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面粟粒性狼瘡32例臨床分析
水面上的狼傷口是一種罕見的疾病,容易混淆酒渣性炎和囊蟲性炎等疾病。目前,沒有具體的治療方法,病因不明。近年來,對本病的研究又傾向于其發(fā)病與T細胞介導的免疫反應有關。但是體液免疫有無參與發(fā)病,尚未見報道。CD20主要表達在未成熟的B細胞表面;CD45RA主要表達在B細胞和幼稚型T細胞表面;溶菌酶是一種非特異性免疫因子,在吞噬抗原的同時,可引起各種免疫反應。由于LMF皮損中以淋巴細胞浸潤為主,因此考慮這些細胞因子可能參與了病變的過程,筆者應用免疫組化法對32例LMF患者皮損中CD20,CD45RA和溶菌酶進行了檢測,現(xiàn)報告如下。1材料和方法1.1組織病理病例LMF病例來源于2000年1月~2003年9月本科門診就診者,共32例,均經臨床和組織病理確診。其中男21例,女11例,年齡18~65歲,平均29.78歲;病程1~12個月,平均5.96個月。所有患者近3個月內未接受任何免疫治療,且均無其他全身性疾病,亦無感染表現(xiàn)。對照組選取本院五官科15例手術患者的健康面部皮膚作為正常對照。1.2主試劑鼠抗人CD20單克隆抗體、鼠抗人CD45RA單克隆抗體、溶菌酶均購自北京中山生物技術有限公司。1.3百分率分值結果評定根據(jù)Shimizu法改良而成。陽性細胞染成棕黃色。著色范圍以陽性細胞數(shù)占總細胞數(shù)的百分率記分:<2%為0,2%~20%為1,21%~50%為2,≥51%為3;著色強度依據(jù)深淺記分:無著色為0,淺著色為1,深著色為2,上述兩項相加為著色程度積分:≤1.9為陰性(-),2.0~2.9為弱陽性(+),3.0~3.9為陽性(2+),≥4.0為強陽性(3+)。1.4顯色溫度和顯色效率免疫組化采用SP法,設PBS代替一抗為陰性對照,作為質量控制標準,并嚴格控制顯色時間和溫度,以排除因顯色時間長短或溫度高低而造成的顯色程度的不一致性;實驗結果按照等級資料的兩樣本比較進行秩和檢驗,比較兩組間CD20,CD45RA和溶菌酶的分布情況。以P<0.05為差異有顯著性,P<0.01為差異有非常顯著性。2cd20表達情況在32例LMF患者中強陽性4例,陽性7例,弱陽性17例,陰性4例。且CD20+淋巴細胞成團塊狀聚集。在伴有干酪樣壞死的皮損中CD20表達率降低,為陰性或弱陽性表達。在正常組中CD20無表達。見表1、圖1~3。在32例LMF患者中強陽性14例,陽性9例,弱陽性7例,陰性2例。且CD45RA+細胞成團塊狀聚集。在伴有干酪樣壞死的皮損中CD45RA的表達率較低,9例陽性表達,5例為弱陽性,2例為陰性,無強陽性表達。在正常組中未檢測出CD45RA。見表2、圖4~7。在LMF中溶菌酶強陽性為29例,陽性3例,弱陽性及陰性者均為0例;在正常組織中溶菌酶陽性1例,弱陽性1例,陰性13例。見表3、圖8,9。PBS代替一抗的陰性對照中未見陽性。3cd20表達動力學以前認為LMF與結核感染有關,但多數(shù)研究者未檢測到結核桿菌。近來有研究表明LMF與T細胞免疫有關,但B細胞有無參與本病發(fā)生,尚未見報道。B淋巴細胞具有兩種最基本的功能:第一,B細胞可作為免疫效應細胞直接參與免疫應答。第二,它可作為抗原遞呈細胞,有選擇的捕捉抗原,并將之遞呈給T淋巴細胞。CD20主要表達在未成熟的B細胞表面,并且CD20(Ca+通道亞單位)為B細胞活化信號傳導途徑。B細胞活化后其表面的CD20表達則下調。在本病中,CD20陽性B細胞表達較正常組織增高,說明B細胞也參與了LMF的發(fā)病過程。但筆者在本病的HE染色病理片中極少見到漿細胞浸潤。有研究報道,在LMF的晚期皮損中,主要在毛囊周圍有大量纖維素壞死,淋巴細胞、組織細胞、嗜中性粒細胞散在分布于纖維壞死區(qū),未見到漿細胞浸潤。因此推測B細胞可能在本病的發(fā)病過程中僅行使了遞呈抗原的功能。CD45RA是CD45的一種異構體。LMF中CD45RA陽性細胞可能既包括B細胞,也包括幼稚型T細胞。就其對B細胞產生抗體而言,CD45RA+T細胞的存在可抑制B細胞的活化。這也可能是在本病中僅見幼稚型B細胞的原因之一。溶菌酶被認為是一種原始的非特異性防御機制,尤其是針對感染因素。針對不同的感染因子,包括寄生蟲、深部真菌、分枝桿菌和其他一些微生物,引起細胞免疫和體液免疫,并且形成上皮細胞肉芽腫。實驗檢測到LMF皮損中溶菌酶強陽性,是否可以說明本病可能是一種由多因素(細菌尤其是分枝桿菌、寄生蟲等)引起的炎癥性肉芽腫。這進一步提示,LMF的發(fā)病可能與多種因素有
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