04PCT測定試劑盒(熒光免疫層析法)工藝規(guī)程

04.PCT測定試劑盒(熒光免疫層析法)工藝規(guī)程04.PCT測定試劑盒(熒光免疫層析法)工藝規(guī)程10編制人： 日期： 年 日

審核人： 日期: 年 月 日批準人： 日期： 年 月生效日期： 年 月日頒發(fā)部門： 質(zhì)量部分發(fā)部門: 受控編號:

日頒發(fā)份數(shù)： 2 份降鈣素原〔PCT〕測定試劑盒(熒光免疫層析法〕1。產(chǎn)品名稱、劑型、注冊分類、規(guī)格、定義、組成及用途中文名稱：降鈣素原(PCT〕測定試劑盒〔熒光免疫層析法〕規(guī) 格：25人份/盒、40人份/盒劑 型：診斷試劑6840檢測原理來體外定量測定人血清、血漿樣本中降鈣素原〔PCT〕的含量。依據(jù)：《降鈣素原〔PCT〕測定試劑盒〔熒光免疫層析法〕產(chǎn)品技術(shù)要求》目 錄生產(chǎn)工藝流程圖試劑卡制備生產(chǎn)工藝質(zhì)量掌握點主要原輔料、包裝材料消耗定額、能源消耗定額、物料平衡的計算方法包裝要求、標簽、說明書(附樣本)與產(chǎn)品貯存方法及有效期設(shè)備一覽表技術(shù)安全及勞動保護PCT.羊抗兔IgG抗體

化學(xué)試劑 抗體

試劑

化學(xué)試劑

兔IgG抗體微球偶聯(lián)物鼠抗人PCT

化學(xué)試劑十萬 級 〔C線〕. 潔凈區(qū)

包被液配制〔T線〕

樣品墊處理液配制

探針稀釋液配制 樣本稀釋液配制探針配制.樣品墊處理劃線〔NC〕

樣品墊制作 #★十萬級潔 枯燥凈 NC膜枯燥#★ 貼膜組裝 環(huán)境區(qū) #

分裝★不合格不合格品掌握 半成品檢驗合切條 格干十 燥萬 環(huán)級潔 壓卡裝袋 境凈 #區(qū)不合格半成品檢驗 不合格品掌握合格萬級凈潔 標準曲線制作 燒數(shù)據(jù)卡 半成品檢驗 合格 貼簽、組裝凈區(qū)不合格不合格品掌握成品檢驗

不合格品掌握★：關(guān)鍵工序

：質(zhì)量掌握點 合格#：濕度≤30%入庫.試劑卡制備生產(chǎn)工藝2。12。22.32。42。52.62。72.8〔PCT〕測定試劑盒(熒光免疫層析法〕試劑盒組裝2.1工序一:樣品墊制作2。1。1探針稀釋液2。1.1。1標準配方名稱探針稀釋液

物料名稱三羥甲基氨基甲烷

配制1000ml使用量2。4228g

75人份使用量調(diào)整PH=8.4±0.2蔗糖牛血清白蛋白吐溫-20Proclin300

150g5g5ml0.3ml

0.12ml純化水定容至1000ml2。1。1.2配制方法依據(jù)標準配方準確稱取三羥甲基氨基甲烷2。4228g800ml,放入1個干凈PH值應(yīng)在8。4±0。2范圍內(nèi)，再依次參加蔗糖150g、牛血清白蛋白5g、吐溫—205ml、Proclin3000。3ml,置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后,將溶液緩緩倒入容積為1000ml3次燒杯,全部溶液倒入上述容量瓶中,用純化水定容至1000ml.混合均勻4~30℃保存?zhèn)溆?有效期7天。。2樣品墊處理液2.1.2。1標準配方名稱物料名稱配制1000ml使用量75人份使用量樣品墊處理液十二水合磷酸氫二鈉5.73g二水合磷酸二氫鈉0。62g40ml調(diào)整PH=7.4±0。2純化水定容至1000ml2.1.2.2配制方法依據(jù)標準配方分別準確稱取十二水合磷酸氫二鈉573g0.62g，放入干凈燒杯中，加純化水800ml，放入1個干凈的磁力攪拌子，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，使用多參數(shù)測試儀測量PH值應(yīng)在7.4±0.2pH的溶液緩緩倒入容積為1000ml的容量瓶中,用純化水反復(fù)沖洗31000ml,混合均勻4～30℃保存?zhèn)溆?，有效?天。2。1。3樣品墊制作樣品墊處理〔1〕將玻璃纖維平鋪到水平槽內(nèi),倒入足量樣品墊處理液，應(yīng)讓玻璃纖維完全浸泡入樣品墊處理液中；(2〕浸泡至少15分鐘，保證玻璃纖維完全浸透,玻璃纖維外表無氣泡；玻璃纖維浸透后，將玻璃纖維取出，45度恒溫枯燥4—6小時；枯燥完成后4～30℃封存?zhèn)溆?，有效?天。2。1。3.2樣品墊制作(1〕處理后的樣品墊裁切成29mm寬度;〔2〕兔IgG抗體微球偶聯(lián)物：鼠抗人NT抗體微球偶聯(lián)物：探針稀釋液=1:3:20的比例配制探針溶液;(3〕按4μl/cm噴量,將配制好的探針溶液均勻噴點到已裁切的樣品墊上?！?)在45度恒溫枯燥、濕度小于30％的環(huán)境下枯燥4-6小時.注：枯燥濕度的掌握是本崗位的工藝要點之一，濕度應(yīng)掌握在30%以下。〔5)枯燥完成后4~30℃封存?zhèn)溆?，有效?4個月。注：枯燥后應(yīng)避開長時間放置于4～30℃環(huán)境。工序二：ＮＣ膜制備2.2。1包被液。1標準配方名稱物料名稱配制1000ml使用量 75人份使用量包被液磷酸氫二鉀二水合磷酸二氫鈉氯化鈉1.82g0.22g8.76g2。2.1。2配制方法

調(diào)整PH=7。2±0.2蔗糖 30g純化水定容至1000ml

0。06ml依據(jù)標準配方分別準確稱取磷酸氫二鉀1.82g、二水合磷酸二氫鈉0。22g、氯化鈉8.76g，放入干凈燒杯中，加純化水800ml，放入1個干凈的磁力攪拌子,置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，使用多參數(shù)測試儀測量PH值應(yīng)在7。2±0.2范圍內(nèi)，再參加蔗糖30g，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，將充分溶解并調(diào)好pH的溶液緩緩倒入容積為1000ml3次燒杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用純化水定容至1000ml，混合均勻4～30℃保存?zhèn)溆?有效期7天。2。2.2C線包被液使用包被液將羊抗兔IgG抗體稀釋成終濃度為1mg/ml.充分混合后保存?zhèn)溆?。注：現(xiàn)用現(xiàn)配2。2.3T線包被液使用包被液將鼠抗人PCT抗體稀釋成終濃度為1mg/ml。充分混合后保存?zhèn)溆?。注：現(xiàn)用現(xiàn)配NC膜劃線PVCPVC25mm，沿上面保護紙的下邊緣，將硝酸纖維素膜〔NC〕貼在該區(qū)；注:1.粘貼上下邊緣與相鄰區(qū)上下邊緣齊平；粘貼時留意動作輕柔,避開用手直接按壓硝酸纖維素膜〔NC膜〕表面。27mmPVC25mm2mm掩蓋硝酸纖維素膜〔NC膜)；上邊緣與底板邊緣齊平。1μl/cm包被量將CTNC(4)C、TCNC10mm，CT6mm，TNC9mm。注:1、貼膜和包被過程應(yīng)留意避開膜的污染。2、劃線時的濕度條件是NC45％～65%.3CT〔NC〕平衡至一樣溫度。。5NC6小時?？菰锿瓿珊蠓獯?zhèn)溆?，有效?4個月。注:1、枯燥時，濕度的掌握是本崗位的工藝要點之一，濕度應(yīng)掌握在≤30%?？菰锖髴?yīng)避開長時間4～30℃環(huán)境。工序三：樣本稀釋液制備標準配方名稱 物料名稱磷酸氫二鉀樣本稀釋液樣本稀釋液PH7.4±0.2S910gProclin3000.3ml2。3.2配制方法牛血清白蛋白5g

配制1000ml使用量1.82g0。22g8.76g

75人份使用量22。5ml依據(jù)標準配方分別準確稱取磷酸氫二鉀1.82g、二水合磷酸二氫鈉0.22g、氯化鈉8。76g,放入干凈燒杯中，加純化水800ml,放入1個干凈的磁力攪拌子，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，使用多參數(shù)測試儀測量PH值應(yīng)在7.4±0.2范圍內(nèi)，再依次參加S910g、Proclin3000.3ml、牛血清白蛋白5g，置磁力攪拌器上攪拌至充分溶解后，將溶液緩緩倒入容積為1000ml的容量瓶中，用純化水反復(fù)沖洗3次燒杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用純化水定容至1000ml,混合均勻后4-30℃保存?zhèn)溆?，有效?天。2。3。3分裝將上面配制好的樣本稀釋液依據(jù)300μl/支的裝量進展分裝，4-30℃條件下保存，有效期12個月.2.3.4標簽打印、貼簽2.3。5質(zhì)控工程和標準工程外觀凈含量pH

標準樣本稀釋液為無色透亮液體,無懸浮物及沉淀物。90％～110％之間。7。4±0.22。4〔濕度≤30%〕〔1)貼樣品墊：將樣品墊貼在已包被好的NC28mm1mmNC〔2〕貼好后，應(yīng)如以下圖所示；注：1、避開混淆是本工序的要點，確保指令、樣品墊標示和包被好的NC膜三者之間的完全全都。未經(jīng)清場，不得貼膜組裝不同批號、規(guī)格、品種的產(chǎn)品。2、清場在本崗位必需得到強調(diào)。3、濕度的掌握是本崗位的工藝要點之一，濕度應(yīng)掌握在濕度≤30％.工序五：切條〔1〕接通切條機電源,設(shè)定切條程序,設(shè)定切割寬度為4mm；(2〕將大卡平放入切條機平臺軌道中，正面朝上，調(diào)整切條機上的螺絲，調(diào)整卡槽寬度與大卡寬度一樣按操作面板上“連動”鍵，開頭切條；〔4〕將全部大卡頭尾相接，漸漸放于切條機上，收集切好的條子，除去有標記〔不合格〕的條子。注：濕度的掌握是本崗位的工藝要點之一，濕度應(yīng)掌握在≤30%.工序六：壓卡裝袋〔1〕裝條：將切好的條子放置在底卡的卡槽內(nèi)，面板加樣孔位置對應(yīng)樣本墊；注：不得直接按壓中間部位，如條子上消滅劃痕，按不合格品處理。(2〕蓋面板：將面板與底板對合，用力按壓,使面板與底板吻合?！?)壓卡：按《平板壓殼機操作規(guī)程》壓卡注：壓卡時應(yīng)使卡豎向排列在傳送帶上，并嚴禁將卡重疊放置.11標簽打印、貼簽.4-3012質(zhì)控工程和標準。工程線性范圍

標準試劑的線性范圍為〔0。1—60〕ng/mL,在此線性范圍內(nèi)，線性相關(guān)系r0.990。準確度 回收率在85％～115％之間.注：1不得包裝不同批號、規(guī)格、品種的產(chǎn)品。2、清場在本崗位必需得到強調(diào).3、濕度的掌握是本崗位的工藝要點之一,濕度應(yīng)掌握在≤30%。2。72。7。1PCTPCT103分別求出測定結(jié)果的均值，以濃度點為自變量，以測定結(jié)果均值為因變量求出線性回歸方程,做曲線.隨機抽取的同一批號的不同濃度的PCT10PCTU=Uc(y〕*K，K=295％。2。7。2產(chǎn)品校準品確認PCTPCTPCT30本，并計算兩組測定數(shù)值間的相關(guān)系數(shù)r及系統(tǒng)偏差，要求相關(guān)系數(shù)r0。975，且系統(tǒng)偏差應(yīng)15%假設(shè)滿足以上要求,則該批PCT產(chǎn)品校準品的值確定;假設(shè)無法滿足，則需重復(fù)賦值過程，以確定該批PCT產(chǎn)品校準品的值。2.7.3用產(chǎn)品校準品檢測待檢半成品試劑盒，每個濃度點分別在四臺熒光儀上【信號測試】模塊平行檢測三次并點擊【EXCELEXCEL12個檢測卡的T/C數(shù)值匯總到一個EXCELT/CT/C個熒光儀軟件【測試試驗】模塊中，依據(jù)需要在【擬合算法】中選擇擬合方式并點擊【擬合】即生成曲線.2。7。4IDIDHEXID】，此曲線即燒制到數(shù)據(jù)卡(ID〕中.燒制工序SnartPROSOP。質(zhì)控工程和標準工程線性范圍

標準試劑的線性范圍為〔0。1—60)ng/mL，在此線性范圍內(nèi)，線性相關(guān)系r0。990。準確度 回收率在85％～115%之間。2.8工序八：降鈣素原〔PCT〕測定試劑盒〔熒光免疫層析法)試劑盒組裝2。8.1組 分試劑卡樣本稀釋液數(shù)據(jù)卡說明書注：

25人份/盒1/袋25/盒300μl/瓶25/盒11

40人份/盒1/袋40/盒300μl/瓶40/盒111、避開混淆是本工序的要點。確保指令、包裝物標示和待包裝產(chǎn)品三者之間的完全全都。未經(jīng)清場，不得包裝不同批號、規(guī)格、品種的產(chǎn)品。2、清場在本崗位必需得到強調(diào)。2.8。2工程 標準物理性狀

外觀凈含量膜條寬度液體移行速度

試劑卡外觀平坦，材料附著結(jié)實;樣本稀釋液為無色透亮液體，無懸浮物及沉淀物。90%～110％之間.3.9mm。25mm/min?！?。1ng/mL.線性范圍準確度測量精重復(fù)性密度 批間差

試劑的線性范圍為〔0.1-60〕ng/mL，在此線性范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)r0。990。85%～115%之間。用質(zhì)控品重復(fù)測試，所得結(jié)果的變異系數(shù)〔CV〕≤15%.用質(zhì)控品重復(fù)測試3(CV≤15％.4℃～3012穩(wěn)定性 取效期末的樣品檢測外觀、膜條寬度、液體移行速度、空白限、線性范圍、重復(fù)性、準確度,應(yīng)分別符合其要求。質(zhì)量掌握點工序 質(zhì)量掌握點稱量

生產(chǎn)過程重量

質(zhì)量掌握項

頻次中間產(chǎn)品性狀1、樣品墊制作2、ＮＣ膜制備3、樣本稀釋液制備4、貼膜組裝5、切條6、壓卡裝袋

加樣混合噴探針稱量加樣混合劃線稱量加樣貼簽擺管分裝標簽打印貼簽貼膜切條壓卡標簽打印貼簽

體積裝量、時間、轉(zhuǎn)速速度、噴量重量裝量、時間、轉(zhuǎn)速速度重量品名、位置數(shù)量與裝配數(shù)目核對體積嚴密度、外漏速度、位置品名、位置位置速度、位置速度、位置速度、位置速度、位置品名、位置

外觀均勻度 每批均勻度性狀外觀每批均勻度均勻度性狀端正、結(jié)實、無皺褶外觀外觀、體積準確度 每批嚴密、無外漏物漏印端正、結(jié)實、無皺褶端正、結(jié)實 每批寬度 每批過緊、過松漏氣每批漏印端正、結(jié)實、無皺褶7、燒數(shù)據(jù)卡

標準曲線制準確、依據(jù)操作規(guī)程作 操作、需要復(fù)核裝盒 速度、組分

準確寫入數(shù)據(jù)、復(fù)核無誤 每批組分齊全、無缺漏8、試劑盒組裝

標簽打印貼簽

速度、位置品名、位置

每批漏印端正、結(jié)實、無皺褶4。生產(chǎn)過程物料平衡的計算方法、數(shù)據(jù)處理4.1各工序分步收率淆的有效措施.。1NCNC膜物料平衡=實際反響膜制備量/理論反響膜制備量×100％95—100％。注:理論反響膜制備量=液體配制量/30μl(板〕4。1.2樣品墊物料平衡率=實際樣品墊量/理論樣品墊量×100％95—100％.注：理論樣品墊量=液體配制量/120μl〔板〕4。1.3稀釋液物料平衡稀釋液物料平衡=實際分裝瓶量/理論分裝瓶量×100％95—100%.注：理論分裝瓶量=稀釋液總量/300μl4。1.4數(shù)據(jù)卡物料平衡=實際燒數(shù)據(jù)卡量/理論燒數(shù)據(jù)卡量×100%95-100％包材物料平衡包材物料平衡=實際包材用量/理論包材用量×100%95-100%成品物料平衡成品物料平衡=實際產(chǎn)量/理論產(chǎn)量×100％95—105%。數(shù)據(jù)處理凡收率在合格范圍內(nèi)的，方可“流轉(zhuǎn)”投入下一工序。4.2。2凡收率高于或低于合格范圍內(nèi)，應(yīng)馬上貼“待驗”標志，不能遞交下工序，并由覺察人填寫偏差產(chǎn)品最終質(zhì)量的狀況下，方可放行。包裝要求、標簽、說明書(附樣本)與產(chǎn)品貯存方法及有效期包裝規(guī)格：25/盒、40/盒。5。1.1鋁箔袋規(guī)格：1/袋.。225T：25125140T: