生物樣本庫的建設

生物樣本庫建設定義生物樣本庫biologicalspecimenbank,BSB標準化地收集、保存用于各種研究的正常或病理標本，包括人體器官組織、全血、血漿、血清、生物體液或經處理過的生物樣本〔DNA、RNA、蛋白等〕以及與這些生物樣本相關的臨床、病理、治療、隨訪、知情同意等資料及其質量控制、信息管理與應用系統(tǒng)。生物樣本庫政策法規(guī)技術標準

倫理標準ISO標準實驗室平安臨床實驗室倫理運輸標準操作標準〔SOPs〕質量控制標準樣本采集樣本處理樣本質量檢驗樣本儲存樣本運輸DNA質量鑒定、RNA質量鑒定、蛋白質質量鑒定知情同意書質量審查樣本運輸樣本轉移協(xié)議倫理委員會倫理審查ISO15189:2003醫(yī)學實驗室質量和能力的專用要求CNAS-CL02醫(yī)學實驗室-質量和能力的認可準那么ISO/IEC17025:2005檢測和校準實驗室能力的通用要求CNAS-CL01檢測和校準實驗室認可準那么ISO9001:2023/GBT19001-2023質量管理系統(tǒng)要求GB/T1.1-2023標準化工作導那么：標準的結構和編寫規(guī)那么ISO標準實驗室平安GB19489-2023實驗室生物平安通用要求

CNAL/AC30-2005實驗室生物平安認可準那么WS/T233-2002微生物和生物醫(yī)學實驗室生物平安通用準那么GB50346-2004生物平安實驗室建筑技術標準已建立實驗室生物平安管理體系臨床實驗室GB/T20468-2006臨床實驗室定量測定室內質量控制指南GB/T20469-2006臨床實驗室設計總那么GB/T20470-2006臨床實驗室室間質量評價要求WS/T102-1998臨床檢驗工程分類與代碼WS/T224-2002真空采血管及其添加劑WS/T225-2002臨床化學檢驗血液標本的收集與處理WS/T227-2002臨床檢驗操作規(guī)程編寫要求WS/T228-2002定量臨床檢驗方法的初步評價WS/T230-2002臨床診斷中聚合酶鏈反響〔PCR〕技術應用WS/T249-2005臨床實驗室廢物處理原那么WS/T250-2005臨床實驗室質量保證的要求WS/T251-2005臨床實驗室平安準那么WS/T255-2005臨床檢驗醫(yī)學參考測量實驗室赫爾辛基宣言涉及人類為研究對象的生物醫(yī)學研究了國際倫理方針指南關于DNA序列申請專利的聲明：專利關于早期發(fā)布原始序列數據有關專利申請問題的聲明關于DNA取樣的聲明：控制與獲取世界人類基因組與人權宣言涉及人體的生物醫(yī)學研究倫理審查方法〔試行〕人類基因治療申報臨床試驗指導原那么關于利益共享的聲明關于基因治療的聲明關于人類基因組數據庫的聲明國際涉及人類的生物醫(yī)學研究倫理準那么人類遺傳數據國際宣言綱要人體生物醫(yī)學研究國際倫理指南倫理物流術語液氮生物容器中國民用航空危險品運輸管理規(guī)定危險物品航空平安運輸技術細那么運輸組織機構樣本庫管理委員會專家委員會倫理委員會樣本庫職能部門樣本庫負責人業(yè)務主管質量主管專職技術人員所有從業(yè)人員應取得《崗前培訓考核合格證》生物樣本庫工作流程標本采集標本處理入庫登記標本儲存質控YesNo銷毀《廢棄物處置操作程序》抽檢NoYes標本使用使用申請標本發(fā)放剩余標本回收數據庫標本采集生物標本采集和儲存研究成功的關鍵要求根據所采樣本的類型和所分析的物質而定在采集和儲存過程中不能受到“污染〞儲存的生物標本在任何時候進行檢測都可以獲得一致的結果所有的生物標本都應有詳細的背景材料和鑒別標識標本采集舉例尿液標本晨尿濃縮尿，適用于尿常規(guī)檢查隨機尿僅適用于門診、急診尿常規(guī)過篩檢驗空腹尿糖尿病患者餐前尿糖測定餐后尿餐后兩小時采集，適用于糖尿病患者病理性蛋白尿、糖尿檢查12h尿晚上8點排空尿液后12小時內采集的所有尿液。用于尿沉渣計數、尿微量白蛋白排泄率測定等12h禁水尿晚8時開始禁飲，次日早8時排空膀胱后再次留取的尿液，適用于尿滲透壓檢測24h尿上午8時排盡后，收集接下來24小時內排出的所有尿液，記錄總尿量，用于體內代謝產物的定量檢測，如尿蛋白、尿糖、尿肌酐、尿鈣、尿兒茶酚胺、檢查等培養(yǎng)用尿留尿前先清洗外陰，消毒尿道口后，以無菌容器只接留中段尿10ml，用于微生物檢查標本采集尿液標本的保存-最好不超過2h尿液化學物質和有形成份不穩(wěn)定，排出后即開始發(fā)生物理和化學變化，如膽紅素、尿膽原被氧化，細菌生長，尿素酵解生成氨使尿pH升高，尿液有形成份破壞，葡萄糖被細菌利用而降低。尿液保存常用方法有兩種：1.冷藏法：4℃條件下不超過8h可抑制微生物生長，維持尿液pH恒定，使尿中有形成份的形態(tài)根本不變，但是可導致磷酸鹽和尿酸鹽析出形成沉淀，影響尿沉渣檢查。標本采集尿液標本的保存-最好不超過2h尿液化學物質和有形成份不穩(wěn)定，排出后即開始發(fā)生物理和化學變化，如膽紅素、尿膽原被氧化，細菌生長，尿素酵解生成氨使尿pH升高，尿液有形成份破壞，葡萄糖被細菌利用而降低。尿液保存常用方法有兩種：2.化學防腐法：①甲苯：〔一般用量為1.0～2.0ml甲苯/100ml尿液〕，防止細菌污染，通常用于尿酮體、尿糖，尿蛋白質等測定②甲醛：每100ml尿液加40%甲醛0.5ml，可抑制細菌生長并固定尿中有形成份，適用于尿液中細胞與管型的測定；③麝香草酚：用10%的麝香草酚異丙醇溶液，到達抑菌及保護代謝物的作用，適用于尿鉀、鈉、鈣等測定④濃鹽酸：每100ml尿標本中參加濃鹽酸1ml即可，使尿液維持在pH2.0左右。主要可用于17-羥皮質類因醇、17-酮類固醇、兒茶酚胺、VMA等定量測定等。標本采集樣本采集操作規(guī)程血液糞便尿液口腔拭子唾液陰道拭子皮膚拭子標本采集標本運送血液標本采集后應盡快從采血現場運送至實驗室，注意是否存在干擾血凝塊。標本運送過程中要注意樣本的包裝、溫度要求及處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性，標本管在運送過程中要保持管口封閉，向上垂直放置，防止劇烈振動尿液標本從流取到檢驗應在2小時內完成，如不能及時送檢分析，必須加防腐劑或冷藏不超過8小時細菌檢查標本應采用消毒容器，防止細菌污染，室溫條件不超過2小時或4℃冷藏保存。標本運送標本處理和保存標本采集后應及時處理、分裝后保存血液標本處理操作規(guī)程DNA提取和純化操作規(guī)程：血液、糞便、棉拭子、唾液RNA提取和純化操作規(guī)程：血液、棉拭子蛋白質提取和保存操作規(guī)程標本處理和保存血液標本處理操作規(guī)程全血、血清、血漿、干血片、血凝塊、白細胞血清：指全血不經抗凝處理，在凝固過程中，血漿中除去纖維蛋白原別離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿血漿：離開血管的全血經抗凝處理后，通過離心沉淀，所獲得的不含細胞成分的液體，其中含有纖維蛋白原。全血：由液態(tài)血漿和血細胞組成標本處理和保存血液標本處理操作規(guī)程全血標本的保存生化檢驗：盡可能在2小時內檢驗或別離血清/血漿，不能及時別離或檢驗時，應4℃低溫冷藏，不能超過24小時。操作時動作應輕柔，防止劇烈振蕩，防止溫度變化過大或凍融，易導致溶血。DNA檢測：4℃保存不超過7天，-20℃保存不超過一年，-80℃長期保存RNA檢測：采集后應盡快別離血細胞、血清/血漿，或參加RNA抑制劑〔如trizol〕，-20℃保存不超過2個月，-80℃保存不超過半年。標本處理和保存血液標本處理操作規(guī)程血清的別離采血時應采用無抗凝劑的采血管；采血后，室溫〔22～25℃〕放置30～60min，加促凝劑時凝集加快〔5～15min)，1000～1200g離心10min，吸取上層淡黃色上清液。有凝膠屏障的別離管可保存在4℃，24小時內吸取上層血清；無凝膠屏障的必須立即吸取上層血清。保存條件常溫下不超過8小時；4℃不超過48小時；48小時以上的應置于-20℃保存；提取RNA的應立即置于-80℃保存。防止反復凍融。標本處理和保存血液標本處理操作規(guī)程血漿的別離采血時應采用有抗凝劑的采血管；采血后，1000～1200g離心10min，吸取上層淡黃色上清液。有凝膠屏障的別離管可保存在4℃，24小時內吸取上層血清；無凝膠屏障的必須立即吸取上層血清。保存條件常溫下不超過8小時；4℃不超過48小時；48小時以上的應置于-20℃保存；提取RNA的應立即置于-80℃保存。防止反復凍融。質量控制標本入庫前應經過質量控制，符合質量標準的標本才能入庫①符合標本采集、處理的要求，檢查采集和處理記錄②標本信息采集表填寫完整③標本運送符合要求，交接運送記錄完整④標本管無空管、無破損、良好密封，標簽清晰完整、無脫落⑤檢查標本是否受到污染，核酸質量標本入庫編號原那么總原那么：唯一性、共享性輔原那么：在滿足總原那么根底上，盡量精簡，編號長度盡量保持統(tǒng)一生物樣本庫信息表標本入庫標本編號原那么總原那么：唯一性、共享性輔原那么：在滿足總原那么根底上，盡量精簡，編號長度盡量保持統(tǒng)一舉例：2023年收到的第102份標本，類型是糞便，目的用于結腸道菌群分析1700102D15W212023年收到的第256份標本，類型是血清，目的用于心梗的研究1700256G01BS1標本使用使用申請：填寫《標本申請單》標本發(fā)放：填寫《標本使用登記表