中藥復(fù)方灰兜巴對(duì)糖尿病小鼠模型糖代謝的影響

中藥復(fù)方灰兜巴對(duì)糖尿病小鼠模型糖代謝的影響

糖尿病是一種常見的慢性代謝性疾病。據(jù)現(xiàn)有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，中國(guó)有大約5600名糖尿病患者，每年增長(zhǎng)約200萬(wàn)。糖尿病已成為影響人類健康的第三類非感染性疾病。尋找有效的治療方法尤為重要。中藥灰袋巴已經(jīng)在流行于糖尿病的治療中已經(jīng)使用了數(shù)百年，但它對(duì)糖尿病的治療效果沒有得到科學(xué)的驗(yàn)證。因此，通過建立糖尿病動(dòng)物模型，我們觀察到了中藥復(fù)方灰袋巴對(duì)血糖、體重、糖持久和尿量的影響，以及中藥復(fù)方灰袋巴對(duì)糖尿病的影響。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供SPF級(jí)昆明種小鼠,雌雄各半,由中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證編號(hào):SLAC.KMNo.00030001SPF級(jí)SD大鼠,雌雄各半,由中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證編號(hào):SLAC.SDNo.00040021.1.2試劑和培養(yǎng)基中藥復(fù)方灰兜巴由西南民族大學(xué)藥理實(shí)驗(yàn)室提供;四氧嘧啶、鏈脲佐菌素購(gòu)自Sigma-Aldrich公司;GenuineONETOUCH?血糖試紙購(gòu)自強(qiáng)生公司;糖尿樂膠囊購(gòu)自河南輔仁堂制藥有限公司.酸度計(jì)(METTLERTOLEDO公司,美國(guó));Millipore-Q超純水系統(tǒng)(Millipore公司,美國(guó));強(qiáng)生OneTouch?穩(wěn)捷基礎(chǔ)型血糖儀(強(qiáng)生公司,美國(guó))1.3方法1.3.1糖尿病模型動(dòng)物的制備取體重在23~33g的昆明小鼠,雌雄各半.造模前禁食16小時(shí)(自由飲水)后腹腔注射四氧嘧啶160mg/kg取體重在200~250g的SD大鼠,雌雄各半.造模前禁食12小時(shí)(自由飲水)后腹腔注射鏈脲佐菌素70mg/kg注射72小時(shí)后,禁食6h,斷尾取血測(cè)定各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血糖,取血糖值大于11.1mmol/L者作為糖尿病模型動(dòng)物.1.3.2各組和給藥、糖凝膠電泳取已成模的小鼠(血糖值≥11.1mmol/L)60只,分成陽(yáng)性對(duì)照組、小、中、高劑量組、模型組和預(yù)防組,每組10只,按照小劑量組30mg/ml、中劑量組80mg/ml、高劑量組130mg/ml每日3次,每次1ml灌胃給予中藥復(fù)方灰兜巴治療,陽(yáng)性對(duì)照組按照糖尿樂的用藥說明,換算成小鼠劑量灌胃給藥,正常對(duì)照組和模型組不予治療.各組連續(xù)給藥15天,分別于第7天、第15天禁食6h后用血糖儀斷尾采血測(cè)定血糖及體重.糖耐量實(shí)驗(yàn)在成模后第10天禁食8h后,取對(duì)照組、模型組、小、中、高劑量組各10只,按照3g/kg的劑量,灌胃給予50%的葡萄糖,并用血糖儀斷尾取血的方法,記錄0min(灌胃前)、30min、60min和120min的血糖值.1.3.3中藥復(fù)方灰兜底巴治療取已成模的大鼠40只,分成對(duì)照組、小、中、高劑量組和模型組,每組8只,按照小劑量組30mg/ml、中劑量組80mg/ml和高劑量組130mg/ml每日3次,每次2ml灌胃給予中藥復(fù)方灰兜巴治療,記錄各組大鼠入組、成模后第七天及治療后第15天在24小時(shí)內(nèi)的尿量,并計(jì)算尿量增長(zhǎng)率.2結(jié)果2.1各組隨機(jī)血糖、糖耐量、隨機(jī)血糖的比較實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過中藥復(fù)方灰兜巴治療15天后,陽(yáng)性對(duì)照組、預(yù)防組、小劑量組和中劑量組的隨機(jī)高血糖顯著低于模型組(P<0.001),實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1.在控制體重減輕上,小劑量組、中劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組的體重均高于模型組(P<0.05),見表2.糖耐量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表3,2.2表4顯示了中藥和灰袋巴對(duì)糖尿病大鼠模型尿量的影響3糖尿病模型大鼠血糖控制效果血糖是糖尿病臨床診斷的一個(gè)主要指標(biāo),在實(shí)驗(yàn)過程中,治療組灌胃給予中藥復(fù)方灰兜巴15天后,各實(shí)驗(yàn)組的隨機(jī)高血糖值均有所下降,陽(yáng)性對(duì)照組、預(yù)防組、小劑量組和中劑量組的隨機(jī)高血糖顯著低于模型組(P<0.001),高劑量組的隨機(jī)高血糖低于小劑量組和中劑量組(P<0.05),陽(yáng)性對(duì)照組與高劑量組無顯著差別(P=0.051),高劑量組的治療效果也優(yōu)于小劑量組和中劑量組(P<0.05),高劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組無顯著性差別(P=0.051),說明采用糖尿樂膠囊的陽(yáng)性對(duì)照組和高劑量組在血糖控制上具有近似相同的效果,各治療組的血糖值均得到很好的控制.糖尿病典型的臨床表現(xiàn)為“三多一少”,即多飲、多食、多尿和體重減輕,各實(shí)驗(yàn)組經(jīng)治療后,小劑量組、中劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組的體重均高于模型組(P<0.05),高劑量組的體重高于小劑量組(P<0.05),但與中劑量組(P=0.492)和陽(yáng)性對(duì)照組(P=0.346)相比無顯著差異,模型組的體重則進(jìn)行性下降,說明在對(duì)糖尿病小鼠體重減輕程度的控制上,中劑量組為最佳的有效劑量,與市售的陽(yáng)性對(duì)照藥相比,也達(dá)到了近似的效果.糖尿病模型大鼠的尿量增加經(jīng)治療后也有一定程度的控制,中劑量組大鼠7到14天的尿量增長(zhǎng)率與入組到第7天相比,從23.60%下降到-0.4%,出現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng),高劑量組也從20.08%下降到2.25%,接近正常對(duì)照組2.80%的正常增長(zhǎng)率除對(duì)照組外,各組增長(zhǎng)率B與模型組相比,均小于模型組(P<0.05).糖耐量試驗(yàn)是一種葡萄糖負(fù)荷試驗(yàn),目的是了解胰島β細(xì)胞功能和機(jī)體對(duì)糖的調(diào)節(jié)能力.當(dāng)胰島β細(xì)胞功能正常時(shí),機(jī)體在進(jìn)食糖類物質(zhì)后,通過調(diào)節(jié)機(jī)制在2h~3h內(nèi)可恢復(fù)到正常血糖水平,此為耐糖現(xiàn)象.通過對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn),高劑量組與中劑量組在30min、60min和120min均低于模型組(P<0.05),高劑量組的餐前平均高血糖為11.11mmol/L;餐后120min平均高血糖為11.73mmol/L,血糖基本可以維持平穩(wěn)