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病原微生物檢查標(biāo)本收集、運(yùn)輸把持規(guī)程之阿布豐王創(chuàng)作時(shí)間:七月二十九日對(duì)的的標(biāo)本收集,運(yùn)輸,保管和處置對(duì)微生物檢查工作質(zhì)量至關(guān)重要,為了精確檢出病原菌,避免漏檢與誤診,臨床醫(yī)護(hù)人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握微生物標(biāo)本的選擇,收集,運(yùn)輸,保管及處置的普通原則.一、標(biāo)本收集的普通原則收集時(shí)間最佳在病程早期,急性期,且必需在使用抗菌藥品之前收集,確保病原菌的檢出.收集標(biāo)本時(shí)應(yīng)盡量減少或避免感染部位附近或皮膚黏膜正常菌群的污染,使病原菌與正常菌群混淆,造成臨床誤診.收集的標(biāo)本應(yīng)寄存在無(wú)菌容器內(nèi),容器不能使用消毒劑處置,標(biāo)本中也不能添加防腐劑,以免減少病原菌的檢出.標(biāo)本量過(guò)少可能招致假陰性成果.對(duì)厭氧菌,需氧菌或兼性厭氧菌的收集辦法是分歧的,用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量用注射器收集抽取物,室溫保管,不能冷藏和冷凍.收集標(biāo)本應(yīng)寄存在無(wú)菌,防漏,應(yīng)帶有螺旋蓋的容器內(nèi).二、標(biāo)本的運(yùn)輸1.標(biāo)本收集后立刻送檢,若有延遲也應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室,否則會(huì)影響病原菌的檢出,普通性的細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本若需延遲送檢時(shí),應(yīng)置于4度冰箱保管,且不能超越24小時(shí).2.臨床標(biāo)本最佳運(yùn)輸時(shí)間取決于標(biāo)本的量,少量液體(不大于1ml)或組織(不大于1cm3)應(yīng)在15~30分鐘內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室,較多量的標(biāo)本置于運(yùn)輸培養(yǎng)基中可放12~24小時(shí),厭氧培養(yǎng)標(biāo)來(lái)源根基則上是床邊接種,如延遲送檢,需保管在厭氧運(yùn)輸培養(yǎng)基中,室溫保管,不得超越24小時(shí).三、分歧標(biāo)本的收集,運(yùn)輸(一)血液標(biāo)本收集,運(yùn)輸當(dāng)患者呈現(xiàn):發(fā)熱(年夜于38度)或高溫(不大于36度),寒戰(zhàn),白細(xì)胞增多,皮膚黏膜出血,休克,多器官衰竭,血壓減少,c反映卵白升高及呼吸加緊,血液病患者呈現(xiàn)粒細(xì)胞減少,血小板減少等,含有上述一種或幾個(gè)體征時(shí),臨床懷疑菌血癥應(yīng)收集血液標(biāo)本進(jìn)行血培養(yǎng),對(duì)入院危重感染患者應(yīng)在未使用抗菌藥品治療前,及時(shí)做血培養(yǎng).2.對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥的患者,在考慮使用抗菌藥品之前,應(yīng)立刻收集血培養(yǎng)標(biāo)本.必需同時(shí)或間隔短時(shí)間內(nèi)收集2套以上血培養(yǎng)標(biāo)本.成年患者:推薦同時(shí)收集2-3套(分歧部位)血培養(yǎng)標(biāo)本(即雙瓶雙臂同時(shí)收集血培養(yǎng)標(biāo)本),采血量每瓶諸多于5ml;嬰幼兒患者:推薦同時(shí)收集2次(分歧部位)血培養(yǎng)標(biāo)本,采血量每瓶諸多于2ml.(少于病人總血容量的1%).在采用血培養(yǎng)后的2—5天內(nèi),無(wú)需重復(fù)采用血培養(yǎng).兩個(gè)例外:細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥.
3.血標(biāo)本收集的量是影響檢出率的最重要的因素.檢出率與采血量成比例增加,每增加1ml的血液,病原菌的檢出率就會(huì)對(duì)應(yīng)增加.小朋友患者血液中病原菌濃度較高,血培養(yǎng)量無(wú)需同即是成人.采納一對(duì)(需氧瓶+厭氧瓶)組合,比采納二個(gè)需氧瓶的組合可檢出更多的葡萄球菌、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌.采血量不能滿足推薦的量時(shí),應(yīng)首先滿足需氧瓶的需要.
推薦從外周靜脈收集血液標(biāo)本,不推薦靜脈留置導(dǎo)管,因其常陪伴高污染率.如果必需從留置導(dǎo)管內(nèi)采血,也應(yīng)同時(shí)從外周靜脈收集另外一種血培養(yǎng)標(biāo)本以幫手陽(yáng)性成果的判讀.在采血之前,血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒并干燥.然后再進(jìn)行穿刺部位的皮膚消毒.嚴(yán)格根據(jù)“酒精、含碘消毒劑、酒精”的消毒步伐把持,并等待足夠的消毒時(shí)間.嚴(yán)格無(wú)菌把持,不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈,除非帶有無(wú)菌手套.不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭;收集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時(shí)之內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室,血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍.(二)痰培養(yǎng)標(biāo)本收集,運(yùn)輸上呼吸道感染涉及咽炎,喉炎,會(huì)咽炎等都可收集鼻,鼻咽,口咽拭子標(biāo)本培養(yǎng).下呼吸道感染:但凡咳嗽,咳痰,痰呈膿性,粘稠或血性等都可收集痰標(biāo)本.收集前囑咐病人先用清水漱口,摘去牙托,因唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml,去除概況的菌群.教育病人深咳,收集從下呼吸道咳出的痰液.在抗生素應(yīng)用前收集痰標(biāo)本;標(biāo)本收集后1~2h內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處置,收集標(biāo)本過(guò)程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo);無(wú)痰可用3%~5%NaCl
5ml霧吸約5min導(dǎo)痰;也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等辦法取痰.低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞不大于25個(gè),白細(xì)胞年夜于10個(gè).如果低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞年夜于25個(gè),白細(xì)胞不大于10個(gè)應(yīng)不做或僅在特殊規(guī)定時(shí)做培養(yǎng),如做培養(yǎng),陳說(shuō)中注明“鏡檢成果標(biāo)明標(biāo)本口咽分泌物污染明顯”.4痰培養(yǎng)辦法的局限性大都引發(fā)肺炎的病原菌不能培養(yǎng)出,如病毒,軍團(tuán)菌,衣原體等.影響因素諸多:如黏液包裹、定植菌污染.建議痰培養(yǎng)同時(shí)做血培養(yǎng)和痰涂片鏡檢.慣例的痰培養(yǎng)需在2小時(shí)內(nèi)送檢,若懷疑嗜血桿菌,肺炎鏈球菌感染時(shí)必需隨留隨送;標(biāo)本中不能混入唾液與鼻咽分泌物等.(三)尿培養(yǎng)標(biāo)本收集,運(yùn)輸尿路感染,腎結(jié)核,泌尿系結(jié)石,膀胱排空功效受損或前列腺增生等患者,呈現(xiàn)尿頻,尿急,尿痛等膀胱安慰癥狀,肉眼膿尿或血尿,尿慣例檢查有白細(xì)胞或亞硝酸鹽陽(yáng)性,,不明因素的發(fā)熱,尿道口有膿性分泌物等癥狀,需收集尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢.清潔中段尿液,囑咐患者用肥皂水清洗,棄去開(kāi)始流出的尿液,以沖刷尿道口的細(xì)菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿;導(dǎo)尿管尿液,留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本常通過(guò)專門的采樣端口收集,不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開(kāi)后收集尿液,采樣端口用酒精消毒;需要時(shí),可先夾住導(dǎo)尿管但不能超越30分鐘;將注射器針頭拔出采樣端口,抽吸出尿液;注入無(wú)菌杯或試管中.膀胱穿刺尿,無(wú)菌把持,用無(wú)菌注射器刺入膀胱抽取5—10ml尿液送檢,重要用于厭氧菌的培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰幼兒標(biāo)本的收集,此法可避免尿液標(biāo)本的污染.普通成人收集10-15ml,嬰幼兒不得少于1ml.診療癥狀明顯的病人(如尿急、尿頻、尿痛),一份標(biāo)本就已足夠,治療48-72小時(shí)后再收集第二份標(biāo)本.對(duì)癥狀不明顯的病人,需收集2-3份標(biāo)本.懷疑腎結(jié)核時(shí),應(yīng)持續(xù)3天收集晨尿.4.室溫都有助于病原菌和污染菌生長(zhǎng)繁殖,標(biāo)本收集后立刻送檢和接種,室溫下寄存不能超越2小時(shí),(夏季保管時(shí)間應(yīng)適宜縮短或冷藏),4-8度冷藏保管時(shí)間也不能超越24小時(shí),冷藏的尿液不能用于淋球菌的培養(yǎng).5.注意事項(xiàng)必需無(wú)菌把持,采納帶蓋防滲漏的無(wú)菌杯收集,多次收集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng).集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng).導(dǎo)尿管末真?zhèn)€尿液也不能用于培養(yǎng),很難避免沒(méi)有尿道菌群污染.在使用抗菌藥品前留取標(biāo)本,尿液中不能加任何防腐劑或消毒劑,克制細(xì)菌的生長(zhǎng).(四)糞便標(biāo)本收集,運(yùn)輸當(dāng)患者呈現(xiàn)腹瀉,年夜便每天年夜于或即是3次,糞便的性狀異常,可為稀便,水樣便,粘液便,膿血便或血便,陪伴惡心,嘔吐,食欲不振,發(fā)熱,腹痛及全身不適等,年夜便鏡檢白細(xì)胞年夜于即是5個(gè)每高倍視野,抗菌藥品治療后的腹瀉等.
2.標(biāo)本的收集辦法,時(shí)間與量盡量在發(fā)病早期(急性期)或應(yīng)用抗菌藥品治療之前,收集新鮮的糞便,懷疑沙門菌感染時(shí),應(yīng)在發(fā)病2周后來(lái)收集.自然排便法,排便后,挑取有膿血或粘液部位的年夜便,液狀糞便取絮狀物盛于無(wú)菌的容器內(nèi);直腸拭子收集法,用于排便困難的患者或嬰幼兒.普通用拭子收集年夜于2g的標(biāo)本送檢,若標(biāo)本為水樣,收集年夜于2ml的標(biāo)本于無(wú)菌容器中送檢.3.標(biāo)本的運(yùn)輸與保管標(biāo)本收集后應(yīng)盡快送檢,室溫條件下不能超越2小時(shí),如不能及時(shí)送檢可加入ph7.0磷酸鹽甘油緩沖保管液中或?qū)iT的年夜便運(yùn)輸培養(yǎng)基中置4度冰箱保管,但不能超越24小時(shí).高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本必需符合特殊標(biāo)本的平安規(guī)定.最佳在用藥前,收集新鮮的標(biāo)本盛裝在無(wú)菌容器內(nèi),立刻送檢,提高陽(yáng)性檢測(cè)成果.厭氧菌的培養(yǎng)盡量避免與空氣接觸和正常的菌群污染.(五)膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本的收集及運(yùn)輸?shù)伯?dāng)患者有外傷感染,術(shù)后切口感染,導(dǎo)管感染,臍帶殘端感染,有膿液和分泌物時(shí),應(yīng)收集標(biāo)本培養(yǎng).
在使用抗生素前或停用藥1—2天后來(lái),或使用下一次抗生素前收集,對(duì)膿腫性分泌物應(yīng)先用生理鹽水或75%的酒精沖刷潰瘍概況滲出物,盡量抽取膿液于無(wú)菌杯內(nèi)送檢.對(duì)封閉性膿腫時(shí),應(yīng)無(wú)菌把持抽取膿液3—10ml于無(wú)菌試管內(nèi)或血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)送檢,懷疑厭氧菌感染時(shí),應(yīng)做床旁接種或注入?yún)捬跗績(jī)?nèi)(3—10ml)送檢,最佳辦法是收集組織送檢.標(biāo)本收集后應(yīng)于2小時(shí)內(nèi)送微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處置,若不能及時(shí)送檢,需氧培養(yǎng)的標(biāo)本除對(duì)環(huán)境敏感的淋病奈瑟菌,腦膜炎奈瑟菌和流感嗜血桿菌外,可保管在4度冰箱中,但保管時(shí)間不能超越24小時(shí);厭氧培養(yǎng)時(shí),需用厭氧瓶或厭氧袋在室溫下保管,但不能超越24小時(shí).
盡量在用抗生素前收集,若患者也用藥,應(yīng)在檢查單上注明抗菌藥名,并在下次用藥前收集;對(duì)開(kāi)放性的傷口,收集前應(yīng)先除去概況污染菌,以防帶入與感染無(wú)關(guān)的皮膚定值菌.干燥結(jié)痂的標(biāo)本普通不做培養(yǎng),除非有滲出物.收集標(biāo)本時(shí)應(yīng)無(wú)菌把持.(六)穿刺液標(biāo)本的收集與運(yùn)輸穿刺液重要涉及腦脊液,胸腹水,心包液,膽汁,關(guān)節(jié)液及鞘膜液,在正常標(biāo)本中,上述液體是無(wú)菌的,在排除污染的狀況下,一旦檢出細(xì)菌均視
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