提取物雜質(zhì)、中藥材等藥物的雜質(zhì)檢查

第三章藥物的雜質(zhì)檢查第一節(jié)概述主要內(nèi)容：主要講授藥物的一般雜質(zhì)檢查和特殊雜質(zhì)檢查，并介紹固體制劑的含量均勻度檢查法和溶出度測(cè)定法。雜質(zhì)定義：是指藥物中存在的無治療作用或影響療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。雜質(zhì)分類：分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)一般雜質(zhì)：指自然界中分布較廣，容易引入的雜質(zhì)，如酸、堿、水分，重金屬等。檢查方法：一般在藥典附錄中。特殊雜質(zhì)：在個(gè)別藥物生產(chǎn)，貯存過程中引入的，如阿司匹林中的水楊酸。檢查方法：一般放在藥典的正文中。雜質(zhì)檢查的意義：藥物中含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素，雜質(zhì)增多，不但可以使藥物含量和活性降低，毒副作用增加，而且還可能使藥物發(fā)生理化常數(shù)，外觀性狀的變化，因此有必要對(duì)雜質(zhì)做檢查。但雜質(zhì)檢查要求不能太高，要求太高，會(huì)增加生產(chǎn)成本，同時(shí)我們講要求也不能太低，太低，會(huì)影響藥物的療效，影響健康，人就不安全了。所以雜質(zhì)檢查必須在有利于生產(chǎn)的前提下，不影響療效，不影響健康，制訂恰當(dāng)?shù)臋z查項(xiàng)目和限度。明確應(yīng)該檢查什么？量是多少？藥物中的雜質(zhì)是影響藥物純度的因素，所以我們講雜質(zhì)檢查，也叫純度檢查。第二節(jié)藥物中雜質(zhì)的來源和雜質(zhì)限量計(jì)算一、藥物中雜質(zhì)的來源1、生產(chǎn)過程中引入A、 原料不純B、 有一部分原料沒有反應(yīng)完全C、 反應(yīng)中間產(chǎn)物和副產(chǎn)物在精制時(shí)沒有除凈D、 與生產(chǎn)器皿接觸均會(huì)不同程度地引入雜質(zhì)例：用水楊酸為原料合成阿司匹林，由于反應(yīng)不完全，可能引入水楊酸雜質(zhì)，或者反應(yīng)中間產(chǎn)物，使用金屬器皿，可引入鐵、銅、鋅等金屬雜質(zhì)。2、貯存過程中引入藥物在貯存過程中受溫度、濕度、日光、空氣、微生物等外界條件的影響，發(fā)生水解、氧化、分解、聚合、并異構(gòu)化、發(fā)霉等變化，產(chǎn)生雜質(zhì)。例：阿司匹林水解產(chǎn)生水楊酸維生素C見光f氧化f顏色變黃麻醉用乙醚f日光f氧化f有毒的過氧化物四環(huán)素f酸性條件下f發(fā)生差向異構(gòu)化，毒性增高，如梅花K膠囊事件微生物污染f發(fā)霉f引起內(nèi)毒素，如輸液反應(yīng)？上海某廠生產(chǎn)的輸液，細(xì)菌無處不在。二、雜質(zhì)限量藥物中只要不對(duì)人體有害，不會(huì)影響療效和藥物的穩(wěn)定性，允許有一定量的雜質(zhì)存在。一般我們不測(cè)定其準(zhǔn)確含量（到底有多少量）我們只測(cè)定其最大允許量（有沒有超過最大允許量）f所以雜質(zhì)檢查，我們也稱為限度檢查。雜質(zhì)限量定義：是指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用大于、小于或等于百分之幾或百萬分之幾表示，%PPM操作：取一定量待檢雜質(zhì)的純品或?qū)φ掌罚ㄖ袊?guó)生物制品檢定所提供）配成標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時(shí)取一定量供試品配成供試品溶液，經(jīng)同樣處理后，比較結(jié)果。注意：同樣處理是指加同樣的溶劑，同樣量的溶劑稀釋到同一容量等。

沉淀顏色斑點(diǎn)沉淀顏色斑點(diǎn)比濁法比色法大小比較顏色深淺比較等等雜質(zhì)限量計(jì)算：雜質(zhì)限量%=允許雜質(zhì)存在的最大限量/供試品的量X100%雜質(zhì)限量%=允許雜質(zhì)存在的最大限量/供試品量X106供試品中雜質(zhì)限量二標(biāo)準(zhǔn)溶液體積x標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度雜質(zhì)限量用L表示；體積用V表示；濃度用C表示；則公式為：V.CL%二――x100%Ms、、——或L%二――X106Ms（1）藥品中雜質(zhì)限量的計(jì)算L舉例1：檢查對(duì)乙酰氨基酚中的氯化物，取對(duì)乙酰氨基酚2.0g，加水100ml，加熱溶解，冷卻，濾過，取濾液25ml，依法檢查氯化物，所產(chǎn)生的渾濁與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0ml（每1ml相當(dāng)于10ug的Cl-）制成的對(duì)照液比較，不得更濃，問氯化物的限量？L%=——L%=——x100%=Ms5.0mlx10ug/mlx10-62.0g/100mlX2.5mlx100%=0.01%（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液體積的計(jì)算V舉例2：檢查葡萄糖中的重金屬，取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解，加醋酸鹽緩

沖液（PH3.5）2ml，依法檢查重金屬，含重金屬不得超過百萬分之無，問應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每lml含鉛10ug）多少毫升？“L.S5x10-6x4.0g小,V二二 '二2mlC 10x10-6g/ml（3）供試品克數(shù)的計(jì)算S舉例3：中國(guó)藥典規(guī)定檢查砷鹽時(shí)，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0ml（每lml相當(dāng)于lug的AS）制備的標(biāo)準(zhǔn)砷斑，今依法檢查溴化鈉中的砷鹽，規(guī)定含砷量不得超過0.0004%，問應(yīng)取供試品多少克？C.V1x10-6g/mlx2.0mlS= = =0.5gL 4x10-6（4）標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的計(jì)算C舉例4精密稱取三氧化二砷0.1320g，置1000ml容量瓶中，加NaOH溶液（1—5）5ml，溶解，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液，臨用前，精密量取貯備液10.00ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即配成標(biāo)準(zhǔn)砷溶液，求砷貯備液的濃度和標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的濃度（ug/ml）?講解：NaOH溶液（1-5）：NaOH1.0g加水使成5ml的溶液。乙醇-水（1：5）：乙醇和水混合，以1：5體積比混合。砷貯備液濃度=0.1320x106ugx砷貯備液濃度=0.1320x106ugx2AsAsO2―31000ml=100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的濃度=10mlxlOOug/ml1000ml=1ug/ml要求：復(fù)雜計(jì)算舉例：今取溴化鈉0.5g，檢查砷鹽，與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0ml制備的標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較,不得超過規(guī)定限量（0.0004%）。L.SL.SV0.5gx0.0004%2.0ml=1ug/ml5）特殊雜質(zhì)限量計(jì)算舉例5：取磷酸可待因0.10g，按中國(guó)藥典（1995）檢查嗎啡限量的比色法配成供試品溶液，用無水嗎啡2mg，加鹽酸（9—100）配成100ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，取此標(biāo)準(zhǔn)溶液5.0ml，按同一方法制成對(duì)照液檢查結(jié)果，供試品溶液與對(duì)照品溶液比較,不得更深，求磷酸可待因中嗎啡的限量是多少？C.VC.V0.10x103mgx100%=0.10%第三節(jié)一般雜質(zhì)的檢查定義：一般雜質(zhì)是指在自然界中分布比較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)或貯存過程中容易引入的雜質(zhì)。檢查方法：一般在藥典的附錄中加以規(guī)定。一般雜質(zhì)的檢查項(xiàng)目有：PH值，溶液的澄清毒，顏色、氯化物、硫酸鹽、重金屬等……本章主要掌握各雜質(zhì)檢查的方法、原理、反應(yīng)條件及試驗(yàn)注意點(diǎn)等?。?！一、氯化物檢查法1、 檢查意義氯化物極易引入，雖然微量氯化物對(duì)人體無害，但檢查氯化物含量，可以考察藥品的純雜程度，也就是說，控制氯化物的量，可以提高或保證藥品的純度，因此我們認(rèn)為氯化物是一種“指示性雜質(zhì)”。2、 檢查原理和反應(yīng)條件硝酸 I原理：Cl-+Ag+一AgC”白色沉淀方法：

供試品+ AgNO3標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液供試品+ AgNO3標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液察，比濁氯化銀沉淀丫黑色背景下，垂直向下觀講解：納氏管（介紹）加硝酸作用：為什么加硝酸，不加鹽酸、硫酸或其他酸？1、可消除SO2-、CO2-、PO3-、CO2-、BO-等雜質(zhì)離子的干擾；3342422、 可加速氯化銀沉淀的生成；3、 可改善氯化銀渾濁的均一性，提高檢查準(zhǔn)確毒。在50ml溶液中以含硝酸10ml為宜，過多會(huì)增大氯化銀的溶解度而降低反應(yīng)靈敏度。試驗(yàn)注意點(diǎn)：1、 為了控制氯化銀見光分解，應(yīng)在暗處放置5min；2、 如供試品是堿性，應(yīng)先中和為中性，再作檢查；3、 如供試品中含I-、Br-,應(yīng)先除去I-、Br-；I-+Ag+ aAgl丫Cl-+Ag+ ?AgCl]碘化銀沉淀不溶于稀氨水，而氯化銀沉淀可溶于稀氨水，然后可用堿恢復(fù)，再按常規(guī)檢查氯化物；Br-離子則可加入HO，氧化成Br，然后蒸除。2224、 如供試品中有KMnO，加乙醇脫色后檢查；45、 供試品如有顏色，則采用內(nèi)消色法

供試品Cl-分兩份Ag+Ag+比濁二、硫酸鹽檢查法1、檢查原理SO4SO42-+Ba2+白色渾濁BaSO白色渾濁4試劑：BaCl2標(biāo)準(zhǔn)溶液：KSO溶液24酸：HC1,鹽酸檢查中所產(chǎn)生的渾濁程度與硫酸鹽雜質(zhì)的含量，硫酸鋇微粒大小有關(guān)，所以應(yīng)嚴(yán)格控制試驗(yàn)條件：1、 酸度：規(guī)定50ml溶液中加入稀鹽酸2ml,PH12、 BaCl濃度：25%BaCl試液,產(chǎn)生的渾濁度較穩(wěn)定223、 標(biāo)準(zhǔn)KSO溶液用量：以1.0~5.0ml為宜，供試品取用量應(yīng)相匹配244、 加入BaCl試液后，應(yīng)立即搖勻；25、 黑色背景下，從上而下觀察。三、硫化物檢查法1、檢查原理供試品中的硫化物與稀鹽酸在80~90°C作用10min,生成硫化氫氣體，與醋酸鉛試紙作用生成黑色的硫化鉛斑點(diǎn)，稱為硫斑。與標(biāo)準(zhǔn)硫化鈉溶液比較,NaS2S2++2H+ -HS2HS+Pb2+ -PbS+2H+2、儀器裝置D旋塞、E蓋子之間有醋酸鉛試紙頸長(zhǎng)：18CM3、試劑配制醋酸鉛試紙制備：取醋酸鉛10g-加新煮沸過的冷水溶解一加醋酸溶解一加新沸冷水至100mlf濾紙條浸濕后取出一100°C干燥，即得新煮沸冷水：為了防止水中少量的CO、S2-等。2標(biāo)準(zhǔn)硫化鈉溶液制備：NaS1g—加水200ml —測(cè)定后一稀釋每1ml含硫5ug的標(biāo)準(zhǔn)溶液2為什么要測(cè)定后稀釋：因硫化鈉易潮解，—所以要測(cè)定其實(shí)際含量4、檢查操作供試品1m放入A瓶中標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液 一加水10ml、稀鹽酸10ml—迅速裝好導(dǎo)氣管C一80~90C水浴10min一比較硫斑顏色注意：試驗(yàn)前導(dǎo)氣管應(yīng)事先裝好醋酸鉛試紙。四、硒鹽檢查法1、檢查原理

有機(jī)藥物f有機(jī)破壞硝酸溶液吸收鹽酸羥胺還原氧瓶燃燒）SeO+HO 有機(jī)藥物f有機(jī)破壞硝酸溶液吸收鹽酸羥胺還原氧瓶燃燒）SeO+HO HSeO3 2 2 4HSeO+2NHOH?H2SeO3+N2+3H2O2 4 2 2 3 2 2二氨基萘 -反應(yīng)10min4.5-苯并苯硒二唑標(biāo)準(zhǔn)亞硒酸鈉環(huán)己烷提取紫外掃描 -波長(zhǎng)378nm測(cè)定吸收度A比較A供〈A標(biāo)試驗(yàn)注意點(diǎn)：1、 有機(jī)破壞完全，否則影響試驗(yàn)結(jié)果2、 顯色劑二氨基萘易氧化，以新配制為宜3、 PH嚴(yán)格控制在2±0.2以內(nèi)4、 反應(yīng)時(shí)間應(yīng)為100min5、 提取溶劑環(huán)己烷量必須一致五、氰化物檢查法氰化物有劇毒，所以甲丙氨酯、苯妥英鈉等藥物應(yīng)檢查氰化物限量檢查方法有二種：第一方法：改進(jìn)普魯士藍(lán)法儀器裝置如硫化物檢查裝置，不同之處在于將醋酸鉛試紙改為堿性硫酸亞鐵試紙檢查原理：CN-+CN-+H+HCN酸為弱酸：酒石酸Fe2++6HCN+6OH- [Fe(CN)】4-+6HO62亞鐵氰根取下試紙，加FeCl+HCl，5min內(nèi)不顯綠色或藍(lán)色33[Fe(CN)]4-+4Fe3+H+?Fe[Fe(CN)]16 4 63T普魯士藍(lán)如：供試品中CN-〉5ug,就會(huì)出現(xiàn)綠色或藍(lán)色。試驗(yàn)注意點(diǎn)：1、反應(yīng)條件應(yīng)為弱酸性，一般用酒石酸2、 小火加熱微沸l(wèi)min，保證HCN向上揮發(fā)3、 供試品如能分解產(chǎn)生CN-，貝V不能使用此法，如硝普鈉第二法：氣體擴(kuò)散—三硝基苯酚鋰法儀器裝置如P394-3檢查原理：CN-+6HO HCN+OH-2反應(yīng)在室溫下暗處放置過夜22HCN+叫-OLi+NHONCCN22HCN+叫-OLi+NHONCCNNO+HCO3- +OH-異紅紫酸鋰，在500nm波長(zhǎng)處有最大吸收與標(biāo)準(zhǔn)KCN溶液比較試驗(yàn)注意點(diǎn)；1、 溶液PH值應(yīng)為2.45~8.40 -不影響HCN的生成和擴(kuò)散2、 溶液體積應(yīng)為5ml3、 反應(yīng)溫度應(yīng)為25°C，反應(yīng)時(shí)間應(yīng)為15小時(shí)4、 三硝基苯酚鋰試液應(yīng)為1ml,反應(yīng)完全后，加水2ml稀釋5、 做空白試驗(yàn)六、鐵鹽檢查法1、檢查原理采用硫氰酸鹽檢查鐵鹽Fe3+Fe3++ nSCN-—[Fe(SCN)]+3-n n=i?6紅色可溶性硫氰酸鐵配位化合物標(biāo)準(zhǔn)鐵鹽溶液：硫酸鐵銨FeNH(SO).12HO4 4 2 22、反應(yīng)條件、用稀鹽酸調(diào)節(jié)酸性在中性或堿性溶液中，三價(jià)鐵離子易發(fā)生水解Fe3++水解TTH —[Fe(HO)OH]2++H+2 5HO *2棕色水合羥基鐵離子或Fe3++水解3HO2Fe(OH)3J+3H+紅棕色氫氧化鐵沉淀所以要調(diào)節(jié)酸性

一般：50ml溶液中加稀鹽酸4ml為宜注意：調(diào)節(jié)酸性可以使用其他酸，但不能使用氧化性酸，如HNO，如果必須使用，3則在使用后將硝酸除凈。原因：1、因?yàn)橄跛峥梢云茐娘@色劑SCN-13NO3-+ 3SCN13NO3-+ 3SCN-+ioh+3叫2-+3c°216NO5H2°2、亞硝酸與SCN-生成紅色的亞硝酰硫氰化物（NOSCN）,對(duì)結(jié)果測(cè)定有影響HNO2+SCN-+H+」N°SCN+H2O、加過量顯色劑Fe3Fe3+ + nSCN-—[Fe(SCN)]+3-n n=i?6此絡(luò)合反應(yīng)為可逆反應(yīng)加入過量顯色劑，有利于反應(yīng)完全，并且能消除Cl-干擾一般：50ml溶液中加3ml（1-100）顯色劑（3）、加氧化劑，過硫酸銨 （NH）SO4 228作用：1、氧化Fe2+—Fe3+2、防止光線使硫氰酸鐵還原或分解i H+ 丄 |2Fe2+十（NH4）2S2°8 2Fe3++（NH4）2S04+S^2-（4） 、Fe3+含10~50ug含量為宜太深、太淺都不能用肉眼觀察比較（5）提取比色供試管、標(biāo)準(zhǔn)管色調(diào)不同時(shí)，可采用提取比色，用正丁醇或異戊醇提取絡(luò)合物比色。如：檢查枸櫞酸鈉中鐵鹽，為避免枸櫞酸鈉的干擾，加鹽酸3ml使酸度提高，但酸度增加使硫氰酸鐵所呈顏色變淺，故用正丁醇提取后比色，而枸櫞酸鈉則留在水層中不影響。七、砷鹽檢查法中國(guó)藥典中砷檢查法有二種第一種：古蔡氏法（藥典中均用此法），第二種：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（附錄中收載，但不使用）二種方法所采用的還原劑一樣，反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度（25~40°C）,45min都一樣區(qū)別在于顯色劑使用不一樣，結(jié)果比較方法也就不同。一、古蔡氏法1、儀器裝置儀器如硫化物檢查法裝置不同點(diǎn)：1、用溴化汞試紙代替醋酸鉛試紙2、導(dǎo)氣管中加塞醋酸鉛棉花（高度60~80mm）2、檢查原理金屬Zn與酸作用生成新生態(tài)的氫，與藥物中的微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫AsO33- + 3Zn + 9H+ 一 AsH3 + 3Zn2+ + 3H2OAsH遇溴化汞試紙，產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑3AsH3+2HgBr2-2HBr+AsH(HgBr)2黃色砷斑AsH3+3HgBr2-3HBr+As(HgBr)3棕色砷斑5價(jià)砷也能被金屬Zn還原為砷化氫，但生成AsH的速度較3價(jià)砷慢，所以，在3反應(yīng)液中加入碘化鉀、酸性氯化亞錫來還原五價(jià)砷為三價(jià)砷。AsO3-+2I-+2H+疋 AsO3-+I+HO4322AsO34+Sn2++2H++Sn4++HO2AsO33生成I被氧化：2I2+Sn2+ 2I-+ Sn4+4I-+Zn2+ —ZnI42-在形成絡(luò)合物的同時(shí)，消耗Zn2+，有利于AsH反應(yīng)不3斷進(jìn)行總結(jié)：加KI的作用1、還原五價(jià)砷為三價(jià)砷2、 和Zn2+絡(luò)合，有利于AsH的生成33、 抑制銻化氫生成加酸性SnCl的作用21、還原五價(jià)砷為三價(jià)砷2、 與Zn生成鋅錫齊，從而使氫氣均勻連續(xù)發(fā)生3、 抑制銻化氫生成銻化氫可以和溴化汞試紙作用生成銻斑，影響試驗(yàn)結(jié)果。SbH+HgBr2 ”SbH(HgBr)?^HBr3 2 2在試驗(yàn)條件下，由于加了KI、SnCl，供試品中有l(wèi)OOug的銻存在也不會(huì)干擾測(cè)2定結(jié)果醋酸鉛棉花的作用：如果供試品中含有少量硫化物，則會(huì)產(chǎn)生HS氣體，干擾試驗(yàn)結(jié)果2S2-+2H+ HS2H2S+HgBr2—*HgS+2HBr.2...2■■■■所以，加入醋酸鉛棉花來吸收硫化氫氣體H2S+Pb(Ac) PbS+2HAc22醋酸鉛棉花用量多或塞得過緊會(huì)影響AsH的通過，用的少或塞得松，則不能完3全吸收HS氣體；2中國(guó)藥典規(guī)定：醋酸鉛棉花用量60mg重量，高度大約60~80mm，來控制松緊度,這樣即使供試品中有l(wèi)OOOugS2-存在也不干擾測(cè)定結(jié)果。3、反應(yīng)條件反應(yīng)液酸度、酸性氯化亞錫試液用量，鋅粒大小與用量、反應(yīng)溫度都會(huì)影響氫氣發(fā)生速度，從而影響砷化氫氣體的產(chǎn)生、反應(yīng)酸度：相當(dāng)于鹽酸液2mol/l、KI濃度：2.5%；SnCl濃度：0.3%2Zn粒大?。?0目，用量2g反應(yīng)溫度:25~40°C水浴反應(yīng)時(shí)間：1小時(shí)4、試驗(yàn)中注意點(diǎn)：溴化汞試紙與砷化氫作用靈敏，但形成的砷斑不穩(wěn)定，所以在反應(yīng)中應(yīng)保持干燥和避光，試驗(yàn)結(jié)束后立即與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，否則時(shí)間長(zhǎng)，砷斑會(huì)褪色。如供試品為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽等，則在酸性溶液中容易生成HS或SO氣體，可與HgBr作用生成HgS或金屬Hg,干擾檢查，應(yīng)在檢查前加入222HNO處理，氧化成硫酸鹽，再做檢查。3SO42SO42-（3）如供試品為含銻藥物，如葡萄糖酸銻鈉，則不能采用此方法，而改用白田道夫法白田道夫法：2AS32AS3++3Snj +6HCl2As、\+3SnCl+6H+4二、二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）1、檢查原理砷化氫生成的原理同古蔡氏法，AsH3 +6Ag（DDC）——AsAg.3Ag（DDC）+3HDDC3 3AsAg.3Ag(DDC)+. 3-As(DDC)AsAg.3Ag(DDC)+. 3-As(DDC)36Ag+.HDDC由于吡啶有惡臭，因此中國(guó)藥典改用1.8%三乙胺的氯仿溶液2、儀器裝置P50圖4-7采用平底玻璃管5.0ml溶液接受砷化氫氣體將AsH氣體導(dǎo)入盛有Ag（DDC）溶液5.0ml的D管內(nèi)3反應(yīng)時(shí)間：45min反應(yīng)溫度：25~40°C水浴試驗(yàn)結(jié)束后，添加氯仿至5.0ml,在白色背景下，從上而下觀察比色本法用于硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽以及含銻藥物，都不產(chǎn)生干擾，但靈敏度較低。八、重金屬檢查法重金屬系指在實(shí)驗(yàn)條件下能與顯色劑作用顯色的金屬雜質(zhì)常用的顯色劑：HS（有惡臭，現(xiàn)已不用）、硫代乙酰胺（CHCSNH）、硫化鈉（NaS）2 3 2 2金屬雜質(zhì)：銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、砷、銻、錫、鋅、鈷、鎳等由于在藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，同時(shí)鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查重金屬時(shí)以鉛為代表檢查。（一）、硫代乙酰胺法1、檢查原理CH3CSNH2 +H0PH—3,5?CHCONH+HS3 2 2 3 2 2h2s+ Pb2+ *PbS+2H+2、操作納氏管2支供試品溶液PH3.5醋酸緩沖液-硫代乙酰胺=白紙上，自上而下透視標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液溶液PH值對(duì)于金屬離子與HS呈色影響較大2在PH3~3.5，硫化鉛（PbS）沉淀較完全酸度增大，硫化鉛沉淀顏色變淺，甚至不顯色，因此，供試品如用強(qiáng)酸處理過，應(yīng)在加硫代乙酰胺前用氨水調(diào)PH值。3、實(shí)驗(yàn)注意點(diǎn)（1） 供試品如有顏色，可采用A、外消色法（加稀焦糖溶液或無干擾的有色溶液）調(diào)顏色一致。B、內(nèi)消色法PH3.5醋酸緩沖液過濾一份a硫代乙酰胺 濾液加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液'硫代乙酰胺供試品分兩份 比濁^一份（2） 、供試品中若有微量高鐵鹽（Fe3+）,在弱酸性溶液中氧化HS而析出S,產(chǎn)2生渾濁，影響比色。3HS+2Fe3+—S+2FeS+6H+2

所以，應(yīng)在檢查前先加入抗壞血酸（VitC）或鹽酸羥胺，還原高鐵離子。VitCFe3+ Fe2+（3）多數(shù)藥物在酸性條件下檢查重金屬，一些溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中產(chǎn)生沉淀的藥物，如磺胺類，巴比妥類藥物，均在堿性溶液中溶解，因此檢查重金屬，顯色劑不能用硫代乙酰胺，而改用硫化鈉：NaS2（4）供試品如為鐵鹽，如枸櫞酸鐵銨，則應(yīng)將鐵離子先除去，再檢查。Fe3++ HCl ?HFeCl62- 用乙醚提取比重1.103-1.105水層一加氨試液呈堿性 -加KCN去除微量Fe3+ aNa2S 檢查（5）含芳環(huán)或雜環(huán)的有機(jī)藥物，如甲硝唑，應(yīng)先行熾灼破壞，使與有機(jī)分子結(jié)合的重金屬流離，再檢查。熾灼溫度一般控制在500~600°C溫度過高，重金屬損失，如鉛在700C經(jīng)6小時(shí)熾灼，損失68%。熾灼殘?jiān)酉跛峒訜崽幚恚褂袡C(jī)物進(jìn)一步破壞完全，但必須蒸干除盡氧化氮，否則亞硝酸可氧化硫化氫為硫，影響比色，然后再加鹽酸，成鉛離子后，再作檢查。（二）、微孔濾膜法當(dāng)供試品中重金屬量低于2-5X10-6時(shí)，用目視比色法觀察較困難，改用微孔濾膜法，使重金屬硫化物富集于濾膜上，提高檢查靈敏度。1、儀器P43圖4-5PH3.5醋酸緩沖液2ml硫代乙酰胺PH3.5醋酸緩沖液2ml硫代乙酰胺1.0ml"放置10分鐘供試品溶液稀釋10ml標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液?50ml注射器壓濾-取下濾膜、干燥、比較如果供試品溶液渾濁，應(yīng)先預(yù)濾，然后再用微孔濾膜法檢查。九、氧瓶燃燒法有些有機(jī)藥物中含鹵素、硫、硒等元素，它們以共價(jià)鍵形式與碳原子結(jié)合，不能檢出，需經(jīng)有機(jī)破壞后才能檢出。有機(jī)破壞有許多種，氧瓶燃燒是其中一種。氧瓶燃燒法定義：氧瓶燃燒法是將有機(jī)藥物在充滿氧氣的燃燒瓶中進(jìn)行燃燒。有機(jī)藥物f燃燒f用規(guī)定的吸收液吸收f分析檢查1、儀器裝置燃燒瓶有500ml、1000ml、2000ml規(guī)格的硬質(zhì)錐形瓶瓶塞上有一根鉑絲（直徑1mm）,成網(wǎng)狀或螺旋狀鉑絲作用：A、本身性質(zhì)較穩(wěn)定，不易燃燒B、具有催化作用2、操作固體供試品包裹法50液體供試品包裹法：液體25實(shí)驗(yàn)操作前：用少量水封閉瓶口實(shí)驗(yàn)操作時(shí)：按緊瓶塞，以免氣體逸出實(shí)驗(yàn)操作后：充分振搖，完全吸收，注意瓶口洗滌實(shí)驗(yàn)中燃燒不完全的原因：1、通氧氣不足2、供試品受潮3、供試品包得過緊或過松4、燃燒瓶不嚴(yán)密，有氧氣逸出十、酸堿度檢查法藥典中規(guī)定：用堿液進(jìn)行滴定或規(guī)定的PH值低于7.0,稱為“酸度”用酸液進(jìn)行滴定或規(guī)定的PH值大于7.0,稱為“堿度”用酸或堿液分別滴定者或規(guī)定的PH值跨越7.0上下兩側(cè)的稱為“酸堿度”檢查時(shí)，一般以新煮沸放冷的蒸餾水（除去co2,有弱酸性）為溶劑，不溶于水的藥物,用中性乙醇等有機(jī)溶劑溶解。常用的檢查方法：一）、酸堿滴定法在一定指示液條件下，用酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗一定體積的酸或堿滴定液來控制藥物中所含酸性或堿性雜質(zhì)的雜質(zhì)的限量供試液（-定體積）一加入指示劑*堿滴或液滴定如：檢查氯化鈉中的酸堿度取供試品5g,加新沸冷水50ml溶解，加溴麝香草酚藍(lán)指示液（PH6.0~7.6，黃~藍(lán)）2滴，如顯黃色（示為酸性），加NaOH（0.02mol/l）0.1ml應(yīng)變藍(lán)色，即5gNaCl中酸性雜質(zhì)應(yīng)為0.002mmolNaOH中和，也即在100gNaCl中允許的酸性雜質(zhì)限量應(yīng)為0.04mmol。如顯藍(lán)色或綠色（示為堿性），加鹽酸（0.02mol/l）0.2ml應(yīng)變?yōu)辄S色，同理，在100gNaCl中允許堿性雜質(zhì)限量為0.08mmol。（二）、指示劑法在一定量的供試品中加入規(guī)定的指示液，根據(jù)指示液的顏色變化來控制酸堿性雜質(zhì)的限量。如：檢查蒸餾水中的酸堿度取蒸餾水10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯紅色；另取蒸餾水10ml，加溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴，不得顯藍(lán)色。甲基紅PH4.2~6.3紅一黃溴麝香草酚藍(lán)PH6.0~7.6黃一藍(lán) 蒸餾水的PH4.2~7.6（三）PH值測(cè)定法用電位法測(cè)定藥物供試液中所含酸、堿雜質(zhì)的氫離子濃度，較其他二種方法準(zhǔn)確，直觀。準(zhǔn)確：用PH計(jì)直接測(cè)定直觀：數(shù)字直接顯示十一、溶液澄清度檢查藥物中有不溶性雜質(zhì)，影響藥物的溶液澄清度，所以應(yīng)作澄清度檢查。

檢查原理：供試品溶液與標(biāo)準(zhǔn)濁液比較標(biāo)準(zhǔn)濁液制備：烏洛托品+肼?（CH?（CH2）6NNH2-NH2 一"絡(luò)合物］ 白色HCHO烏洛托品結(jié)構(gòu)：能在水中分解產(chǎn)生甲醛，甲醛和肼反應(yīng)產(chǎn)生白色沉淀能在水中分解產(chǎn)生甲醛，甲醛和肼反應(yīng)產(chǎn)生白色沉淀1.0%硫酸肼水溶液+10.0%烏洛托品水溶液（等量混合）一24小時(shí)避光放置，白色混懸液f作標(biāo)準(zhǔn)貯備液一取標(biāo)準(zhǔn)貯備液15.0ml—稀釋1000ml一成濁度標(biāo)準(zhǔn)原液一按表中數(shù)據(jù)配制標(biāo)準(zhǔn)濁液（分級(jí)）。共分5個(gè)級(jí)別：級(jí)別號(hào)：0.5、1、2、3、4供試品溶液配制后和標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的濁液比較，決定供試品溶液的澄清度。檢查時(shí)：供試品溶液 標(biāo)準(zhǔn)濁液 比濁用玻璃管中，40mm高度f黑色背景，從上而下觀察比較，或垂直傘棚燈，照度1000Lx,水平方向比較。藥典中規(guī)定：澄清：供試品溶液的澄清度相當(dāng)于所用溶劑，或未超過0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液檢查：如葡萄糖中檢查糠醛（不溶性）十二、溶液顏色檢查法有些藥物在制備過程中有色雜質(zhì)未除凈，或在貯存過程中新生成有色雜質(zhì)，都會(huì)使溶液呈現(xiàn)顏色。（一）、比色法標(biāo)準(zhǔn)色液：重鉻酸鉀溶液（橙色）硫酸銅溶液（藍(lán)色）氯化鈷溶液（紅色）配成黃綠、黃、橙黃、橙紅、棕紅五種貯備液顏色分別調(diào)和成10種顏色檢查時(shí)：供試品溶液與標(biāo)準(zhǔn)顏色的溶液比較（二）、紫外分光光度法通過吸收度控制有色雜質(zhì)的限量如：VitC50mg/ml測(cè)定440nm、420nm波長(zhǎng)處的吸收度，規(guī)定A分別小于0.07和0.06。十三、干燥失重測(cè)定法定義：指藥物在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后，所減少的重量，主要指水分，也包括其他揮發(fā)性物質(zhì)如乙醇等。常用測(cè)定方法（根據(jù)干燥方法不同分為）（一）、常壓恒溫干燥法稱量瓶f烘箱內(nèi)，規(guī)定溫度干燥f從減失的重量計(jì)算干燥失重要求：1、 適用于受熱較穩(wěn)定的藥物2、 干燥溫度一般為105°C，除規(guī)定外3、 干燥時(shí)間一般2~4小時(shí)，除規(guī)定外4、 供試品厚度不超過5mm，疏松物質(zhì)厚度不超過10mmf為使水分及揮發(fā)性物質(zhì)易于揮散。5、 供試品為大顆粒結(jié)晶，必須研細(xì)至粒度2mm。（二） 、減壓干燥法在減壓條件下，可降低干燥溫度和縮短干燥時(shí)間，故適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定及難趕除水分的藥物，如腎上腺素（三） 干燥劑干燥法適用于不論常壓或減壓條件下加熱烘干均容易分解、升華、揮發(fā)的藥物。常用干燥劑：五氧化二磷、硫酸、硅膠PO：吸水效力、吸水容量、吸水速度均較好，但價(jià)格較貴，并且不能反復(fù)使用。25HSO：吸水效力、吸水速度次于五氧化二磷，但吸水容量較五氧化二磷好，用后24加熱除水分后可重復(fù)使用。硅膠：吸水效力、吸水速度均次于五氧化二磷、硫酸，但使用方便，價(jià)廉，可反復(fù)使用。變色硅膠：加C02+，變色1g硅膠吸水20mg后就開始變色f150C干燥十四、易炭化物檢查檢查藥物中的有機(jī)雜質(zhì)有機(jī)物遇濃硫酸f發(fā)生炭化或氧化f呈色f比色法檢查與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較：標(biāo)準(zhǔn)比色液（氯化鈷溶液、重鉻酸鉀溶液、硫酸銅溶液）不同比例配制例：檢查阿司匹林中的易炭化物取比色管兩支甲：5ml（氯化鉆0.25ml、重鉻酸鉀0.25ml、硫酸銅0.4ml、水4.1ml）乙：硫酸5ml,加入阿司匹林0.5g甲溶液乙溶液15min后白色背景乙管不得比甲管深狽1面透視十