臨床微生物標本的送檢與采樣指南

臨床微生物標本的送檢與采樣指南臨床微生物標本的送檢與采樣指南呼吸道標本采集及運輸一、上呼吸道標本1、送檢指征上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、會厭炎等，凡具有以下狀況任何一項者1、送檢指征上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、會厭炎等，凡具有以下狀況任何一項者疑似患者。1.1病毒性一般感冒伴有明顯咽痛時，疑心為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細菌培育。2細菌性咽扁桃體炎：明顯咽痛、咽部發(fā)紅、畏寒、發(fā)熱，體溫可達C以上。1.3喉嚨痛、咳嗽、喉部有膿樣分泌物等臨床病癥。1.4上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管-支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進展細菌培育。2、標本采集上呼吸道標本包括鼻、鼻咽、咽拭子標本。應(yīng)依據(jù)臨床表現(xiàn)和感染部位劑的棉拭子，預(yù)先用無菌生理鹽水或養(yǎng)分肉湯蘸濕拭子，并直取感染部位，削減污染。2.11.3喉嚨痛、咳嗽、喉部有膿樣分泌物等臨床病癥。1.4上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管-支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進展細菌培育。2、標本采集上呼吸道標本包括鼻、鼻咽、咽拭子標本。應(yīng)依據(jù)臨床表現(xiàn)和感染部位劑的棉拭子，預(yù)先用無菌生理鹽水或養(yǎng)分肉湯蘸濕拭子，并直取感染部位，削減污染。2.1鼻拭子的采集：最好使用擴鼻器，先用拭子拭去鼻黏膜外表的分泌物并丟棄，用第2個試子蘸取無菌生理鹽水或養(yǎng)分肉湯，插入鼻孔采集病灶標本。2.2咽拭子的采集：采集標本時患者先用清水漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，用無菌的鼻咽拭子〔一端彎曲的金屬棉拭〕由口腔進入，越過舌根到咽假設(shè)咽部明顯發(fā)紅或有假膜存在時，應(yīng)在局部擦拭取標本〔最好拭子從膜底下擦拭。采或扁桃體上擦拭。33.1檢查時間：應(yīng)于抗菌藥物應(yīng)用之前。時間上無嚴格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，也應(yīng)晨起后采集為佳。通路，也應(yīng)晨起后采集為佳。3.2采集頻率：重復(fù)采集標本的頻率一般每日最多1次。423.2采集頻率：重復(fù)采集標本的頻率一般每日最多1次。42小時，假設(shè)不能馬上接2小時內(nèi)接種平板，以防細菌死亡。5、留意事項5.1應(yīng)于抗菌藥物治療前采集鼻咽喉拭子標本。5.2標本采集前數(shù)小時不得用消毒藥物漱口或涂抹病灶局部。5.3以防污染。5.45.5采集扁桃體標本時，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.6采集標本時應(yīng)戴口罩和手套，以防傳染。5.7咽部是呼吸和食物的通路，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.8最好采集5.5采集扁桃體標本時，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.6采集標本時應(yīng)戴口罩和手套，以防傳染。5.7咽部是呼吸和食物的通路，應(yīng)以晨起后采集為宜。5.8最好采集2份拭子，以便利直接涂片染色鏡檢和接種培育。用，由于其所含的脂肪酸對病原菌有害。二、下呼吸道標本1、送檢指征但凡發(fā)熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性、黏稠或血性，并伴有胸痛、氣急，X線檢查提示有炎癥標本。2、標本采集時間2.1以晨痰為好。多數(shù)患者晨痰較多，即使對談量少的患者，也以早晨采集最為簡潔。對支氣管擴張癥與支氣管相通的患者，早晨起床后進展體位引流，可采集大量痰液。對支氣管擴張癥與支氣管相通的患者，早晨起床后進展體位引流，可采集大量痰液。2.2在應(yīng)用抗菌藥物之前采集標本。2.2在應(yīng)用抗菌藥物之前采集標本。3、采集方法合格的標本采集是取得正確檢驗結(jié)果的關(guān)鍵，因此臨床工作人員要教會患者如何采集或親自去采集，取得深部的痰液而不是唾液。3.1自然咳痰法：患者早晨起床后，用冷開水〔無菌生理鹽水〕反復(fù)漱口〔用濕牙刷刷口腔黏膜、舌頭和牙齦5至10口腔黏膜、舌頭和牙齦5至10分鐘，勿用牙膏〕后用力自氣管咳出第一口痰〔戴假牙者取出假牙后漱口。對于痰量少或無痰的患者可進展誘導(dǎo)咳痰，及承受霧化吸入加溫至45°C的100g/LNaCl溶液，使痰液易于排出。將痰采集于無菌容器中盡快送檢。本。此法患者常不愿承受。3.3胃內(nèi)采痰法：該方法于早晨空腹時，將胃管插入胃內(nèi)，用注射器抽取胃液。適用于核分支桿菌培育，其陽性率比咳痰高10%左右。3.4核分支桿菌培育，其陽性率比咳痰高10%左右。3.4人工氣道采痰法：通過氣管切口插管，負壓吸引取得痰液，可用于厭氧菌培育。3.5小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，盡快送檢。4、標本的運送4.1標本采集后盡快〔小于2小時〕送至試驗室，不準時運送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。4.2嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。4.24°C冰箱保存〔疑肺炎鏈球菌感染、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌感染標本不能冷藏，以免雜菌生長，但保存標本應(yīng)在4小時內(nèi)處理。4.3對可疑烈性呼吸道傳染病〔如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等〕的患者檢驗標本，在采集、運輸或保存過程中必需留意生物安全防護。5集、運輸或保存過程中必需留意生物安全防護。55.15.25.2標本采集后應(yīng)馬上送檢。5.3結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多。5.4肺部感染的患者可能患有菌血癥，應(yīng)同時做血液培育。5.5一般不主見承受肉湯增菌或高選擇性培育基來對標本進展增菌或分別培育。5.6氣管插管24h后會有定值菌，僅當消滅臨床肺炎病癥〔發(fā)熱和浸潤〕時，否則切勿培育氣管吸出物，因培育結(jié)果可能與疾病不符。附注：LentinoandLucks評價用于臨床痰培育的標本有如下狀況：5.3結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多。5.4肺部感染的患者可能患有菌血癥，應(yīng)同時做血液培育。5.5一般不主見承受肉湯增菌或高選擇性培育基來對標本進展增菌或分別培育。5.6氣管插管24h后會有定值菌，僅當消滅臨床肺炎病癥〔發(fā)熱和浸潤〕時，否則切勿培育氣管吸出物，因培育結(jié)果可能與疾病不符。附注：LentinoandLucks評價用于臨床痰培育的標本有如下狀況：1.MurrayWashington的痰質(zhì)量分級系統(tǒng)，48%的送往試驗室的痰培育未通過質(zhì)量分級，而較多的是口腔分泌物；2.26.5%的膿痰標原來自未顯示出反射學(xué)和臨床病癥證據(jù)的病人；3.40%的痰標原來自未深入祛痰而較多的是口腔分泌物的病人;4.臨床血液培育標本采集、運輸、處理血流感染的發(fā)生進展可以嚴峻威逼患者的生命，其正確診斷不僅可以削減抗菌藥物的誤用和濫用，同時可以大大地改善患者的預(yù)后，降低患者的病死率，削減醫(yī)療花費。導(dǎo)管相關(guān)性血流感染以及感染性心內(nèi)膜炎診斷標準、快速鑒定血培育中的念珠菌、報告試驗結(jié)果，強調(diào)試驗室準時與臨床溝通，提高血流感染診斷水平的重要意義。11小時，在此期間，應(yīng)同時〔或間隔30-60min〕采集2-3套血培育，只有在疑心患者有感染性心內(nèi)膜炎或其它血管內(nèi)感染〔如導(dǎo)管相關(guān)性感染〕時，才有必要間隔較長時間屢次采集血培育。2在每次敗血癥期間，推舉采集2-3套血培育。對于****，不應(yīng)僅做1套血培育，不僅1套血培育的結(jié)果較難解釋。由于在開頭抗菌治療后，患者血液中的致病菌不會馬上去除，2-5〔非感染性心內(nèi)膜炎，應(yīng)在6小時重復(fù)培育以推斷其是否為簡單性金葡菌敗血癥。3****，采血量在2-30ml時致病菌的檢測與液中的致病菌不會馬上去除，2-5〔非感染性心內(nèi)膜炎，應(yīng)在6小時重復(fù)培育以推斷其是否為簡單性金葡菌敗血癥。3****，采血量在2-30ml時致病菌的檢測與血量成正比，雖然采血量增長至40ml〔甚至更高〕時血培育陽性率仍在提高，但已經(jīng)不再與采血量成正比。對于嬰幼兒，采血量不應(yīng)超過患兒總血量的1%。4酵母菌引起的。假設(shè)僅做需氧培育，每套培育應(yīng)使用2個需氧瓶并保證有足夠的血量。5和葡萄糖酸洗必泰優(yōu)于聚維酮碘，碘酊與葡萄糖酸洗必泰效果相近。碘酊應(yīng)作用30s，碘伏應(yīng)作用1.5-2min。葡萄糖酸洗必泰也應(yīng)作用30s，它較少引起過敏，因而在靜脈穿刺后不需擦掉，但不能用于2個月以內(nèi)的生兒皮膚消毒。6除抗凝劑，由于其抗菌作用通?？梢员慌嘤行♂屜?。至。2小時內(nèi)送至試驗室，延遲上時機延緩甚至阻礙病原菌生長。培育瓶在室溫僅能存放數(shù)小時。切忌將培育瓶冷藏或冷凍，冷藏或冷凍會導(dǎo)致局部病原菌死亡，冷凍可能導(dǎo)致培育瓶裂開。7至。2小時內(nèi)送至試驗室，延遲上時機延緩甚至阻礙病原菌生長。培育瓶在室溫僅能存放數(shù)小時。切忌將培育瓶冷藏或冷凍，冷藏或冷凍會導(dǎo)致局部病原菌死亡，冷凍可能導(dǎo)致培育瓶裂開。7標識錯誤或沒有標識的培育瓶；破損或滲漏的培育瓶；凝血。臨床尿液標本采集1、送檢指征尿路感染、腎結(jié)核、泌尿系結(jié)石、膀胱排空受損或前列腺增生等患者，消滅尿頻、尿急、尿痛等膀胱刺激病癥，肉眼膿尿或血尿，尿常規(guī)檢查有白細胞或亞硝況應(yīng)采集尿液標本送檢。2、標本采集2.11次尿液送檢，4小時以上。疑似沙門菌感染、鉤端螺旋體感染時，一般在發(fā)病2周左右采集尿液培育。2.2采集方法4小時以上。疑似沙門菌感染、鉤端螺旋體感染時，一般在發(fā)病2周左右采集尿液培育。2.2采集方法2.2.1清潔中段尿采集法：囑患者留取標本前一天晚上少飲水，晨起女性用肥皂水清洗外陰部〔男性翻轉(zhuǎn)，清洗尿道口留取中段尿10-15ml于滅菌容器內(nèi)，馬上加蓋送檢。5-10ml尿液送檢。此法有肯定的苦痛，患者難以承受。主要用于厭氧菌培育或留取標本標本困難的嬰兒尿標本采集。此法可避開尿液標本污染。2.2.3導(dǎo)尿法：去前段去前段15ml，再留取10-15ml膀胱尿液于滅菌容器內(nèi)送檢。次法可削減尿液標本的污染，準確地反映感染狀況。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。尿液5-10ml，置于滅菌容器中送檢；或消毒后解開接口，棄去導(dǎo)尿管前段尿，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢，長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換導(dǎo)尿管后留取尿標本。2.2.4集尿法：疑心結(jié)核分枝桿菌感染時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml污染，準確地反映感染狀況。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。尿液5-10ml，置于滅菌容器中送檢；或消毒后解開接口，棄去導(dǎo)尿管前段尿，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢，長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換導(dǎo)尿管后留取尿標本。2.2.4集尿法：疑心結(jié)核分枝桿菌感染時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml送檢。3、標本采集量結(jié)果可能不行靠。4、標本采集容器容器應(yīng)當承受不與尿液成分發(fā)生反響的惰性材料；容器應(yīng)干凈、無菌、加蓋、封閉、防滲漏，且不含防腐劑和抑制劑；容器應(yīng)廣口，具有較寬的底部，容器應(yīng)在40ml左右，容器蓋應(yīng)易于開啟。52小時〔夏季保存時間應(yīng)適當縮短或冷藏保存，C冷藏保存時間不得超過4小時，但應(yīng)留意冷藏保存的標本不能用于淋病奈瑟菌培育。糞便標本采集1腹瀉、大便每日≥3次，糞便的性狀特別，可為稀便、水樣便、黏液便、膿血便及血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等；病情嚴峻者，因大量喪失水分引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克；糞便涂片鏡檢白細胞腹瀉、大便每日≥3次，糞便的性狀特別，可為稀便、水樣便、黏液便、膿血便及血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等；病情嚴峻者，因大量喪失水分引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克；糞便涂片鏡檢白細胞≥5個/HP；抗菌藥物治療后腹瀉；來自疫區(qū)的患者等。2、采集方法2.1自然排便采集法盛于無菌容器內(nèi)或置于保存液或增菌液中送檢，假設(shè)不能準時送檢，按1：10比例與pH7.0磷酸鹽甘油緩沖液〔0.03mol/L磷酸鹽緩沖液與等體積甘油混勻〕混合保存，或置于Cary-Blair運送培育基中，以防病原菌死亡而影響檢出率。2.2直腸拭子采集法鹽水、保存液或增菌液潤濕的肛門采樣拭子或玻璃采便器插入肛門，****約4-5cm。兒童約2-3cmCary-Blair運送培育基中或或置于Cary-Blair運送培育基中，以防病原菌死亡而影響檢出率。2.2直腸拭子采集法鹽水、保存液或增菌液潤濕的肛門采樣拭子或玻璃采便器插入肛門，****約4-5cm。兒童約2-3cmCary-Blair運送培育基中或pH7.0磷酸鹽甘油緩沖液中送檢。3一般用拭子采集大于2g的標本送檢，假設(shè)標本為水樣，采集大于2ml的標本置于無菌容器中送檢。4、采集時間及頻率4.1采集時間盡可能在發(fā)病早期〔急性期〔3日以內(nèi)〕和應(yīng)用抗菌藥物治療之前，2周以后采集標本送檢。4.2采集頻率重復(fù)采集標本的頻率每日最多1次。5、標本的運送5.12Cary-Blair4°C冰箱保存，但保存時間不能超過24小時。Cary-BlairGN肉湯中送檢，室溫運送時間不超過2小時，4°C冰箱保存時間不超過24小時。5.3高度疑心霍亂弧菌感染的標本運送必需符合特別標本的安全要求。穿刺液標本采集一、腦脊液標本的采集、運送送檢指征：發(fā)熱、頭痛、惡心，嘔吐、頸強直和反射增加等病癥，疑心為腦膜炎的患膜炎，采集腦脊液送檢。膜炎，采集腦脊液送檢。2.采集時間脊液標本。3.2.采集時間脊液標本。3.采集方法及采集量〔留意嚴格無菌操作檢測細菌或病毒，腦脊液量應(yīng)大于或等于1ml,假設(shè)用于檢測真菌或抗酸桿菌，腦脊液。4.標本的運送15分鐘內(nèi)送至試驗室。假設(shè)延誤送檢，標本應(yīng)置于室溫保存，但保存時間不超過24小時，但送檢延遲可能對苛氧菌的檢出有影響。腦脊液標本不行放冰箱保存，以防某些細菌死亡〔如腦膜炎奈瑟菌，肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。二、胸腹水標本的采集和運送1.送檢指征1.1胸水：患者多伴有胸痛，發(fā)熱，假設(shè)胸腔積液未渾濁，乳糜性，血性或膿性是應(yīng)送檢。1.2腹水：有腹脹，腹痛，嘔吐，腹部壓痛，肌緊急，腸鳴音減弱或消逝等病癥的患保存，但保存時間不超過24小時，但送檢延遲可能對苛氧菌的檢出有影響。腦脊液標本不行放冰箱保存，以防某些細菌死亡〔如腦膜炎奈瑟菌，肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。二、胸腹水標本的采集和運送1.送檢指征1.1胸水：患者多伴有胸痛，發(fā)熱，假設(shè)胸腔積液未渾濁，乳糜性，血性或膿性是應(yīng)送檢。1.2腹水：有腹脹，腹痛，嘔吐，腹部壓痛，肌緊急，腸鳴音減弱或消逝等病癥的患者，腹部積液增多且為滲出液時，應(yīng)送腹水培育。2.采集時間日采集。3.采集方法3.1漿膜腔積液標本由臨床醫(yī)師行胸腔穿刺術(shù)，腹腔穿刺術(shù)或心包穿刺術(shù)分別采集，留意嚴格無菌操作。3.2送檢標本最好留取中段液體于滅菌容器中，或直接接種于血培育瓶中，標本采集量1~5ml，不能用拭子蘸取標本送檢；對于非臥床透析患者的腹膜炎診斷要采集最少50ml標本才有利于檢出病原體。如查結(jié)核分枝桿菌則約需10ml。3.3標本采集后假設(shè)注入無菌小瓶或無菌試管中，應(yīng)在容器中先參加滅菌肝素然后再加入標本〔或直接注入血培育瓶，以防止穿刺液凝固l肝素可抗凝l標本，但抗凝劑可能影響苛氧菌的分別抗凝劑可能影響苛氧菌的分別。4、標本的運送一般胸腹水標本采集后4、標本的運送一般胸腹水標本采集后15分鐘內(nèi)應(yīng)送至微生物室，如不能準時送檢室溫保存不超過4小時。假設(shè)做真菌培育需C保存。膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本采集、運送及處理1、送檢指征局部病癥：紅、腫、熱、痛和功能障礙時化膿性感染的五個典型特征。但隨病程遲早、病變范圍、位置深淺不同，五個病癥不肯定全部表現(xiàn)。病變范圍小或位置較小時，局部病癥可不明顯。早、病變范圍、位置深淺不同，五個病癥不肯定全部表現(xiàn)。病變范圍小或位置較小時，局部病癥可不明顯。全身病癥：輕重不一。感染較重者常有發(fā)熱、頭痛、全身不適、乏力食欲減退等，一般均有白細胞計數(shù)增加，核左移及CRP上升。病程較長時，可有水和電解質(zhì)紊亂，血漿蛋白削減，肝糖原大量消耗，可消滅養(yǎng)分不良、貧血、水腫等病癥。全身性感染嚴重的患者可發(fā)生感染性休克。1.3一般均有白細胞計數(shù)增加，核左移及CRP上升。病程較長時，可有水和電解質(zhì)紊亂，血漿蛋白削減，肝糖原大量消耗，可消滅養(yǎng)分不良、貧血、水腫等病癥。全身性感染嚴重的患者可發(fā)生感染性休克。1.3疑為以下疾病時需送檢1.3.1軟組織的急性化膿性炎癥：如癤、癰、急性蜂窩織炎、丹毒等。炎、鼻竇炎、化膿性扁桃體炎、急性化膿性中耳炎、急性化膿性乳突炎、急性***炎、急性膽囊炎、急性梗阻性化膿性膽管炎、心包炎、結(jié)核性腹膜炎。1.3.3膿腫：扁桃體膿腫、咽部膿腫、咽旁膿腫、牙齦膿腫、腦膿腫、肺膿腫、肝膿腫、膿胸、腹腔膿腫、腎皮質(zhì)化膿性感染、腎四周炎和腎周膿腫、直腸肛管四周膿腫。1.3.4創(chuàng)傷感染：外傷感染、術(shù)后切口感染、導(dǎo)管感染、臍帶殘端感染。2、采集方法2.1膿胸、腹腔膿腫、腎皮質(zhì)化膿性感染、腎四周炎和腎周膿腫、直腸肛管四周膿腫。1.3.4創(chuàng)傷感染：外傷感染、術(shù)后切口感染、導(dǎo)管感染、臍帶殘端感染。2、采集方法2.1開放性膿腫：開放性膿腫標本包括眼〔結(jié)膜、角膜、耳〔外耳、扁桃體、術(shù)后切〔最好從膿腫底部或膿腫壁取樣另一個用于革蘭涂片染色。而瘺管則以無菌方法實行組織碎片，置于無菌試管中送檢。另一個用于革蘭涂片染色。而瘺管則以無菌方法實行組織碎片，置于無菌試管中送檢。2.2癰、淋巴結(jié)膿腫、乳腺膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腦膿腫、腎周膿腫、闌尾膿腫、胸腔膿腫、腹腔積液、心包積液、腹腔膿腫、關(guān)節(jié)