【犬用環(huán)丙沙星凝膠劑制備的實驗探究5000字（論文）】

犬用環(huán)丙沙星凝膠劑制備的實驗探究目錄TOC\o"1-2"\h\u4502摘要 19272關(guān)鍵詞：環(huán)丙沙星；凝膠劑；正交實驗 1218911前言 1307112材料與方法 2224782.1實驗器材與方法 2256362.2環(huán)丙沙星凝膠劑的制備 2305282.3凝膠劑的質(zhì)量檢測 488322.4凝膠劑檢測評分標(biāo)準(zhǔn) 431223結(jié)果與分析 53093.1環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)的選擇 5283063.2正交試驗結(jié)果 6228453.3藥敏試驗結(jié)果 7310184討論與結(jié)論 720743參考文獻(xiàn) 8摘要為了制備犬用環(huán)丙沙星凝膠劑，實驗采用正交試驗設(shè)計，以卡波姆-940、甘油、氮酮的用量為因素，以凝膠劑的外觀、黏稠度、涂展性和穩(wěn)定性、藥敏試驗結(jié)果為考查指標(biāo)，篩選環(huán)丙沙星凝膠劑主要基質(zhì)的最佳配比。結(jié)果表明，篩選得到的犬用環(huán)丙沙星凝膠劑的最佳配比為1%卡波姆940、0.3%主藥、5%甘油、6%氮酮。以此配方制備的環(huán)丙沙星凝膠劑色澤均勻，黏稠性及涂展性良好，穩(wěn)定性好，制備工藝簡單。關(guān)鍵詞：環(huán)丙沙星；凝膠劑；正交實驗1前言近幾年來，寵物犬和工作犬的飼養(yǎng)量隨著人們生活水平的提高而不斷增加。犬類與人類的接觸日益密切。其健康也受到寵物主人的重視。隨之而來各種疾病的發(fā)病率也迅速增加。犬類細(xì)菌性皮膚病是臨床上最常見的疾病之一，發(fā)病原因復(fù)雜，種類繁多。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)可得，引起細(xì)菌性皮膚病的常見致病菌有金黃色葡萄球菌、化膿性桿菌、奇異變形桿菌等[1]。臨床表現(xiàn)為皮膚表面出現(xiàn)膿包，甚至有滲出液，病灶表面被毛脫落等。動物常表現(xiàn)瘙癢，頻發(fā)抓撓患病部位。給寵物帶來了極大的痛苦。目前臨床上常采用軟膏劑、噴劑等外用制劑進(jìn)行治療。但軟膏劑涂布不均勻，容易污染犬類毛發(fā)。噴劑流動性大，藥效容易喪失[2]。其他外用制劑也因為劑型的原因存在一些缺點。而凝膠劑作為一種藥物新劑型，制備工藝簡易、易于使用、生物相容性良好、生物利用度高、吸收快、質(zhì)地均勻，能夠很好的克服犬類活動范圍廣，皮膚比較敏感的特點[3]。環(huán)丙沙星是第三代喹諾酮類抗生素，對于引起犬類細(xì)菌皮膚病的致病菌的最低抑菌濃度0.008-2毫克/毫升。顯著優(yōu)于其他同類藥物以及頭孢菌素等。主要用于敏感性致病菌引起的皮膚、軟組織感染和創(chuàng)傷感染等疾病。目前臨床上已經(jīng)存在人用鹽酸環(huán)丙沙星凝膠劑，但犬類皮膚和人皮膚結(jié)構(gòu)存在差異（主要是表皮層數(shù)的差異、皮膚ph值不同、汗腺分布不同、敏感性不同）。因此人用鹽酸環(huán)丙沙星凝膠劑不能直接用于犬類皮膚。本次課題將參考薛大全關(guān)于環(huán)丙沙星凝膠劑的制備方法，初定基礎(chǔ)配方比篩選卡波姆-940、羧甲基纖維素鈉，為確定基質(zhì)用量、丙三醇用量以及氮酮的用量，設(shè)計L9(34)正交試驗，選用基質(zhì)用量、丙三醇用量、氮酮的用量為正交試驗的因素，每個因素均有3個水平，并以環(huán)丙沙星凝膠劑的外觀性狀、穩(wěn)定性為評價指標(biāo)，優(yōu)選環(huán)丙沙星凝膠劑的最佳處方配比。2材料與方法2.1實驗器材與方法2.1.1實驗器材電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，購自上海精宏實驗設(shè)備有限公司;離心機(jī)，購自沈陽理化儀器廠;磁力攪拌器，購自常州市普達(dá)教學(xué)儀器有限公司;電子天平，購自上海精密科學(xué)儀器有限公司;冰箱，購自青島海爾股份有限公司;電子恒溫水浴鍋，購自余姚市亞星儀表有限公司;2.1.2試驗藥品環(huán)丙沙星;卡波姆940(CP－940)、羧甲基纖維素鈉(CMC－Na)、乙醇、三乙醇胺、甘油、尼泊金丙酯，氮酮，濃鹽酸均購自中國天津巴斯夫化工有限公司，試劑均為分析純。2.2環(huán)丙沙星凝膠劑的制備2.2.1環(huán)丙沙星凝膠劑的制備方法藥物均按處方量用電子天平稱取，先將卡波姆-940置于100ml小燒杯中，加約60ml蒸餾水?dāng)嚢枞苊涍^夜，得透明膠狀物。稱取處方量的環(huán)丙沙星于小燒杯中，用適量濃鹽酸攪拌溶解，備用。另稱取尼泊金丙酯于小燒杯中加適量無水乙醇溶解，加入溶脹好的凝膠劑基質(zhì)中。最后加入處方量的甘油、氮酮，充分?jǐn)嚢?，使藥液混合均勻，最后添加蒸餾水至約90ml,充分?jǐn)嚢璧耐瑫r,滴加三乙醇胺適量,攪拌均勻使成凝膠狀,最后補(bǔ)加蒸餾水至100ml[6]。2.2.2環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)的選擇初定基質(zhì)和基礎(chǔ)配方比：環(huán)丙沙星0.3%，基質(zhì)1%，甘油5%，氮酮4%。按照上述環(huán)丙沙星凝膠劑的制備方法制備凝膠劑，并以環(huán)丙沙星凝膠劑的外觀，涂展性，黏稠性，穩(wěn)定性為考察指標(biāo)，篩選合適的環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)。2.2.3正交試驗設(shè)計根據(jù)單因素試驗結(jié)果，選擇合適的凝膠劑基質(zhì)，采用正交試驗進(jìn)一步優(yōu)化制備工藝，以凝膠劑的外觀和制劑的穩(wěn)定性作為考察指標(biāo)，考察影響凝膠劑成型的3個主要因素:基質(zhì)濃度(A)、丙三醇用量(B)、氮酮用量(C)，每個因素選擇3個水平，按L9(34)安排正交試驗，因素水平見表1。按表1中各個因素和水平條件制備凝膠劑，每個實驗條件平行重復(fù)3次，分別對凝膠劑的外觀性狀、涂展性、均勻性以及，穩(wěn)定性進(jìn)行綜合評分[8]。表1各因素水平對比%水平因素(A)卡波姆-940(B）丙三醇（C）氮酮10.5522110431.5156按照上述環(huán)丙沙星凝膠劑的制備方法，參照表2中CP-940用量、丙三醇用量以及氮酮用量，對環(huán)丙沙星凝膠劑進(jìn)行制備，其中每個因素有3個水平，觀察外觀性狀并檢測其穩(wěn)定性。表2環(huán)丙沙星凝膠劑處方優(yōu)化正交試驗因素水平表%試驗號因素(A)卡波姆-940(B)丙三醇(C)氮酮10.55220.510430.51564110651152615471.515481.55691.51022.3凝膠劑的質(zhì)量檢測2.3.1環(huán)丙沙星凝膠劑的穩(wěn)定性檢測(1)離心試驗：將所測樣品以3000r/min,離心30min后取樣觀察,觀察樣品外觀是否均勻,有無分層和滲水現(xiàn)象。(2)耐熱試驗：取實驗制備的環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)放入55℃的電子恒溫水浴鍋中2小時，恢復(fù)室溫后觀察凝膠劑有無分層、滲水現(xiàn)象。(3)耐寒實驗：取環(huán)丙沙星凝膠劑置于4℃冰箱中，分別于第0、5、10天取樣，考察凝膠劑的性狀、均勻性、穩(wěn)定性。(4)長期試驗：在溫度25℃±2℃、相對濕度60%±10%的條件下，將環(huán)丙沙星凝膠劑保存一周以上，并觀察外觀變化。2.3.2環(huán)丙沙星凝膠劑的藥效檢測(1)藥敏試驗：將引起犬類細(xì)菌皮膚病的主要致病菌金黃色葡萄球菌接種于普通瓊脂培養(yǎng)基中，同時將浸有環(huán)丙沙星凝膠劑的紙片用無菌手術(shù)鑷小心加放在培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24小時后，用游標(biāo)卡尺測量試紙周圍抑菌圈直徑，并記錄結(jié)果[4]。2.4凝膠劑檢測評分標(biāo)準(zhǔn)采用綜合評分法，依照上述實驗結(jié)果，參考《中國藥典》2010年版一部附錄凝膠劑下有關(guān)規(guī)定：凝膠劑應(yīng)均勻、細(xì)膩，在常溫時保持凝膠狀，不干涸或液化。以凝膠劑的外觀性狀和穩(wěn)定性為綜合評分考察指標(biāo)，使凝膠劑的質(zhì)量控制更加全面。表3凝膠劑檢測評分標(biāo)準(zhǔn)考察指標(biāo)評分標(biāo)準(zhǔn)分?jǐn)?shù)外觀性狀乳白色、半透明半固體1顏色渾濁、透明性不佳0.5顏色十分渾濁0均勻性整體均勻，無較大顆粒、團(tuán)塊、氣泡2有少量顆粒、團(tuán)塊、氣泡1有大量顆粒、團(tuán)塊、氣泡0涂展性有彈性，容易涂抹1彈性欠佳，稍難涂抹0.5難以均勻涂抹0耐熱穩(wěn)定性無分層或滲水現(xiàn)象1有分層或滲水現(xiàn)象0.5有嚴(yán)重分層或滲水現(xiàn)象0耐寒穩(wěn)定性無分層或滲水現(xiàn)象1有分層或滲水現(xiàn)象0.5有嚴(yán)重分層或滲水現(xiàn)象0離心實驗無分層或滲水現(xiàn)象2有分層或滲水現(xiàn)象1有嚴(yán)重分層或滲水現(xiàn)象0放置試驗無分層或滲水現(xiàn)象2有分層或滲水現(xiàn)象1有嚴(yán)重分層或滲水現(xiàn)象03結(jié)果與分析3.1環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)的選擇根據(jù)單因素實驗結(jié)果，CP-940配制的凝膠劑粘附性強(qiáng)、涂展性好，成型性好。且有文獻(xiàn)報道卡波姆還有一定的促滲作用，而用羧甲基纖維素鈉制成的凝膠劑流動性強(qiáng)，需要加大劑量或加入其他輔料才能改善。穩(wěn)定性不如卡波姆制成的凝膠劑，因此選用卡波姆-940作為環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)。不同基質(zhì)對于凝膠劑成型的影響見下表。表4基質(zhì)的選擇基質(zhì)外觀檢查穩(wěn)定性檢查形態(tài)涂展性均勻性耐熱試驗?zāi)秃畬嶒炿x心實驗放置試驗卡波姆-940乳白色凝膠容易涂抹整體均勻細(xì)膩無分層現(xiàn)象無分層現(xiàn)象無分層現(xiàn)象無分層現(xiàn)象羧甲基纖維素鈉乳白色凝膠稍難涂抹有少量顆粒有分層現(xiàn)象有分層現(xiàn)象有分層現(xiàn)象無分層現(xiàn)象3.2正交試驗結(jié)果參照環(huán)丙沙星凝膠劑的制備方法按照表2的處方比例制備凝膠劑，再根據(jù)表3的評分標(biāo)準(zhǔn)對上述已經(jīng)制備好的環(huán)丙沙星凝膠劑進(jìn)行質(zhì)量考察，平行實驗多次評分并計算其平均分。其評分結(jié)果如表5所示。從下表中我們可以看出，在正交試驗所得的9組樣品中其綜合評分最高的是4號樣品，綜合評分最低的是2號樣品。R為極差，極差R的值越大，對實驗的結(jié)果影響程度越大。所以，從R值的大小可以判斷出對環(huán)丙沙星凝膠質(zhì)量的影響因素的大小，影響最大的是因素（B)丙三醇的用量，因素A和因素C的加入對凝膠劑的綜合評分有影響但影響不大。K為平均值，根據(jù)K值的大小可以判斷出哪個水平的處方制得的凝膠質(zhì)量較好。評分結(jié)果越高說明凝膠的處方相對也越好。所以，要求所對應(yīng)的K值越大越好。也即是說，正交試驗中3個因素的優(yōu)先順序為凝膠劑中丙三醇的含量>凝膠劑中卡波姆-940的含量>氮酮的用量。綜上所述，環(huán)丙沙星凝膠劑的最佳處方配比為A2B1C2即卡波姆-9401%,丙三醇5%，氮酮6%。表5正交試驗結(jié)果試驗號因素綜合評分(A)卡波姆-940（%）(B)丙三醇（%）(C)氮酮（%）10.5526.520.51066.230.51546.841568.2511047.3611527.071.5548.081.51026.591.51567.5K16.5007.5676.6677.100K27.5006.6677.3007.067K37.3337.1007.3677.167R0.8330.9000.7000.1003.3藥敏試驗結(jié)果以藥敏圈的直徑為判定標(biāo)準(zhǔn)，>21mm為高度敏感，>16-20mm為中度敏感，<15mm為耐藥。環(huán)丙沙星凝膠劑對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為22mm，說明金黃色葡萄球菌對環(huán)丙沙星高度敏感,表明制成的環(huán)丙沙星凝膠劑具有一定的臨床應(yīng)用意義，有明顯的抑制致病性細(xì)菌的作用。4討論與結(jié)論環(huán)丙沙星是第三代喹諾酮類藥物；其抗菌活性是目前廣泛應(yīng)用的氟喹諾酮類中最強(qiáng)者?，F(xiàn)一般認(rèn)為喹諾酮類作用于細(xì)菌細(xì)胞DNA螺旋酶的A亞單位，抑制DNA的合成和復(fù)制而導(dǎo)致細(xì)菌死亡。除對革蘭陰性桿菌有高度抗菌活性外，尚對葡萄球菌屬具有良好抗菌作用。凝膠劑作為一種新型制劑，已成為目前國內(nèi)外制劑領(lǐng)域研究的熱點。具有黏附性好、制備工藝簡單、易于使用、不污染犬類毛發(fā)。本課題在薛大權(quán)所作關(guān)于環(huán)丙沙星凝膠劑的配方比：環(huán)丙沙星0.3g,聚羧乙烯9410.5g,乙醇3g,甘油5g,0.1g,三乙醇胺適量,蒸餾水加至100g的基礎(chǔ)上[7]，通過正交試驗探究犬用環(huán)丙沙星凝膠劑制劑成型的最佳處方比例，并對制備出的凝膠劑進(jìn)行質(zhì)量考察。在單因素試驗中，對凝膠劑基質(zhì)卡姆波-940和羧甲基纖維素鈉進(jìn)行篩選，試驗結(jié)果表明，羧甲基纖維素鈉雖涂展性、均勻性等外觀性狀較好，但穩(wěn)定性不佳，離心或耐熱實驗后有滲水或分層現(xiàn)象，而卡波姆-940制成的凝膠劑涂展性好、黏附性強(qiáng)、離心或者耐熱耐寒試驗無分層或滲水現(xiàn)象、藥物在皮膚的滯留時間長。因此選擇卡波姆-940作為環(huán)丙沙星凝膠劑基質(zhì)。甘油作為外用制劑中最常用的保濕劑，其用量通常介于5%~15%之間。甘油的保濕效果良好，對皮膚的刺激性較小，因此選擇甘油作為本制劑的保濕劑[5]。凝膠劑需透過皮膚或黏膜的吸收才能發(fā)揮作用，但是皮膚角質(zhì)層作為天然的生理屏障,能阻礙藥物進(jìn)入體內(nèi)，因此大多數(shù)藥物經(jīng)皮滲透率低，不易吸收，為了使藥物透過皮膚達(dá)到治療目的，并維持血藥濃度長時間相對穩(wěn)定，所以需要在凝膠劑中添加適宜的促皮滲透劑改善藥物本身分子量大、極性高、水溶性大等不易吸收的特性。促進(jìn)藥物經(jīng)皮滲透并達(dá)到治療所需的血藥濃度。由于犬類皮膚結(jié)構(gòu)與人皮膚結(jié)構(gòu)存在差異，原配方中乙醇作為促滲劑對于犬類皮膚有一定的刺激性，容易引起過敏、瘙癢、抓撓患病部位而使藥效喪失。所以本次課題摒棄了一般外用制劑中乙醇作為滲透劑，而采用氮酮。氮酮作為市面上最常用的促皮滲透劑，應(yīng)用范圍較廣，無毒無害、安全性高，有利于親水性凝膠劑的滲透。能夠避免肝臟首過作用，充分發(fā)揮凝膠劑釋藥快的特性。經(jīng)正交試驗探究，犬用環(huán)丙沙星凝膠劑的最終配比為:1%卡波姆940、0.3%環(huán)丙沙星、0.1%尼泊金丙酯、5%甘油、6%氮酮，用適量三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值至7左右。對確定最佳處方配比的環(huán)丙沙星凝膠劑進(jìn)行制備并通過對凝膠劑穩(wěn)定性、刺激性等的考查，本制劑的外觀性狀穩(wěn)定，質(zhì)地均勻細(xì)膩，涂展性好，綜合得分為8.2分。研究結(jié)果表明與正交試驗結(jié)果相似，確定該凝膠劑制備方法可行，且該處方比重復(fù)性較好、可行性強(qiáng)。希望實驗篩選出的處方可以為犬用環(huán)丙沙星凝膠劑的進(jìn)一步研究提供一定的方法和依據(jù)。參考文獻(xiàn)薛占永.北京地區(qū)犬細(xì)菌性皮膚病主要病原菌(需氧與兼性厭氧)的分離鑒定與藥敏試驗[A].中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)外科學(xué)分會、中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會小動物醫(yī)學(xué)分會.全國獸醫(yī)外科學(xué)第13次學(xué)術(shù)研討會、小動物醫(yī)學(xué)第1次學(xué)術(shù)研討會暨奶牛疾病第3次學(xué)術(shù)討論會論文集[C].中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)外科學(xué)分會、中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會小動物醫(yī)學(xué)分會:,2006:4.周彤.復(fù)方紫草凝膠劑的制備與研究[D].天津工業(yè)大學(xué),2017.張寧,徐艷明,