凱氏定氮儀原理及操作步驟

凱氏定氮儀原理及操作步驟凱氏定氮儀原理：蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)含量。有機(jī)物中的胺根在強(qiáng)熱和CuSO4H2SO4(NH4)2SO4反響式為：2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04(其中CuSO4在凱氏定氮器中與堿作用，通過蒸餾釋放出NH3，收集于H3BO3溶液中反響式為:(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2OH2SO4HCIHCI量計算出氮的含量，然后乘以相應(yīng)的換算因子，既得蛋白質(zhì)的含量反響式為：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3凱氏定氮儀操作步驟：(一)消化1.0mL，樣品要加到燒瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次參加硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g，濃硫酸2.0mL，30%1.0mL。4、5、61.0mL1、2、32、將加好試劑的各燒瓶放置消化架上，接好抽氣裝置。先用微火加熱煮沸，此時燒瓶內(nèi)物質(zhì)炭化變黑，并產(chǎn)生大量泡沫，務(wù)必留意防止氣泡沖出管口。待泡沫消逝停頓產(chǎn)生后，加大火力，保持瓶內(nèi)液體微沸，至溶液澄清后，再連續(xù)加熱使消化液微沸15min。在消化品完全消化。消化時放出的氣體內(nèi)含SO2，具有猛烈刺激性，因此自風(fēng)櫥中進(jìn)展。消化完全后，關(guān)閉火焰，使燒瓶冷卻至室溫。(二)蒸餾和吸取蒸餾和吸取是在微量凱氏定氮儀內(nèi)進(jìn)展的。凱氏定氮蒸餾裝1、儀器的洗滌儀器安裝前，各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管、塞10%NaOH10min10min，再水洗數(shù)次，然后安裝并固定在一只鐵架臺上。儀器使用前，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌，以除去管道5min可。較長時間未使用的儀器，重復(fù)蒸氣洗滌，不得少于三次，并檢查儀器是否正常。認(rèn)真檢查各個連接處，保證不漏氣。2/3入反響室，但玻杯內(nèi)的水不要放光，塞上棒狀玻塞，保持水封，防止漏氣。蒸氣發(fā)生后，馬上關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān)，使蒸氣只能進(jìn)入定氮球進(jìn)入冷凝管冷卻，在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發(fā)燙開頭計時，連續(xù)蒸煮5min，然后移開煤氣燈。沖洗完2～3混合液的錐形瓶使冷凝管下口完全浸沒在溶液中，蒸餾1～2min，觀看1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝器下口，關(guān)閉煤氣燈，儀器即可供測樣品使用。2、無機(jī)氮標(biāo)準(zhǔn)樣品的蒸餾吸取由于定氮操作繁瑣，為了生疏蒸餾和滴定的操作技術(shù)，初學(xué)定。常用巳知濃度的標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨測試三次。甲基藍(lán)-甲基紅混合指示劑(呈紫紅色)3～4中一只錐形瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸沒在溶液中。2mL310mL30％NaOH流入蒸餾瓶中，在堿液尚未完全流入時，將棒狀玻塞蓋緊。向小玻5mL錐形瓶中的硼酸-指示劑混合液由于吸取了氨，由紫紅色變成綠色。3～5min，移動錐形瓶使瓶內(nèi)液面離開冷凝管下口約lcm，并用少量蒸餾水沖洗冷凝管下口，再連續(xù)蒸餾1min，移開錐形瓶，蓋好，預(yù)備滴定。在一次蒸餾完畢后，移去煤氣燈，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器間的橡膠管，排解反響完畢的廢液，用水沖洗小玻杯幾次，并將廢液排解。如此反復(fù)沖洗干凈后，即可進(jìn)展下一個樣品的蒸餾。按以上方2mL測定二次。將各次蒸餾的錐形瓶一起滴定。3、未知樣品及空白的蒸餾吸取收。5mL33mL，洗滌液一并倒入反響室內(nèi)。其余操作按標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨的蒸餾進(jìn)展。由于消化液內(nèi)硫酸鉀濃度高而呈粘稠狀，不易從凱氏燒瓶內(nèi)倒出，必需參加熱蒸餾水5mL解，趁熱參加玻杯，使其流入反響室。此外，還應(yīng)當(dāng)留意趁儀器洗滌管道簡潔析出結(jié)晶，造成堵塞。(三)凱氏定氮儀滴定樣品和空白蒸餾完畢后，一起進(jìn)展滴定。0.0100mol/L滴，振搖觀看瓶內(nèi)溶液顏色變化，暗灰色在一二分鐘內(nèi)不變，當(dāng)視為到達(dá)滴定終點(diǎn)。假設(shè)呈粉紅色