羅氏調(diào)經(jīng)種子丸治療腎虛肝郁型黃體不健的實驗研究

羅氏調(diào)經(jīng)種子丸治療腎虛肝郁型黃體不健的實驗研究

黃綠色功能障礙（pmd）是指卵黃酮分泌不足或采取措施減少妊娠高血壓的臨床綜合征。西醫(yī)學(xué)一般認(rèn)為是由于下丘腦—垂體功能失調(diào),使卵巢排卵后黃體分泌孕酮不足,黃體期縮短,以致子宮內(nèi)膜分泌反應(yīng)不良,引起月經(jīng)不調(diào);或內(nèi)膜發(fā)育不良,不利于受精卵的種植和早期發(fā)育,而導(dǎo)致不孕、自然流產(chǎn)。本課題組應(yīng)用已故著名婦科專家羅元愷教授的經(jīng)驗方羅氏調(diào)經(jīng)種子丸對腎虛肝郁型黃體不健所致系列疾病和高催乳素血癥進行了多年的研究,取得了良好的療效,現(xiàn)將其中月經(jīng)失調(diào)部分研究結(jié)果報道如下。1臨床研究1.1數(shù)據(jù)和方法1.1.1菌株年齡、資料及標(biāo)準(zhǔn)全部病例來自1998年11月至2002年3月在廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科門診就診的月經(jīng)失調(diào)患者96例,年齡最大38歲,最小23歲,平均年齡(29.86±3.65)歲;病程最長10年,最短3個月,平均(39.48±30.73)月;其中月經(jīng)先期43例,月經(jīng)后期13例,月經(jīng)先后無定期19例,月經(jīng)過多35例,月經(jīng)過少12例,經(jīng)期延長29例。診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)符合衛(wèi)生部《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》有關(guān)規(guī)定。采用隨機數(shù)字表法將患者隨機分為羅氏調(diào)經(jīng)種子丸治療組(簡稱治療組)79例和麒麟丸對照組(簡稱對照組)17例,兩組的年齡、病程等均無顯著性差異(P>0.05),具有可比性。1.1.2患者組2治療組給予服用羅氏調(diào)經(jīng)種子丸(本院制劑,主要成分有菟絲子、白芍、當(dāng)歸、熟地、淮山藥、柴胡等),溫開水送服,每次6g,3次/d,連續(xù)服用3個月為1療程。對照組給予麒麟丸[廣東汕頭市中藥廠生產(chǎn),主要成分有何首烏、淫羊藿、菟絲子、鎖陽、黨參等,具有補腎填精,益氣養(yǎng)血之效。批準(zhǔn)文號:(93)衛(wèi)藥準(zhǔn)字Z-46號]口服,每次6g,3次/d,連續(xù)服用3個月為1療程。1.1.3兩組臨床療效比較(1)觀察病人的主要臨床癥狀、體征、舌象、脈象和基礎(chǔ)體溫,統(tǒng)計兩組臨床總療效;(2)月經(jīng)期第7～10天抽血測定血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、睪酮(T)、催乳素(PRL),基礎(chǔ)體溫上升第7～8天測定孕酮(P),治療前后各檢測1次。1.1.4療效判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)《中華人民共和國中醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)·中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》。有效:治療后月經(jīng)周期、經(jīng)量、經(jīng)期恢復(fù)正常達(dá)3個月以上,或在治療中妊娠,其他癥狀消失或減輕。無效:治療后月經(jīng)情況無明顯改善或加重。1.1.5統(tǒng)計方法采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計。1.2結(jié)果1.2.1兩組均能的比較表1結(jié)果顯示,經(jīng)3個月治療后,兩組療效相仿(P>0.05)。1.2.2lh/fsh比值表2結(jié)果顯示,治療后患者血清FSH、LH、E2、PRL、P水平及LH/FSH比值均較治療前有顯著性改善(P<0.01)。說明羅氏調(diào)經(jīng)種子丸能夠調(diào)整LH/FSH比值,升高血中E2、P水平,進而調(diào)整內(nèi)分泌。1.2.3構(gòu)造前兩種種子丸的臨床應(yīng)用表3結(jié)果顯示,羅氏調(diào)經(jīng)種子丸治療后患者BBT在卵泡期和黃體期均有顯著性改善(P<0.01),提示羅氏調(diào)經(jīng)種子丸有促進卵泡發(fā)育和改善黃體功能的作用。2機械研究2.1材料和方法2.1.1藥物、試劑和儀器動物:健康雌性SD大鼠,清潔級,體質(zhì)量200～250g,共40只,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。實驗藥品及儀器:滅吐靈注射液由無錫市第七制藥有限公司生產(chǎn),批號:001113;溴隱停片由德國許瓦茲大藥廠生產(chǎn),批號:T16082A;羅氏調(diào)經(jīng)種子丸由廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院制劑室提供,水提后制成每mL含生藥1.35g;血清E2、P、PRL放射免疫試劑盒由天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程公司提供;SN-695型智能放免γ測量儀由上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠生產(chǎn);DDL-5低速冷凍離心機由上海安婷科學(xué)儀器廠生產(chǎn);HZS-H水浴振蕩器由哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)。2.1.2灌胃水提液及定期用藥①分組:稱體質(zhì)量,將大鼠隨機分為4組,每組10只動物:空白組(A組)、模型組(B組)、中藥組(C組)、西藥組(D組)。②將大鼠每日早晚各1次陰道涂片觀察動情周期,連續(xù)2個動情周期穩(wěn)定后施行以下給藥方案:各組大鼠進入動情前期(即卵泡期)開始用藥,空白組(A組)與模型組(B組)每100g體質(zhì)量每日灌胃生理鹽水1mL;中藥組(C組)每日灌胃中藥水提液13.5g/kg?(相當(dāng)于成人劑量的5.7倍);西藥組(D組)每日灌胃溴隱停(用注射用水稀釋成混懸液)1.6mg/kg,4組均持續(xù)灌胃5個性周期(20d)。除空白組外,其他各組從第2個性周期(8d)后1d?開始皮下注射滅吐靈針12.5mg?/只,持續(xù)用藥3個性周期(12d)。③上述各組第1次給藥前及最后1次給藥后2d,稱取大鼠體質(zhì)量,眼眶取血,離心收集血清,采用放射免疫法測定P、E2、PRL,同時處死大鼠,分離子宮、卵巢,去除周圍脂肪組織,迅速稱取組織(濕稱)的質(zhì)量,分別計算子宮、卵巢系數(shù)[器官組織(濕)質(zhì)量(mg)與大鼠體質(zhì)量(100g)的比],并立即用體積分?jǐn)?shù)為10%甲醛固定,送病理檢查。2.2運行監(jiān)測患者精子、卵巢系數(shù)(1)一般情況:毛色、納食、體質(zhì)量、大便、活動等。(2)解剖后觀察:子宮、卵巢形態(tài)和質(zhì)量(濕質(zhì)量),計算子宮、卵巢系數(shù)。(3)光鏡下觀察子宮內(nèi)膜所處時期、卵巢黃體形態(tài)、成熟卵泡數(shù)、新生黃體數(shù)、閉鎖卵泡數(shù)目。(4)放射免疫法測定血清P、E2、PRL值。2.3統(tǒng)計方法采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計。2.4結(jié)果2.4.1各組大鼠動物體質(zhì)量情況造模后西藥組大鼠明顯表現(xiàn)為精神倦怠思睡,睡多活動少,飲食減少,體質(zhì)量減輕;模型組部分大鼠有倦怠表現(xiàn),較西藥組輕,經(jīng)刺激后可有改善;中藥組較其他3組活動明顯增加,大便溏;空白組大鼠表現(xiàn)受驚嚇,毛稀松,活動少,大便溏或飲食減少。各組動物體質(zhì)量情況詳見表4。結(jié)果顯示,模型組體質(zhì)量低于空白組(P<0.05),中藥組體質(zhì)量高于模型組(P<0.01),并超過空白組(P<0.05),西藥組體質(zhì)量與模型組相仿(P>0.05)。2.4.2各組動物子宮和卵巢系數(shù)的比較表5結(jié)果顯示,羅氏調(diào)經(jīng)種子丸可增加模型動物的子宮系數(shù)和卵巢系數(shù)(P<0.01),其作用與西藥溴隱停相仿(P>0.05)。2.4.3各組動物的血清水平為ii、p和prl表6結(jié)果顯示,中藥和西藥均能改善模型動物的性激素的分泌(P<0.01)。2.4.4各組的成熟卵數(shù)、新生黃芽數(shù)和封閉卵數(shù)的比較表7結(jié)果顯示,羅氏調(diào)經(jīng)種子丸和溴隱停均可增加模型動物的成熟卵泡數(shù)和新生黃體數(shù)(P<0.01)。2.4.5羅氏種子處理丸對子宮內(nèi)膜病理變化的影響表8結(jié)果顯示,羅氏調(diào)經(jīng)種子丸能較好地將模型大鼠增殖期的子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)化為分泌期的子宮內(nèi)膜。3討論3.1腎中陰陽轉(zhuǎn)化病對于黃體不健的中醫(yī)辨證,目前尚無統(tǒng)一的認(rèn)識,有些醫(yī)家認(rèn)為,黃體不健的中醫(yī)辨證主要分為腎虛肝郁、腎虛宮寒、腎虛脾弱三型;亦有學(xué)者研究認(rèn)為,黃體不健的中醫(yī)辨證主要為腎虛肝郁型,其中偏腎陽虛者占69%～86%。本課題組根據(jù)“腎藏精”、“腎主生殖”、“經(jīng)水出諸腎”及真機期(排卵期)是腎中陰陽轉(zhuǎn)化,“重陰必陽”的結(jié)果,認(rèn)為陰精不足則轉(zhuǎn)化排卵不良,出現(xiàn)陰不足陽亦虛的證候,同時腎水不足以養(yǎng)肝柔肝亦出現(xiàn)肝郁之證。本研究前曾通過對46例月經(jīng)失調(diào)的患者進行臨床分析和內(nèi)分泌測定,發(fā)現(xiàn)屬黃體不健的有23例,占50%,說明月經(jīng)不調(diào)與黃體不健關(guān)系密切。應(yīng)用補腎疏肝為主的羅氏調(diào)經(jīng)種子丸治療本病取得了顯著的療效,本研究進一步證實以補腎疏肝為主的羅氏調(diào)經(jīng)種子丸對黃體不健有改善作用。3.2《羅元愷論醫(yī)集》定經(jīng)湯全國著名中醫(yī)學(xué)專家羅元愷教授在治療婦科疾病方面具有豐富的臨床經(jīng)驗和深厚的學(xué)術(shù)造詣,尤其擅長于調(diào)經(jīng)、助孕、安胎。羅元愷教授根據(jù)《傅青主女科》定經(jīng)湯原方,結(jié)合多年的臨床經(jīng)驗而擬定的加味定經(jīng)丸(羅氏調(diào)經(jīng)種子丸),具有補腎、舒肝、健脾、調(diào)經(jīng)種子之功。主治月經(jīng)不調(diào)、先后無定期,或斷續(xù)不凈,以致難以受孕,亦治更年期綜合征。他在《羅元愷論醫(yī)集》論逍遙散、定經(jīng)湯等的沿革及其異同中,詳述了定經(jīng)湯在舒肝、健脾、養(yǎng)血、滋腎之中,比較著重于滋腎養(yǎng)血;他的經(jīng)水出諸腎的觀點,是根據(jù)《素問·上古天真論》論述月經(jīng)產(chǎn)生的機理而提出的。因腎精所化之氣為腎氣,腎氣盛而后天癸至,天癸至才有月經(jīng)來潮,故滋腎養(yǎng)血是調(diào)治月經(jīng)或通或閉的重要原則。當(dāng)然,月經(jīng)之定期來潮,還有賴肝、脾的共同協(xié)調(diào),但以腎水的充沛為根本,又以血為用事。故定經(jīng)湯從腎、肝、脾兼顧,以腎為重點治月經(jīng)失調(diào),是比較全面和有效的。腎為陰中之陰,位居下焦,故滋腎藥宜重。補可扶弱,重可鎮(zhèn)怯而直達(dá)下焦,以收水到渠成之效。羅氏調(diào)經(jīng)種子丸(原名加味定經(jīng)湯)是在定經(jīng)湯的基礎(chǔ)上,結(jié)合羅老自己的經(jīng)驗加減而成。方中菟絲子、熟地補腎益精,調(diào)補腎陰陽為君;當(dāng)歸、白芍、淮山養(yǎng)血滋腎助君為臣,柴胡、白芍疏肝養(yǎng)肝。諸藥合用,共奏滋腎補腎,疏肝健脾,調(diào)經(jīng)種子之功。3.3減少體質(zhì)細(xì)度、提高體質(zhì)量現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為黃體不健是由于下丘腦—垂體—卵巢功能失調(diào)所致。本課題的實驗部分采用腦內(nèi)多