圍的環(huán)境中存在著種類繁多的、數(shù)量龐大的微生物。土壤、江河湖海、塵埃、空氣、各種物體的表面以及人和動物體的口腔、呼吸道、消化道等都存在著各種微生物。由于它們體積微小，人們用肉眼無法觀察到它們個體的存在。但是只要稍加留意，我們就可以在發(fā)霉的面包、朽木上看到某些微生物群體。這些現(xiàn)象表明，自然界只要有微生物可以利用的物質(zhì)和環(huán)境條件，微生物就可以在其上生長繁殖。據(jù)此，我們在實驗室里就可以用培養(yǎng)基來培養(yǎng)微生物。培養(yǎng)基是用人工配制的、適合微生物生長繁殖和產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合養(yǎng)料。其中含有微生物所需要的六大營養(yǎng)要素：碳源、氮源、無機鹽、生長因子、氣體和水分。此外，根據(jù)不同的微生物的要求，在配制培養(yǎng)基時還需用酸液或堿液調(diào)節(jié)至適宜的pH。配制好的培養(yǎng)基必須進行滅菌。所謂滅菌是指采用各類的物理或化學(xué)因素，使物體內(nèi)外的所有微生物喪失其生長繁殖能力的措施。經(jīng)過滅菌后的物體是無菌的。消毒是與滅菌完全不同的概念，它是指用較溫和的物理因素殺死物體表面和內(nèi)部病原微生物的一種常用的衛(wèi)生措施。滅菌的方法較多，廣泛使用的是高溫滅菌，其中最常用的是高壓蒸汽滅菌法。此法是把待滅菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的。在1.05kg/cm2的蒸汽壓力下，溫度可達121℃。一般只要維持15~20min，就可殺死一切微生物的營養(yǎng)體和它們的各種孢子。微生物的接種技術(shù)是生物科學(xué)研究中的一項最基本操作技術(shù)。為了確保純種不被雜菌污染，在整個接種過程中，必須進行嚴格的無菌操作。在實驗過程中必須牢固樹立無菌概念，經(jīng)常保持實驗臺及周圍環(huán)境的清潔，嚴格無菌操作，避免雜菌的污染，這是保證實驗成功的必要條件。如將微生物接種到適合其生長的固體培養(yǎng)基表面，在適宜的溫度下(一般細菌37℃：霉菌等28℃)，培養(yǎng)一段時間(一般24~48h)后，少量分散的菌體或孢子就可生長繁殖成肉眼可見的細胞群體，此即菌落。如平板上的菌落是由單個細胞(或單個孢子)生長繁殖而成的，就是一個純種細胞群或克??；若培養(yǎng)后大量菌落聚集在一起形成的為菌苔。不同種的微生物可形成大小、形態(tài)各異的菌落，根據(jù)微生物菌落形態(tài)的不同，可初步鑒別出四大類微生物：細菌、放線菌、酵母菌和霉菌。細菌的菌落呈圓形、較小而薄、透明或不透明、質(zhì)地“細膩”，有的具有色澤，有的邊緣不整齊，有的表面濕潤、光滑，有的表面干燥有褶皺。此外，細菌常因分解含氮化合物而產(chǎn)生臭味。酵母菌的菌落通常比細菌菌落大，圓形、厚、不透明、色素單一，多為乳白，少數(shù)為橙或紅色。酵母菌因普遍能發(fā)酵含碳有機物產(chǎn)醇，故菌落多伴有酒香味。防線菌菌落小而致密，或堅硬、或呈粉狀。不少放線菌還產(chǎn)生特殊的土腥味。霉菌菌落大而疏松、或大而緊密。氣生菌絲會發(fā)育形成一定形狀、構(gòu)造和色澤的子實器官，所以菌落表面往往有肉眼可見的構(gòu)造和顏色。三、實驗材料人體表和空氣中的微生物。四、實驗器材與試劑1.器材恒溫培養(yǎng)箱、無菌平皿、電爐、酒精燈、火柴、無菌棉簽和記號筆。2.試劑牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、酵母膏葡萄糖培養(yǎng)基(簡稱YPD)、高氏一號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基。五、實驗操作=1\*ROMANI.融化培養(yǎng)基將裝有無菌培養(yǎng)基的三角瓶置水浴中煮沸，待培養(yǎng)基融化后取出，當(dāng)冷至50~60℃左右時，進行下一步。面生長的各種微生物，然后