牙齦卟啉單胞菌單一及復合生物膜對血小板聚集的作用的開題報告

血鏈球菌/牙齦卟啉單胞菌單一及復合生物膜對血小板聚集的作用的開題報告開題報告一、研究背景衣原體肺炎、支原體肺炎等呼吸系統(tǒng)感染疾病已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注，然而口腔感染在全球也具有相當?shù)牧餍新?。在口腔中，細菌生存在生物膜里，其中血鏈球菌和牙齦卟啉單胞菌是引起口腔疾病最常見的細菌，同時這兩個病原菌也都是全球范圍內(nèi)典型的細菌性感染病原體。研究表明，這些細菌與表面（口腔黏膜、死亡細胞）和潛在宿主的免疫系統(tǒng)相互作用，從而形成了具有生物學功能的復合生物膜。復合生物膜會導致某些宿主細胞的功能受到嚴重抑制，并誘導細胞凋亡和壞死，從而使病原菌處于有利位置。同時，血小板的有關(guān)病理生理學變化，在上述疾病發(fā)生時也有重要的作用。由于該類感染疾病對于口腔黏膜上的血管系統(tǒng)會產(chǎn)生直接的影響，血小板減少和血小板聚集的問題將隨之而來。測定血小板聚集能力已經(jīng)成為一種診斷和分析復雜系統(tǒng)的生物學試驗手段，研究細菌生物膜對于血小板聚集的影響可以為口腔感染的治療和預防提供理論依據(jù)。二、研究目的本研究旨在探究血鏈球菌以及牙齦卟啉單胞菌的單一以及復合生物膜對于血小板聚集能力的影響。針對該問題，研究將展開以下工作：1.構(gòu)建血鏈球菌/牙齦卟啉單胞菌單一以及復合生物膜模型；2.檢測血小板在膜模型下的聚集能力變化；3.分析不同生物膜模型對血小板聚集的作用機理；4.探索生物膜對感染性疾病發(fā)生發(fā)展的影響。三、研究方法1.細菌培養(yǎng)采用相應的培養(yǎng)基對血鏈球菌和牙齦卟啉單胞菌進行預培養(yǎng)，在水平振蕩培養(yǎng)箱中生長至對數(shù)期的細胞用NaCl溶液洗脫，用緩沖液進行重懸，制備不同種類、不同濃度的菌懸液。2.生物膜的制備將生物膜制備方法進行哈雷法或華氏法提高其黏附力，同時組合多種方法制備復合生物膜，如哈雷法、電化學法以及酵母法等。通過極化和脫極化之間的交替工作，生成有機化合物和中間體，同時也可以形成生物膜，這將被用于后續(xù)的實驗中。3.血小板研究通過對血液樣本進行離心、去除白細胞等清潔過程后，對血小板進行采樣，并采用ELISA試劑盒檢測血小板纖維素、血凝素等指標來測定血小板濃度。在血鏈球菌/牙齦卟啉單胞菌細菌生物膜上進行血小板聚集測試。通過測量在不同細菌生物膜存在下的血小板聚集程度，分析細菌生物膜對于血小板聚集能力的影響。同時，通過檢測生物膜組成的變化和相關(guān)蛋白質(zhì)的表達，分析生物膜對感染性疾病發(fā)生發(fā)展的影響。四、預期結(jié)果1.通過生物膜模型對于血小板聚集能力的影響的比較，找到與不同的生物膜模型相關(guān)的生物學損傷及表觀遺傳學變化。2.發(fā)現(xiàn)生物膜模型的組成、構(gòu)建和形態(tài)對于感染性疾病的發(fā)生發(fā)展有一定標志意義。3.揭示生物膜模型上的相互作用，推動口腔感染的防治措施的提高。五、研究意義本研究可以深入理解血鏈球菌和牙齦卟啉單胞菌單一以及復合生物膜對血小板聚集能力的影響和生物膜發(fā)生機制，