04PCT測定試劑盒(熒光免疫層析法)工藝規(guī)程

04.PCT測定試劑盒(熒光免疫層析法)工藝規(guī)程04.PCT測定試劑盒(熒光免疫層析法)工藝規(guī)程10編制人： 日期： 年 日

審核人： 日期: 年 月 日批準(zhǔn)人： 日期： 年 月生效日期： 年 月日頒發(fā)部門： 質(zhì)量部分發(fā)部門: 受控編號:

日頒發(fā)份數(shù)： 2 份降鈣素原〔PCT〕測定試劑盒(熒光免疫層析法〕1。產(chǎn)品名稱、劑型、注冊分類、規(guī)格、定義、組成及用途中文名稱：降鈣素原(PCT〕測定試劑盒〔熒光免疫層析法〕規(guī) 格：25人份/盒、40人份/盒劑 型：診斷試劑6840檢測原理來體外定量測定人血清、血漿樣本中降鈣素原〔PCT〕的含量。依據(jù)：《降鈣素原〔PCT〕測定試劑盒〔熒光免疫層析法〕產(chǎn)品技術(shù)要求》目 錄生產(chǎn)工藝流程圖試劑卡制備生產(chǎn)工藝質(zhì)量掌握點(diǎn)主要原輔料、包裝材料消耗定額、能源消耗定額、物料平衡的計(jì)算方法包裝要求、標(biāo)簽、說明書(附樣本)與產(chǎn)品貯存方法及有效期設(shè)備一覽表技術(shù)安全及勞動保護(hù)PCT.羊抗兔IgG抗體

化學(xué)試劑 抗體

試劑

化學(xué)試劑

兔IgG抗體微球偶聯(lián)物鼠抗人PCT

化學(xué)試劑十萬 級 〔C線〕. 潔凈區(qū)

包被液配制〔T線〕

樣品墊處理液配制

探針稀釋液配制 樣本稀釋液配制探針配制.樣品墊處理劃線〔NC〕

樣品墊制作 #★十萬級潔 枯燥凈 NC膜枯燥#★ 貼膜組裝 環(huán)境區(qū) #

分裝★不合格不合格品掌握 半成品檢驗(yàn)合切條 格干十 燥萬 環(huán)級潔 壓卡裝袋 境凈 #區(qū)不合格半成品檢驗(yàn) 不合格品掌握合格萬級凈潔 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 燒數(shù)據(jù)卡 半成品檢驗(yàn) 合格 貼簽、組裝凈區(qū)不合格不合格品掌握成品檢驗(yàn)

不合格品掌握★：關(guān)鍵工序

：質(zhì)量掌握點(diǎn) 合格#：濕度≤30%入庫.試劑卡制備生產(chǎn)工藝2。12。22.32。42。52.62。72.8〔PCT〕測定試劑盒(熒光免疫層析法〕試劑盒組裝2.1工序一:樣品墊制作2。1。1探針稀釋液2。1.1。1標(biāo)準(zhǔn)配方名稱探針稀釋液

物料名稱三羥甲基氨基甲烷

配制1000ml使用量2。4228g

75人份使用量調(diào)整PH=8.4±0.2蔗糖牛血清白蛋白吐溫-20Proclin300

150g5g5ml0.3ml

0.12ml純化水定容至1000ml2。1。1.2配制方法依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)配方準(zhǔn)確稱取三羥甲基氨基甲烷2。4228g800ml,放入1個(gè)干凈PH值應(yīng)在8。4±0。2范圍內(nèi)，再依次參加蔗糖150g、牛血清白蛋白5g、吐溫—205ml、Proclin3000。3ml,置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后,將溶液緩緩倒入容積為1000ml3次燒杯,全部溶液倒入上述容量瓶中,用純化水定容至1000ml.混合均勻4~30℃保存?zhèn)溆?有效期7天。。2樣品墊處理液2.1.2。1標(biāo)準(zhǔn)配方名稱物料名稱配制1000ml使用量75人份使用量樣品墊處理液十二水合磷酸氫二鈉5.73g二水合磷酸二氫鈉0。62g40ml調(diào)整PH=7.4±0。2純化水定容至1000ml2.1.2.2配制方法依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)配方分別準(zhǔn)確稱取十二水合磷酸氫二鈉573g0.62g，放入干凈燒杯中，加純化水800ml，放入1個(gè)干凈的磁力攪拌子，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，使用多參數(shù)測試儀測量PH值應(yīng)在7.4±0.2pH的溶液緩緩倒入容積為1000ml的容量瓶中,用純化水反復(fù)沖洗31000ml,混合均勻4～30℃保存?zhèn)溆?，有效?天。2。1。3樣品墊制作樣品墊處理〔1〕將玻璃纖維平鋪到水平槽內(nèi),倒入足量樣品墊處理液，應(yīng)讓玻璃纖維完全浸泡入樣品墊處理液中；(2〕浸泡至少15分鐘，保證玻璃纖維完全浸透,玻璃纖維外表無氣泡；玻璃纖維浸透后，將玻璃纖維取出，45度恒溫枯燥4—6小時(shí)；枯燥完成后4～30℃封存?zhèn)溆茫行?天。2。1。3.2樣品墊制作(1〕處理后的樣品墊裁切成29mm寬度;〔2〕兔IgG抗體微球偶聯(lián)物：鼠抗人NT抗體微球偶聯(lián)物：探針稀釋液=1:3:20的比例配制探針溶液;(3〕按4μl/cm噴量,將配制好的探針溶液均勻噴點(diǎn)到已裁切的樣品墊上?！?)在45度恒溫枯燥、濕度小于30％的環(huán)境下枯燥4-6小時(shí).注：枯燥濕度的掌握是本崗位的工藝要點(diǎn)之一，濕度應(yīng)掌握在30%以下?！?)枯燥完成后4~30℃封存?zhèn)溆?，有效?4個(gè)月。注：枯燥后應(yīng)避開長時(shí)間放置于4～30℃環(huán)境。工序二：ＮＣ膜制備2.2。1包被液。1標(biāo)準(zhǔn)配方名稱物料名稱配制1000ml使用量 75人份使用量包被液磷酸氫二鉀二水合磷酸二氫鈉氯化鈉1.82g0.22g8.76g2。2.1。2配制方法

調(diào)整PH=7。2±0.2蔗糖 30g純化水定容至1000ml

0。06ml依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)配方分別準(zhǔn)確稱取磷酸氫二鉀1.82g、二水合磷酸二氫鈉0。22g、氯化鈉8.76g，放入干凈燒杯中，加純化水800ml，放入1個(gè)干凈的磁力攪拌子,置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，使用多參數(shù)測試儀測量PH值應(yīng)在7。2±0.2范圍內(nèi)，再參加蔗糖30g，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，將充分溶解并調(diào)好pH的溶液緩緩倒入容積為1000ml3次燒杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用純化水定容至1000ml，混合均勻4～30℃保存?zhèn)溆?有效期7天。2。2.2C線包被液使用包被液將羊抗兔IgG抗體稀釋成終濃度為1mg/ml.充分混合后保存?zhèn)溆?。注：現(xiàn)用現(xiàn)配2。2.3T線包被液使用包被液將鼠抗人PCT抗體稀釋成終濃度為1mg/ml。充分混合后保存?zhèn)溆谩Ｗⅲ含F(xiàn)用現(xiàn)配NC膜劃線PVCPVC25mm，沿上面保護(hù)紙的下邊緣，將硝酸纖維素膜〔NC〕貼在該區(qū)；注:1.粘貼上下邊緣與相鄰區(qū)上下邊緣齊平；粘貼時(shí)留意動作輕柔,避開用手直接按壓硝酸纖維素膜〔NC膜〕表面。27mmPVC25mm2mm掩蓋硝酸纖維素膜〔NC膜)；上邊緣與底板邊緣齊平。1μl/cm包被量將CTNC(4)C、TCNC10mm，CT6mm，TNC9mm。注:1、貼膜和包被過程應(yīng)留意避開膜的污染。2、劃線時(shí)的濕度條件是NC45％～65%.3CT〔NC〕平衡至一樣溫度。。5NC6小時(shí)。枯燥完成后封存?zhèn)溆?，有效?4個(gè)月。注:1、枯燥時(shí)，濕度的掌握是本崗位的工藝要點(diǎn)之一，濕度應(yīng)掌握在≤30%?？菰锖髴?yīng)避開長時(shí)間4～30℃環(huán)境。工序三：樣本稀釋液制備標(biāo)準(zhǔn)配方名稱 物料名稱磷酸氫二鉀樣本稀釋液樣本稀釋液PH7.4±0.2S910gProclin3000.3ml2。3.2配制方法牛血清白蛋白5g

配制1000ml使用量1.82g0。22g8.76g

75人份使用量22。5ml依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)配方分別準(zhǔn)確稱取磷酸氫二鉀1.82g、二水合磷酸二氫鈉0.22g、氯化鈉8。76g,放入干凈燒杯中，加純化水800ml,放入1個(gè)干凈的磁力攪拌子，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，使用多參數(shù)測試儀測量PH值應(yīng)在7.4±0.2范圍內(nèi)，再依次參加S910g、Proclin3000.3ml、牛血清白蛋白5g，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，將溶液緩緩倒入容積為1000ml的容量瓶中，用純化水反復(fù)沖洗3次燒杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用純化水定容至1000ml,混合均勻后4-30℃保存?zhèn)溆?，有效?天。2。3。3分裝將上面配制好的樣本稀釋液依據(jù)300μl/支的裝量進(jìn)展分裝，4-30℃條件下保存，有效期12個(gè)月.2.3.4標(biāo)簽打印、貼簽2.3。5質(zhì)控工程和標(biāo)準(zhǔn)工程外觀凈含量pH

標(biāo)準(zhǔn)樣本稀釋液為無色透亮液體,無懸浮物及沉淀物。90％～110％之間。7。4±0.22。4〔濕度≤30%〕〔1)貼樣品墊：將樣品墊貼在已包被好的NC28mm1mmNC〔2〕貼好后，應(yīng)如以下圖所示；注：1、避開混淆是本工序的要點(diǎn)，確保指令、樣品墊標(biāo)示和包被好的NC膜三者之間的完全全都。未經(jīng)清場，不得貼膜組裝不同批號、規(guī)格、品種的產(chǎn)品。2、清場在本崗位必需得到強(qiáng)調(diào)。3、濕度的掌握是本崗位的工藝要點(diǎn)之一，濕度應(yīng)掌握在濕度≤30％.工序五：切條〔1〕接通切條機(jī)電源,設(shè)定切條程序,設(shè)定切割寬度為4mm；(2〕將大卡平放入切條機(jī)平臺軌道中，正面朝上，調(diào)整切條機(jī)上的螺絲，調(diào)整卡槽寬度與大卡寬度一樣按操作面板上“連動”鍵，開頭切條；〔4〕將全部大卡頭尾相接，漸漸放于切條機(jī)上，收集切好的條子，除去有標(biāo)記〔不合格〕的條子。注：濕度的掌握是本崗位的工藝要點(diǎn)之一，濕度應(yīng)掌握在≤30%.工序六：壓卡裝袋〔1〕裝條：將切好的條子放置在底卡的卡槽內(nèi)，面板加樣孔位置對應(yīng)樣本墊；注：不得直接按壓中間部位，如條子上消滅劃痕，按不合格品處理。(2〕蓋面板：將面板與底板對合，用力按壓,使面板與底板吻合。〔3)壓卡：按《平板壓殼機(jī)操作規(guī)程》壓卡注：壓卡時(shí)應(yīng)使卡豎向排列在傳送帶上，并嚴(yán)禁將卡重疊放置.11標(biāo)簽打印、貼簽.4-3012質(zhì)控工程和標(biāo)準(zhǔn)。工程線性范圍

標(biāo)準(zhǔn)試劑的線性范圍為〔0。1—60〕ng/mL,在此線性范圍內(nèi)，線性相關(guān)系r0.990。準(zhǔn)確度 回收率在85％～115％之間.注：1不得包裝不同批號、規(guī)格、品種的產(chǎn)品。2、清場在本崗位必需得到強(qiáng)調(diào).3、濕度的掌握是本崗位的工藝要點(diǎn)之一,濕度應(yīng)掌握在≤30%。2。72。7。1PCTPCT103分別求出測定結(jié)果的均值，以濃度點(diǎn)為自變量，以測定結(jié)果均值為因變量求出線性回歸方程,做曲線.隨機(jī)抽取的同一批號的不同濃度的PCT10PCTU=Uc(y〕*K，K=295％。2。7。2產(chǎn)品校準(zhǔn)品確認(rèn)PCTPCTPCT30本，并計(jì)算兩組測定數(shù)值間的相關(guān)系數(shù)r及系統(tǒng)偏差，要求相關(guān)系數(shù)r0。975，且系統(tǒng)偏差應(yīng)15%假設(shè)滿足以上要求,則該批PCT產(chǎn)品校準(zhǔn)品的值確定;假設(shè)無法滿足，則需重復(fù)賦值過程，以確定該批PCT產(chǎn)品校準(zhǔn)品的值。2.7.3用產(chǎn)品校準(zhǔn)品檢測待檢半成品試劑盒，每個(gè)濃度點(diǎn)分別在四臺熒光儀上【信號測試】模塊平行檢測三次并點(diǎn)擊【EXCELEXCEL12個(gè)檢測卡的T/C數(shù)值匯總到一個(gè)EXCELT/CT/C個(gè)熒光儀軟件【測試試驗(yàn)】模塊中，依據(jù)需要在【擬合算法】中選擇擬合方式并點(diǎn)擊【擬合】即生成曲線.2。7。4IDIDHEXID】，此曲線即燒制到數(shù)據(jù)卡(ID〕中.燒制工序SnartPROSOP。質(zhì)控工程和標(biāo)準(zhǔn)工程線性范圍

標(biāo)準(zhǔn)試劑的線性范圍為〔0。1—60)ng/mL，在此線性范圍內(nèi)，線性相關(guān)系r0。990。準(zhǔn)確度 回收率在85％～115%之間。2.8工序八：降鈣素原〔PCT〕測定試劑盒〔熒光免疫層析法)試劑盒組裝2。8.1組 分試劑卡樣本稀釋液數(shù)據(jù)卡說明書注：

25人份/盒1/袋25/盒300μl/瓶25/盒11

40人份/盒1/袋40/盒300μl/瓶40/盒111、避開混淆是本工序的要點(diǎn)。確保指令、包裝物標(biāo)示和待包裝產(chǎn)品三者之間的完全全都。未經(jīng)清場，不得包裝不同批號、規(guī)格、品種的產(chǎn)品。2、清場在本崗位必需得到強(qiáng)調(diào)。2.8。2工程 標(biāo)準(zhǔn)物理性狀

外觀凈含量膜條寬度液體移行速度

試劑卡外觀平坦，材料附著結(jié)實(shí);樣本稀釋液為無色透亮液體，無懸浮物及沉淀物。90%～110％之間.3.9mm。25mm/min?！?。1ng/mL.線性范圍準(zhǔn)確度測量精重復(fù)性密度 批間差

試劑的線性范圍為〔0.1-60〕ng/mL，在此線性范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)r0。990。85%～115%之間。用質(zhì)控品重復(fù)測試，所得結(jié)果的變異系數(shù)〔CV〕≤15%.用質(zhì)控品重復(fù)測試3(CV≤15％.4℃～3012穩(wěn)定性 取效期末的樣品檢測外觀、膜條寬度、液體移行速度、空白限、線性范圍、重復(fù)性、準(zhǔn)確度,應(yīng)分別符合其要求。質(zhì)量掌握點(diǎn)工序 質(zhì)量掌握點(diǎn)稱量

生產(chǎn)過程重量

質(zhì)量掌握項(xiàng)

頻次中間產(chǎn)品性狀1、樣品墊制作2、ＮＣ膜制備3、樣本稀釋液制備4、貼膜組裝5、切條6、壓卡裝袋

加樣混合噴探針稱量加樣混合劃線稱量加樣貼簽擺管分裝標(biāo)簽打印貼簽貼膜切條壓卡標(biāo)簽打印貼簽

體積裝量、時(shí)間、轉(zhuǎn)速速度、噴量重量裝量、時(shí)間、轉(zhuǎn)速速度重量品名、位置數(shù)量與裝配數(shù)目核對體積嚴(yán)密度、外漏速度、位置品名、位置位置速度、位置速度、位置速度、位置速度、位置品名、位置

外觀均勻度 每批均勻度性狀外觀每批均勻度均勻度性狀端正、結(jié)實(shí)、無皺褶外觀外觀、體積準(zhǔn)確度 每批嚴(yán)密、無外漏物漏印端正、結(jié)實(shí)、無皺褶端正、結(jié)實(shí) 每批寬度 每批過緊、過松漏氣每批漏印端正、結(jié)實(shí)、無皺褶7、燒數(shù)據(jù)卡

標(biāo)準(zhǔn)曲線制準(zhǔn)確、依據(jù)操作規(guī)程作 操作、需要復(fù)核裝盒 速度、組分

準(zhǔn)確寫入數(shù)據(jù)、復(fù)核無誤 每批組分齊全、無缺漏8、試劑盒組裝

標(biāo)簽打印貼簽

速度、位置品名、位置

每批漏印端正、結(jié)實(shí)、無皺褶4。生產(chǎn)過程物料平衡的計(jì)算方法、數(shù)據(jù)處理4.1各工序分步收率淆的有效措施.。1NCNC膜物料平衡=實(shí)際反響膜制備量/理論反響膜制備量×100％95—100％。注:理論反響膜制備量=液體配制量/30μl(板〕4。1.2樣品墊物料平衡率=實(shí)際樣品墊量/理論樣品墊量×100％95—100％.注：理論樣品墊量=液體配制量/120μl〔板〕4。1.3稀釋液物料平衡稀釋液物料平衡=實(shí)際分裝瓶量/理論分裝瓶量×100％95—100%.注：理論分裝瓶量=稀釋液總量/300μl4。1.4數(shù)據(jù)卡物料平衡=實(shí)際燒數(shù)據(jù)卡量/理論燒數(shù)據(jù)卡量×100%95-100％包材物料平衡包材物料平衡=實(shí)際包材用量/理論包材用量×100%95-100%成品物料平衡成品物料平衡=實(shí)際產(chǎn)量/理論產(chǎn)量×100％95—105%。數(shù)據(jù)處理凡收率在合格范圍內(nèi)的，方可“流轉(zhuǎn)”投入下一工序。4.2。2凡收率高于或低于合格范圍內(nèi)，應(yīng)馬上貼“待驗(yàn)”標(biāo)志，不能遞交下工序，并由覺察人填寫偏差產(chǎn)品最終質(zhì)量的狀況下，方可放行。包裝要求、標(biāo)簽、說明書(附樣本)與產(chǎn)品貯存方法及有效期包裝規(guī)格：25/盒、40/盒。5。1.1鋁箔袋規(guī)格：1/袋.。225T：25125140T: