不同蛋白水平的人工飼糧對(duì)中華蜜蜂春繁群勢(shì)和封子數(shù)的影響

不同蛋白水平的人工飼糧對(duì)中華蜜蜂春繁群勢(shì)和封子數(shù)的影響

蜜蜂是昆蟲(chóng)科的一種社會(huì)化昆蟲(chóng)。蜜蜂的健康生長(zhǎng)和發(fā)育需要合理的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。在自然條件下,蜜蜂可以從外界獲取所有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),花粉則主要為蜜蜂提供了生存所需的蛋白質(zhì)。春繁是蜜蜂蜂群發(fā)展的重要階段,通常需要對(duì)蜂群額外補(bǔ)飼蛋白飼料,加快蜂群群勢(shì)的增長(zhǎng)。章加寶等研究報(bào)道,春天繁殖階段,蜂群內(nèi)蜂花粉短缺,營(yíng)養(yǎng)供不上,會(huì)出現(xiàn)幼蟲(chóng)被拖或發(fā)育不良,成年蜂生長(zhǎng)受阻,泌蠟、泌漿能力降低等情況,蜂王產(chǎn)卵能力也會(huì)受到影響而下降。Mattila研究表明,在春天飼喂蜂花粉或代用花粉組蜂群工蜂的數(shù)量在五月初要遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于其它沒(méi)有飼喂的蜂群。Herbert報(bào)道意蜂培育幼蟲(chóng)的最佳蛋白水平在23%～30%。肖培新等研究表明含有添加劑的各代用花粉組與純花粉組的蜂群的蜂子數(shù)量差異均不顯著,但均顯著高于純豆粕組。而對(duì)中華蜜蜂春繁階段蛋白營(yíng)養(yǎng)需要量缺乏系統(tǒng)的研究。鑒于此,我們開(kāi)展了本項(xiàng)研究,現(xiàn)將報(bào)道如下。1材料和方法1.1測(cè)試組江西省銅鼓縣古橋馮則眉養(yǎng)蜂場(chǎng)飼養(yǎng)的健康中華蜜蜂蜂群30群,時(shí)間2011年2月28號(hào)至4月11號(hào)。1.2抗氧化酶活性測(cè)定白砂糖(廣西博慶食品有限公司,一級(jí));超純水(沃特浦超純水機(jī),型號(hào):WP-UP-11-20);50%水溶性維生素E(北京福樂(lè)維生物技術(shù)有限公司,維生素添加劑,下同),51.5%維生素K3,92%維生素B1,76%維生素B2,82%維生素B6,90%泛酸鈣,99.5%煙酸胺,96%葉酸,2%生物素,98.5%維生素C;氯化鉀(汕頭市西隴化工廠(chǎng),分析純,下同),碳酸氫鉀,硫酸二氫鉀,氯化鈉,硫酸錳,硫酸鐵,硫酸鋅,硫酸鎂;電子秤;氨基酸(上海生工);總超氧化物歧化酶(SOD)活性測(cè)定試劑盒(南京建成,以下同上);丙二醛(MDA)含量測(cè)定試劑盒,考馬斯亮藍(lán)蛋白測(cè)定試劑盒;紫外分光光度計(jì)(北京普析)。1.3人工飼糧的配方及制作試驗(yàn)設(shè)計(jì)了6個(gè)處理組,對(duì)照組A飼喂茶花粉(蛋白水平為26%);試驗(yàn)組B組、C組、D組、E組和F組,分別飼喂5種不同蛋白水平的人工飼糧(蛋白水平分別為15%、20%、25%、30%和35%)。蜜蜂試驗(yàn)日糧配制中除蛋白以外,預(yù)混料成分均參照文獻(xiàn)。人工飼料試驗(yàn)日糧成分表1。飼喂時(shí)再加糖水等混勻,制成粉餅,放于框梁上飼喂。1.4數(shù)據(jù)記錄1.4.1采集花粉,控制食物充足試驗(yàn)前將蜂群群勢(shì)調(diào)整一致,所有試驗(yàn)組蜂群巢門(mén)均選用孔徑較小的脫粉器控制外勤蜂采集花粉,在框梁上飼喂餅狀試驗(yàn)日糧,確保蜂群長(zhǎng)期處于食物充足狀態(tài)。春繁開(kāi)始后每11天對(duì)蜂群群勢(shì)及封蓋子數(shù)(4.4cm×4.4cm為100只封蓋子)測(cè)定。1.4.2蜜蜂出生體重實(shí)驗(yàn)結(jié)束前,隨機(jī)采集每群蜂中剛出房的蜜蜂10只,使用分析天平測(cè)量其體質(zhì)量。1.4.3小鼠血清蛋白的測(cè)定準(zhǔn)確稱(chēng)取4日齡幼蟲(chóng)0.5g左右,玻璃棒充分?jǐn)噭?按質(zhì)量體積比加入生理鹽水制備成20%的組織勻漿,再用生理鹽水稀釋為1%組織勻漿,采用考馬斯亮蘭蛋白測(cè)定試劑盒,可見(jiàn)光分光光度計(jì)測(cè)定吸光度。1.4.4抗氧化酶活性測(cè)定準(zhǔn)確稱(chēng)取4日齡幼蟲(chóng)0.5g左右,玻璃棒充分?jǐn)噭?按質(zhì)量體積比加入生理鹽水制備成20%的組織勻漿待用,再按測(cè)定需要稀釋為相應(yīng)濃度的組織勻漿,分別選用黃嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸法測(cè)定總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。1.5多重比較分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件中的One-wayANOVA方差分析,多重比較采用鄧肯氏(Duncan)法,顯著性水平P<0.05。2結(jié)果與分析2.1不同蛋白質(zhì)水平對(duì)中國(guó)蜜蜂繁殖性能的影響2.1.1飼料蛋白水平和蜂群群勢(shì)從表2可以看出,春繁試驗(yàn)期間,各處理組蜂群群勢(shì)整體呈上升趨勢(shì)。第11天蜂群群勢(shì)增長(zhǎng)不明顯,試驗(yàn)組間及與對(duì)照組之間蜂群群勢(shì)差異不顯著(P>0.05),第22天蜂群群勢(shì)以花粉對(duì)照組最大,蛋白水平25%和30%的試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05),其它幾組試驗(yàn)組均顯著低于花粉對(duì)照組(P<0.05);第33天,飼料蛋白水平25%、30%和35%的試驗(yàn)組的蜂群群勢(shì)與對(duì)照組之間差異顯著(P<0.05),其他兩組試驗(yàn)組極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。從表3可以看出,在試驗(yàn)后第11天,飼料蛋白水平20%、25%、30%的試驗(yàn)組的封蓋子與對(duì)照組差異不顯著,但均顯著高于蛋白水平15%和35%的試驗(yàn)組;在第22天,試驗(yàn)組之間以及與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05);在第33天,試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05),但30%的蛋白水平試驗(yàn)組顯著高于15%和20%蛋白水平的試驗(yàn)組。2.1.2不同蛋白水平的蜜蜂初體蛋白水平從表4可以看出,隨著飼料蛋白水平升高,春繁階段蜜蜂初生體質(zhì)量先增后降,并以蛋白水平30%試驗(yàn)組E的蜜蜂初生體質(zhì)量最大,20%～35%蛋白水平的試驗(yàn)組與花粉對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。15%蛋白水平的試驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。2.2不同飼料蛋白水平對(duì)幼蟲(chóng)抗氧化酶系統(tǒng)的影響(T-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影響從表5可知,隨著飼料蛋白水平增加,幼蟲(chóng)體蛋白含量先升高后降低,以蛋白水平25%試驗(yàn)組的幼蟲(chóng)蛋白水平最高,20%～35%蛋白水平的試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05);幼蟲(chóng)總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性隨著飼料蛋白水平增長(zhǎng)而升高,20%～35%蛋白水平的試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05),但15%蛋白水平的試驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著(P<0.05);試驗(yàn)組之間及與對(duì)照組在幼蟲(chóng)丙二醛(MDA)含量方面差異不顯著(P>0.05)。3討論和結(jié)論3.1不同蛋白質(zhì)水平對(duì)中國(guó)蜜蜂繁殖性能的影響3.1.1不同的蛋白水平的封建立蜜蜂春繁是指蜂群從越冬后期進(jìn)入早春繁殖,并逐漸發(fā)展成強(qiáng)群,為產(chǎn)品豐收奠定基礎(chǔ)的一個(gè)重要階段。產(chǎn)育力又稱(chēng)繁殖力,是蜂王產(chǎn)卵力和工蜂哺育力的綜合,通常用有效產(chǎn)卵量—封蓋子數(shù)表示。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),前期群勢(shì)增長(zhǎng)不明顯,可能是春繁初期蜂群新老蜂更替數(shù)量比較一致,但飼喂20%、25%、30%的蛋白水平試驗(yàn)組的封蓋子與對(duì)照組差異不顯著,15%和35%的蛋白水平飼料組卻與對(duì)照組差異顯著。在第22天,25%和30%的蛋白水平的蜂群群勢(shì)與對(duì)照組差異顯著,而封蓋數(shù)差異不顯著,這是因?yàn)榈?1天封蓋子出房后是蜂群群勢(shì)變強(qiáng);在第22天和第33天中,25%、30%和35%的蛋白水平的封蓋子數(shù)與對(duì)照組差異不顯著,這也說(shuō)明蛋白水平在25%～35%可以滿(mǎn)足蜂群繁育的需要,且在第33天,蛋白水平在25%～35%的試驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著,這可能是因?yàn)樵诖悍彪A段僅額外補(bǔ)充蛋白飼料還是滿(mǎn)足不了蜂群快速繁育的需要,因?yàn)閷?duì)照組花粉除含有豐富的蛋白和維生素外,還含有人工飼料中尚未添加的其他活性成分。3.1.2粉脾+花粉飼料對(duì)蜂群生長(zhǎng)和生長(zhǎng)發(fā)育的影響蜜蜂初生體質(zhì)量指的是出房后的蜜蜂體質(zhì)量,無(wú)論是工蜂、雄蜂還是蜂王,受蜂群營(yíng)養(yǎng)狀況的影響很大。曾志將等試驗(yàn)證明,蜜蜂的初生體質(zhì)量還與幼蟲(chóng)期營(yíng)養(yǎng)狀況有關(guān),越接近天然花粉營(yíng)養(yǎng)需求的代用品,對(duì)蜜蜂的生長(zhǎng)發(fā)育就越有利。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),20%～35%的蛋白水平與對(duì)照組差異不顯著,以30%的試驗(yàn)組E蜜蜂初生體質(zhì)量最大。王志等分別利用不同花粉飼料制作的粉脾飼喂蜂群,結(jié)果表明,飼喂花粉與飼喂花粉+20%豆粉的蜂群所育工蜂初生體質(zhì)量差異不顯著。程艷華等研究表明:飼喂飼料2(75%茶花粉+25%黃豆粉)與飼喂100%的蜂花粉對(duì)意蜂工蜂初生體質(zhì)量和咽下腺發(fā)育效果一致。這說(shuō)明在春繁缺少天然飼料花粉時(shí)可以補(bǔ)助飼喂蛋白飼料來(lái)滿(mǎn)足工蜂個(gè)體發(fā)育。3.2營(yíng)養(yǎng)方面的影響(T-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影響幼蟲(chóng)體蛋白含量可以間接反映外界花粉或補(bǔ)飼食物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高低。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),20%～35%蛋白水平培育的幼蟲(chóng)的蛋白含量與對(duì)照組差異不顯著,但均高于15%的試驗(yàn)組,并以蛋白水平25%試驗(yàn)組的幼蟲(chóng)體蛋白含量最高。這說(shuō)明低蛋白水平食物不能滿(mǎn)足蜜蜂幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的蛋白需要,食物中蛋白含量不足,將直接影響哺育蜂咽下腺的發(fā)育,從而影響分泌王漿的質(zhì)量。Moritz和Crailsheim研究發(fā)現(xiàn),只有哺育蜂攝取足量的蛋白供咽下腺的發(fā)育和酶類(lèi)的合成,才能將花粉轉(zhuǎn)化成高質(zhì)量的幼蟲(chóng)食物,以便滿(mǎn)足幼蟲(chóng)迅速生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需要。汪禮國(guó)等研究發(fā)現(xiàn)不同的飼料營(yíng)養(yǎng)必然會(huì)直接影響工蜂王漿腺的發(fā)育。James研究發(fā)現(xiàn),高蛋白的食物對(duì)王漿腺有促進(jìn)作用,適量添加豆粕,可提高蛋白的含量有利于促進(jìn)王漿腺的發(fā)育,但過(guò)高的蛋白對(duì)王漿腺造成一定的抑制作用。SOD是催化氧自由基鏈中第一個(gè)自由基O2-生成H2O2的一種重要的抗氧化酶類(lèi),從而阻止O2-啟動(dòng)的自由基鏈鎖反應(yīng)。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)鏈?zhǔn)浇K止階段產(chǎn)生的小分子產(chǎn)物,脂質(zhì)過(guò)氧化物形成環(huán)狀內(nèi)過(guò)氧化物后斷裂形成烯醛、丙二醛。SOD活性的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的能力,而MDA的高低又間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),20%～35%蛋白水平試驗(yàn)組的T-SOD和MDA與對(duì)照組差異,但15%蛋白水平的試驗(yàn)組的T-SOD顯著低于對(duì)照組,這可能是低蛋白水平飼料直接導(dǎo)致幼蟲(chóng)發(fā)育不良,抗氧化體系功能不足。郭小權(quán)等研究報(bào)道,機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間的采食高能低蛋白飼料導(dǎo)致合成抗氧化物酶的蛋白質(zhì)