注射用喜炎平對小鼠、犬睡眠的影響

注射用喜炎平對小鼠、犬睡眠的影響

注射用心炎平是一種新型的中藥制劑。從蕨類植物中提取的水生蓮皮磺酸具有清熱解毒、抗菌消炎、止咳等功效。本文通過對小鼠自發(fā)活動的影響試驗、對戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠的影響試驗、小鼠轉(zhuǎn)桿試驗及對心血管、呼吸系統(tǒng)的影響試驗,研究了注射用喜炎平對動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等的影響,研究了受試物在治療范圍內(nèi)或治療范圍以上的劑量時,潛在的不期望出現(xiàn)的對生理功能的不良影響,即觀察受試物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。根據(jù)需要可能進行追加和/或補充的安全藥理學研究。1實驗材料1.1測試對象注射用喜炎平,規(guī)格:125mg,批號20040112,哈爾濱三元陽普醫(yī)藥科技有限責任公司提供。1.2天津金耀氨基酸有限公司苯巴比妥鈉注射液:規(guī)格:1mL/支,批號:01601291,1mL:0.1g,天津金耀氨基酸有限公司。戊巴比妥鈉:規(guī)格:25g,批號:F20021216,生產(chǎn)單位:中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司。氯化鈉注射液:規(guī)格:100mL:0.9g,批號:03010703,生產(chǎn)單位:沈陽志鷹制藥廠。1.3雄各半或雄各半小鼠:昆明種,體重18～22g,雌雄各半由遼寧省藥品檢驗所動物室提供。實驗動物犬:體重10～20kg,雌雄兼用,沈陽市東陵區(qū)龍元經(jīng)濟動物養(yǎng)殖廠提供。1.4小鼠轉(zhuǎn)棒儀的測定ZIL-2程控自主活動箱(醫(yī)科院藥研所);BIOPAC十六道生理儀(BIOPACSYSTEMSINC.美國);DXP-2大小鼠轉(zhuǎn)棒儀(醫(yī)科院藥研所);CP124S電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);JJ1100電子天平(美國雙杰兄弟(集團)有限公司常熟雙杰測試儀器廠);DGXG1小型電熱滅菌器(上海醫(yī)用核子儀器廠)。1.5統(tǒng)計方法數(shù)據(jù)用Excel統(tǒng)計,結(jié)果用t檢驗比較。1.6實驗室條件溫度18℃～24℃,濕度40%～65%。2實驗方法2.1影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的因素2.1.1zil-2小鼠自主活動箱及條件選擇取上述健康小鼠60只,按體重隨機分為4組,前3組分別尾靜脈注射給予注射用喜炎平400、200、100mg/kg,給藥體積0.2mL/10g小鼠體重,對照組同法給予同體積氯化鈉注射液,給藥順序按拉丁方設(shè)計,給藥后10min,將小鼠放入ZIL-2程控自主活動箱中,每箱放1只動物,先適應(yīng)5min,記錄10min內(nèi)小鼠活動數(shù),計算每組的平均值及標準差,給藥組與對照組進行t檢驗,結(jié)果見表1。2.1.2對小鼠的影響取上述健康小鼠52只,按體重隨機分為4組,前3組分別尾靜脈注射給予注射用喜炎平400、200、100mg/kg,給藥體積0.2mL/10g小鼠體重,對照組同法給予同體積氯化鈉注射液,給藥后10min腹腔注射戊巴比妥鈉(50mg/kg),以翻正反射消失為入睡時間,從翻正反射消失至恢復時間為睡眠持續(xù)時間。記錄小鼠入睡時間、睡眠持續(xù)時間,計算每組的平均值及標準差,給藥組與對照組進行t檢驗,結(jié)果見表2。2.1.3尾靜脈注射用喜炎平單次給藥后小鼠在轉(zhuǎn)桿上停留時間測定DXP-2大小鼠轉(zhuǎn)棒儀,調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為18r/min。試驗前1天,篩選能夠停留在轉(zhuǎn)桿上至少1min的小鼠。取上述健康小鼠60只,按體重隨機分為4組,前3組分別尾靜脈注射給予注射用喜炎平400mg/kg、200mg/kg、100mg/kg,給藥體積0.2mL/10g小鼠體重,對照組同法給予同體積氯化鈉注射液,給藥15min后,將小鼠放于轉(zhuǎn)桿上,記錄小鼠在轉(zhuǎn)桿上停留的時間,超過60s以60s計。計算每組的平均值及標準差,給藥組與對照組進行t檢驗,結(jié)果見表3。2.2生理儀記錄取健康犬6只,以苯巴比妥鈉腹腔注射麻醉,劑量為170mg/kg,背位固定,分離一側(cè)頸動脈,動脈插管,連接于壓力傳感器,用BIOPAC十六道生理儀記錄分析系統(tǒng)同步記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖、收縮壓、舒張壓。經(jīng)靜脈注射分別給予注射用喜炎平144、72、18mg/kg各劑量,給藥體積2mL/kg,對照組同法給予同體積氯化鈉注射液,每只犬給4次藥(每個劑量各1次),給藥次序按拉丁方設(shè)計,記錄給藥前及給藥后10、30、45、60min的心電、血壓曲線,并計算每組的心率、QRS波時間、PR間期、QT間期、ST波電壓和血壓的平均值及標準差,給藥組與對照組進行t檢驗。2.3給藥前后呼吸頻率和深度相關(guān)性研究試驗動物與麻醉方法同試驗2,背位固定,于胸骨劍突部位穿線,打結(jié)并懸掛于肌張力換能器,連接于BIOPAC十六道生理儀,給藥方法同試驗2,同步記錄給藥前后動物的呼吸頻率和呼吸深度的變化,測量給藥前0min,給藥后10、30、45、60min的呼吸頻率及呼吸深度,計算每組的平均值及標準差,給藥組與對照組進行t檢驗,結(jié)果見表4、表5。3結(jié)果3.1影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的因素3.1.1小鼠自主活動次數(shù)對小鼠自主活動次數(shù)的影響結(jié)果表明,注射用喜炎平400、200mg/kg劑量組對小鼠自主活動次數(shù)有增加趨勢,與對照組相比差別無顯著意義(P>0.05)。100mg/kg劑量組對小鼠自主活動的影響與對照組相比差別無顯著意義(P>0.05)。3.1.2對巴比妥鈉所致小鼠睡眠的影響結(jié)果表明,注射用喜炎平400mg/kg劑量組對戊巴比妥鈉所致小鼠的入睡時間與對照組相比有縮短趨勢,睡眠時間與對照組相比有明顯的延長作用(P<0.05),其它劑量組無明顯影響(P>0.05)。3.1.3對小鼠轉(zhuǎn)桿預(yù)留時間的影響結(jié)果表明,注射用喜炎平400、200、100mg/kg各劑量組對小鼠在轉(zhuǎn)桿上停留的時間與對照組相比差別無顯著意義(P>0.05)。3.2對大鼠心率、血壓、t波電位的影響結(jié)果表明,注射用喜炎平144、72、18mg/kg各劑量靜脈注射給藥,給藥后10、30、45、60min,犬的心率、血壓、QRS間期、T波電位與給藥前比較差別無顯著意義(P>0.05),ST段無明顯位移,無心律失常發(fā)生。144mg/kg劑量組對犬血壓有一過性的降壓作用,給藥后3min即恢復。各劑量組均有減慢心率的趨勢,隨劑量增加而作用愈明顯,給藥10min內(nèi)作用最強。對照組各時間點的各項指標與給藥前相比無顯著性差別(P>0.05)。3.3注射用喜炎平對戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠的影響見表4。結(jié)果表明,注射用喜炎平144、72、18mg/kg靜脈注射給藥,對犬的呼吸頻率及深度影響與給藥前比較差別無顯著意義(P>0.05),但144、72mg/kg劑量組在給藥后有加大呼吸深度,減慢呼吸頻率的趨勢,其作用隨劑量加大而越明顯,給藥10min內(nèi)作用最強,隨時間的增加而減弱。對照組各時間點的各項指標與給藥前相比無顯著性差別(P>0.05)。注射用喜炎平400、200mg/kg劑量組對小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)無明顯的影響,僅有自主活動增加的趨勢;各劑量組對小鼠運動神經(jīng)系統(tǒng)及協(xié)調(diào)性無明顯影響,400mg/kg對戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠有明顯的協(xié)同作用。分別以144、72、18mg/kg靜脈注射給藥,對動物心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)均無顯著性影響。4對小鼠自主活動的影響根據(jù)資料顯示,喜炎平與戊巴比妥鈉有協(xié)同作用,所以在本試驗中注射用喜炎平高劑量(400mg/kg)對戊巴比妥鈉所致小鼠的睡眠時間有顯著的延長作用。在考察心血管系統(tǒng)的影響試驗中,144mg/kg劑量組對犬血壓有一過性的降壓作用,給藥后3min即恢復。各劑量組均有減慢心率的趨勢,隨劑量增加而作用愈明顯,給藥10min內(nèi)作用最強。由于犬的個體差異較大,動物數(shù)量較少而未有顯著性差別。在考察呼吸系統(tǒng)的影響試驗中,144、72mg/kg劑量組在給藥后有加大呼吸深度,減慢呼吸頻率的趨勢,其作用隨劑量加大而越明顯,給藥10min內(nèi)作用最強,其中有2只犬此作用很明顯。這可能與喜炎平具有與戊巴比妥鈉的協(xié)同作用有關(guān)。