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最全的各種細胞計數(shù)方法總結,趕緊收藏隨著醫(yī)學檢驗技術的不斷發(fā)展,曾經(jīng)每個檢驗人必須掌握的各類細胞手工計數(shù)方法都被各種儀器所替代了,現(xiàn)在醫(yī)院檢驗科年輕點的同志可能都不知道紅細胞、白細胞等手工計數(shù)的方法了??赡苣贻p人不服氣了說,現(xiàn)在都有儀器來做哪還需要掌握這個?No,No,No,小編告訴大家,其實掌握這些其實非常實用的,先進的儀器固然能為我們及時快速的提供檢驗結果,但是當儀器對細胞計數(shù)分類出現(xiàn)異常時,手工顯微鏡檢查就顯的尤為重要。大家可以通過每年檢驗職稱考試都會出現(xiàn)這種類型的題目就會發(fā)現(xiàn)?,F(xiàn)在小編給大家總結下各類細胞的手工計數(shù)原理及方法,供大家參考。一、紅細胞計數(shù)原理:用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),充入血細胞計數(shù)池,計數(shù)一定體積內的紅細胞,經(jīng)換算求出每升血液中紅細胞數(shù)量。2.操作:1)取中號試管1支,加紅細胞稱釋液2.0ml2) 用清潔干燥微量吸管取末梢血10山擦去管外余血后加至紅細胞稀釋液底部,再輕吸上層清洗吸管2-3次立即混勻。3) 混勻后,用干凈微量吸管將紅細胞懸液充人計數(shù)池,不得有空泡或外溢,充池后靜置2-3min后計數(shù)4)高倍鏡下依次計數(shù)中央大方格內四角和正中共5個中方格內的紅細胞。對壓線細胞按“數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右”的原則進行計數(shù)。3.計算:紅細胞數(shù)/L=5個中方格內紅細胞數(shù)x5x10x200x106=5個中方格內紅細胞數(shù)x10io=5個中方格內紅細胞數(shù)^100x1012公式中:x55個中方格換算成1個大方格;x10 1個大方格容積為0.1|jI,換算成1.0|jI;x200血液的實際稀釋倍數(shù)應為201倍,按200是便于計算;x106由lpl換算成1L。二、白細胞計數(shù)原理:用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),充入血細胞計數(shù)池,計數(shù)一定體積內的白細胞,經(jīng)換算求出每升血液中紅細胞數(shù)量。方法)取小試管l支,加白細胞稀釋液0.38ml。)用微量吸管準確吸取血樣20pl,擦去管外多余血液,將吸管插入小試管中稀釋液的底部,輕輕將血放出,并吸取上清液清洗吸管兩次,混勻。3) 待紅細胞完全被破壞,再次混勻后,用微量吸管吸取混勻液10pl充池,靜置2-3分鐘,待白細胞下沉。4) 用低倍鏡計數(shù)四角大方格內的白細胞數(shù),對壓線細胞按“數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右”的原則進行計數(shù)。為每個大方格(即為每個大方格(即0.1|j|)內白細胞平均數(shù)1個大方格容積為0.1pl,換算為1.0pl血液稀釋倍數(shù)由1pl換算成1L—URII 計算:白細胞數(shù)/L二N/4x10x20x106二N/20x10g公式中:N4個大方格中白細胞的總數(shù)三4x10x201064.一些貧血患者血液中有核紅細胞增多,會計數(shù)在白細胞總數(shù)內,應校正。校正公式:白細胞校正數(shù)/L=Mx(100/100+N)M位未校正前白細胞數(shù),N未在白細胞分類時,計數(shù)100個白細胞的同時計數(shù)到的有核紅細胞數(shù)三、血小板計數(shù)原理:將血液用適當?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入計?shù)池內計數(shù),再算出每升血液中血小板數(shù)。方法:

1)小試管內加血小板稀釋液0.4ml。取動物靜脈血20mm3,迅速擠于稀釋液內,立即充分搖勻。)放置4-10min,待溶液呈透明紅色,說明紅細胞已經(jīng)充分溶解,充分搖勻,取1小滴加入計數(shù)池。)放置10-15min,待血小板完全下沉后,先將中央大方格移至低倍鏡視野內,再轉以高倍鏡,數(shù)5個中方格內的血小板數(shù)。4)血小板大小形態(tài)不一致,但均呈折光的發(fā)亮淡藍色小點,大小約紅細胞的1/7-1/2,呈不規(guī)則圓形或長圓形。在計數(shù)時必須來回扭動顯微鏡微調,不要遺漏計數(shù)。;0.005mml/20min3計算:5個中方格血小板總和x1/50mm3(5個中方格的體積)x1/20(稀釋倍數(shù))=1/1000mm3。故5個中方格的總和x1000=lmm3血液的血小板數(shù)。PLT/L=5個中方格內PLT(N)x109/L二Nx5x10x20x106/L公式中:N5個中方格中血小板的總數(shù);x55個中方格換算成1個大方格;x101個大方格容積為0.1pl,換算為1.0plx20血液稀釋倍數(shù)106由1川換算成1L

四、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)1.原理:網(wǎng)織紅細胞是未完全成熟的紅細胞,包體較一般紅細胞稍大,胞漿中尚有嗜堿性殘存物質,可被煌焦油藍等染成藍色顆粒狀和線狀及網(wǎng)狀結構物。網(wǎng)織紅細胞的數(shù)量可用百分率或每立方毫米血液中的絕對值數(shù)方法1)血膜片制備:2)染色:取試管一支,用毛細管或槍頭于試管中加入染液2~5滴,然后再加入新鮮血液1滴輕搖混合,染色10~15min。3)制片:取載物片一片,用毛細管或槍頭吸取血液染色液1小滴于載物片上,并用推片約45度角推制成舌型血膜片,自然干燥備用。4)觀察:用顯微鏡觀察,取血膜片滴入香柏油1滴,將血膜片置于顯微鏡載物臺,用油鏡觀察網(wǎng)織紅細胞Ret%=月內網(wǎng)織紅細胞數(shù)冥口族9xA內紅細胞數(shù) ’Ret=RBCXRet%3計數(shù)取計數(shù)器在油鏡下檢查計數(shù)紅細胞,即計數(shù)紅細胞中網(wǎng)織紅細胞的數(shù)量,檢查計數(shù)100個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞的數(shù)量,并得出千分率再除以10即為百分率。計算公式:網(wǎng)織紅細胞百分率=10/1000個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞的數(shù)量五、嗜堿性點彩紅細胞計數(shù)實驗原理紅細胞中的嗜堿性物質用瑞氏或美藍染液顯示出紅細胞中的藍色點彩、然后計數(shù)點彩紅細胞占紅細胞總數(shù)的百分數(shù)。方法1)用通常的方法制成薄血膜,干燥后用甲醇固定,2)用堿性美益藍染40s水洗,晾干。3)用低倍鏡選擇紅細胞分布均勻的部位,然后換油色計數(shù),紅細胞呈強藍色,點彩顆粒呈深藍色.3、計數(shù)方法:基本與網(wǎng)織紅細胞相同,計數(shù)50個視野中的點彩紅細胞同時計數(shù)其中5個視野的紅細胞總數(shù),即可算出點彩紅細胞的百分數(shù),如用瑞氏染色其方法同血片染色。計算公式:點彩紅細胞百分率=10/1000個紅細胞中點彩紅細胞的數(shù)量六、腦脊液(胸腹水)有核細胞計數(shù)原理(1) 清亮或微渾的腦脊液(胸腹水)標本,可以直接計數(shù)細胞總數(shù),或稀釋后再直接計數(shù),將結果乘以稀釋倍數(shù)。(2) 可采用直接計數(shù)法計數(shù)白細胞,或稀釋后再直接計數(shù),將結果乘以稀釋倍數(shù)。(3) 白細胞直接計數(shù)后,在高倍鏡下根據(jù)白細胞形態(tài)特征進行分類計數(shù)。也可采用Wright染色后,油鏡下分類計數(shù)。方法(1) 非血性標本:小試管內加入冰醋酸1~2滴,轉動試管,使內壁沾有冰醋酸后傾去,然后滴加混勻腦脊液3(胸腹水)~4滴,數(shù)分鐘后,混勻充人計數(shù)池,按血液白細胞計數(shù)法計數(shù)。(2) 混濁或血性標本:將混勻腦脊液(胸腹水)用1%冰醋酸溶液按血液白細胞計數(shù)法稀釋后進行計數(shù)。計算為剔除因出血而來的白細胞數(shù),用下式公式進行校正。腦脊液(胸腹水)白細胞校正數(shù)=腦脊液(胸腹水)白細胞計數(shù)值一出血增加的白細胞數(shù)出血增加的白細胞數(shù)二外周血白細胞數(shù)X腦脊液(胸腹水)紅細胞數(shù)/外周血紅細胞數(shù)4.公式4.公式1)澄清標本按血液白細胞計數(shù)法計數(shù)換算略麻煩,直接計數(shù)5個大方格比較方便,此時腦脊液(胸腹水)白細胞數(shù)/L二Nx2x10e6/L=2Nx10e6/LN表示5個大方格內的白細胞總數(shù)x2:5個大方格的容積為0.1x5=0.5ul,換算為1.0ul只需要乘以x10e6:由1.0uI換算為1L;也可以充兩個計數(shù)室,計數(shù)10個大方格2)渾濁/血性標本腦脊液(胸腹水)白細胞數(shù)/L=Nx2x20x10e6/L=40Nx10e6/Lx2:將5個大方格的白細胞數(shù)換算為1.0ul的白細胞數(shù);x20:腦脊液(胸腹水)的稀釋倍數(shù);x10e6:由1ul換算為1L;也可以充兩個計數(shù)室,計數(shù)10個大方格。七、精子計數(shù)1.原理:將精液用適當?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入計?shù)池內計數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照最新版第四版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》)1) .于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20M加入稀釋液內混勻。2) .充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數(shù)。3.計算1).如每

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