微生物的分離純化

微生物的分離純化食品微生物檢驗技術

—1—微生物分離純化原理一微生物分離純化方法二

目錄頁分離純化操作步驟三

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微生物分離純化原理一1.純培養(yǎng)和分離純化2.分離純化原理

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微生物的純培養(yǎng)和分離純化

在微生物學中，在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體稱為培養(yǎng)物，含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物，而只有一種微生物的培養(yǎng)物稱為純培養(yǎng)物。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞，那么這個菌落稱為純培養(yǎng)。在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物，得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化，微生物的分離純化技術

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微生物分離純化原理

在自然界中，不同種類的微生物絕大多數(shù)都是混雜生活在一起的，為了生產(chǎn)和科學研究的需要，須從混雜的微生物中分離得到某一種微生物，這種獲得純培養(yǎng)物的方法稱為微生物的分離與純化。分離純化微生物的方法有很多種，但基本原理相似，一般是將待分離的樣品進行一系列的稀釋，使稀釋樣品中的微生物或孢子呈分散狀態(tài)，然后在適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下長出單菌落，再將單菌落轉(zhuǎn)移培養(yǎng)。重復此過程二、三次便可獲得純種微生物。微生物的分離純化技術

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微生物分離純化方法二1.稀釋平板法2.涂布平板法3.平板劃線分離法

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微生物分離純化方法微生物的分離純化技術1.稀釋平板法先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000、1:10000…)，然后分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時間即可出現(xiàn)菌落。如果稀釋得當，在乎板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落，或重復以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。

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微生物分離純化方法微生物的分離純化技術2.涂布平板法由于將含菌材料先加到還較燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且采用稀釋倒平板法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。其做法是先將已熔化的培養(yǎng)基倒無菌平皿，制成無菌平板，冷卻凝固后，將一定量的某一稀釋度的樣品懸液滴加在平板表面，再用無菌玻璃涂棒將菌液均勻分散至整個平板表面，經(jīng)培養(yǎng)后挑取單個菌落。

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微生物分離純化方法微生物的分離純化技術3.平板劃線分離法把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。有時這種單菌落并非都由單個細胞繁殖而來的，故必須反復分離多次才可得到純種。

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分離純化操作步驟三1.稀釋平板法2.涂布平板法3.平板劃線分離法

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分離純化操作步驟微生物的分離純化技術1.稀釋平板法

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分離純化操作步驟微生物的分離純化技術1、取樣2、沾燃燒酒精3、灼燒4、涂布2.涂布平板法

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分離純化操作步驟微生物的分離純化技術3.平板劃線分離

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平板劃線分離法微生物的分離純化技術

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操作標準微生物的分離純化技術內(nèi)容評價標準分值準備工作物品擺放齊全；手消毒方法正確10手握斜面握持試管方法正確、斜面向上10接種環(huán)滅菌接種環(huán)拿法正確、接種環(huán)先直立后傾斜灼燒、金屬環(huán)燒紅、接種環(huán)來回過火數(shù)次，可能進入試管部分都要灼燒到10拔棉塞先松動棉塞、棉塞正確夾緊，棉塞不被污染；試管口微燒一周10取菌種接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)先冷卻；輕取菌少許；接種環(huán)抽出時不碰管壁及通過火焰10塞棉塞試管口微燒一周；回塞時試管不迎棉塞10拿培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿拿法正確；開蓋方法正確、開口小10劃線劃線疏密適當、不重疊；劃線時培養(yǎng)基不被劃破；劃線分區(qū)合理、最后一區(qū)與第一區(qū)不相連。20劃線完畢灼燒試管口，在火焰旁將棉塞塞上；接種環(huán)上的余菌在火焰上徹底燒死。10合計100

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注意事項1.接種操作時要使試管口或培養(yǎng)皿靠近火焰旁上方區(qū)域（即在無菌區(qū)內(nèi)）。2.在固體培