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技術(shù)支持|瀏覽次數(shù):416|時間:-2-PriCells-免疫熒光技術(shù)technique)免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC):FITC異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性與蛋白質(zhì)結(jié)合力等方面都更優(yōu)良。FITC389.4,490~495nm,520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC570nm,595~600nm,呈現(xiàn)橘紅色熒光。(tetramethylrhodamineisothiocynate,TRITC):TRITC620nm,F(xiàn)ITC3(Eu3)、鋱(藻紅蛋白(P-phycoerythrin,PE):PE564nm,488nm576nm,對于多甲藻葉綠素蛋白35kD,490nm488nm677nm。FL3PerCP。碘化丙啶(propidiumiodide,PI):可選擇性地嵌入核酸DNA、RNA)DNARNaseRNADNA488nmFITC:黃色結(jié)晶粉末,吸取光:490~495nm,520~530nm,TRITC:550nm,620nm,o鑭系:Eu、PE:490~560nm,595nm,紅色熒光HRPHPA二聚體便形成含有強(qiáng)熒光的物質(zhì)。例如,4-甲基傘酮-β-Dβ-半乳4450nm。其它如堿性磷酸酶的底物4根過氧化物酶的底物對羥基苯乙酸等。鑭系螯合物某些3含有與蛋白質(zhì)形成共價鍵的化學(xué)基團(tuán)熒光效率高,標(biāo)記后下降不明顯熒光色澤與背景色澤對比鮮明標(biāo)記辦法簡樸、快速CDC抗原的細(xì)胞,未損傷,不染色,為陰性反映。二.實驗環(huán)節(jié)1.PBS5%PBS3-0-10%可疑陽性反映(±)11-20%21-50%陽性反映(++)死細(xì)胞占51-80%81-100%性反映。闡明CDC驗必須要有抗原、抗體、補(bǔ)體共同參加。②.第②構(gòu)成陰性的因素:實驗中加入抗體、LC。由于無抗原和補(bǔ),呈陰性反映。闡明CDC實驗必須要有補(bǔ)體的參加LC,既無抗原抗體免疫復(fù)合CDC類反映稱為凝集反映(agglutination)ug/mlγIg術(shù)3H、51Cr、32P、125I、HRP、1行。缺點:每檢查一種抗原必須制備對應(yīng)的熒光抗體。2性熒光容易增多。3(二)流式細(xì)胞術(shù)DNA、RNA、蛋白質(zhì)和細(xì)胞體積等)進(jìn)行多(三
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