《蝦青素油及制品》

1QB/TXXXX—202X蝦青素油及其制品本文件界定了蝦青素油及其制品的術(shù)語和定義，規(guī)定了技術(shù)要求、檢驗規(guī)則、標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運輸和貯存要求，描述了相應(yīng)的試驗方法。本文件適用于以雨生紅球藻（Haematococcuspluvialis）藻體及孢子或雨生紅球藻粉為原料，經(jīng)破壁、提取等工序制得的蝦青素油及蝦青素油制品的生產(chǎn)、檢驗和銷售。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T602化學(xué)試劑雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備GB/T603化學(xué)試劑試驗方法中所用制劑及制品的制備GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定GB4789.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)GB4789.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗GB4789.10食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB4789.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)GB4789.38食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗大腸埃希氏菌計數(shù)GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測定GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定GB5009.27食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并（a）芘的測定GB5009.227食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中過氧化值的測定GB5009.229食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中酸價的測定GB5009.273食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中微囊藻毒素的測定GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB7718食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則GB28050食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)包裝食品營養(yǎng)標(biāo)簽通則GB/T30893雨生紅球藻粉3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1蝦青素油制品astaxanthinoilproducts2QB/TXXXX—202X以蝦青素油為原料，添加或不添加輔料、食品添加劑，制得的產(chǎn)品。4要求4.1原輔料要求4.1.1雨生紅球藻藻體及孢子應(yīng)新鮮、無變質(zhì)。4.1.2雨生紅球藻粉應(yīng)符合GB/T30893的規(guī)定。4.1.3其他原輔料應(yīng)符合相應(yīng)的食品安全標(biāo)準(zhǔn)和/或相關(guān)規(guī)定。4.2感官要求應(yīng)符合表1要求。表1感官要求4.3理化指標(biāo)應(yīng)符合表2要求。表2理化指標(biāo) 4.4安全指標(biāo)4.4.1污染物限量應(yīng)符合表3要求。3QB/TXXXX—202X表3污染物指標(biāo)——4.4.2微生物限量應(yīng)符合表4要求。表4微生物指標(biāo)35試驗方法5.1一般要求本方法中所用的水，在未注明其它要求時，應(yīng)符合GB/T6682中二級水的規(guī)格，所用試劑，在未注明其它規(guī)格時，均指分析純。分析中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明其它要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。5.2感官取試樣適量，置于清潔、干燥的白瓷盤或50mL燒杯中，在自然光線下，目測其色澤與狀態(tài)，有無雜質(zhì)，聞其氣味。5.3總蝦青素、全反式蝦青素含量按照附錄A進(jìn)行測定。5.4水分5.4.1蝦青素油按照GB5009.3-2016中規(guī)定的卡爾·費休法進(jìn)行測定。5.4.2蝦青素油制品按照GB5009.3-2016中規(guī)定的直接干燥法進(jìn)行測定。5.5灰分按照GB5009.4規(guī)定的方法進(jìn)行測定。4QB/TXXXX—202X5.6酸價按照GB5009.229-2016中規(guī)定的冷溶劑自動電位滴定法進(jìn)行測定。5.7過氧化值按照GB5009.227-2016中規(guī)定的電位滴定法進(jìn)行測定。5.8微囊藻毒素按照GB5009.273進(jìn)行測定。5.9鉛按照GB5009.12進(jìn)行測定。5.10無機(jī)砷按照GB5009.11進(jìn)行測定。5.11苯并[a]芘按照GB5009.27進(jìn)行測定。5.12菌落總數(shù)按照GB4789.2進(jìn)行測定。5.13大腸菌群按照GB4789.3平板計數(shù)法進(jìn)行測定。5.14霉菌和酵母按照GB4789.15平板計數(shù)法進(jìn)行測定。5.15金黃色葡萄球菌按照GB4789.10定性檢驗法進(jìn)行測定。5.16大腸埃希氏菌按照GB4789.38平板計數(shù)法進(jìn)行測定。5.17沙門氏菌按照GB4789.4進(jìn)行測定。6檢驗規(guī)則6.1組批同原料、同配方、同工藝、同一種規(guī)格的產(chǎn)品為一批。6.2抽樣5QB/TXXXX—202X同一組批中隨機(jī)抽取檢驗樣品，一般取樣量為全檢量的三倍，樣品檢驗數(shù)量不低于500g，樣品分為2份，1份用于檢驗，1份留樣備查。6.3檢驗分類檢驗分出廠檢驗和型式檢驗。6.4出廠檢驗6.4.1每批產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)企業(yè)質(zhì)檢部門按本文件檢驗合格并附合格證后方可出廠。6.4.2出廠檢驗項目為：感官、總蝦青素含量、全反式蝦青素含量、水分、灰分、菌落總數(shù)、大腸菌群。6.5型式檢驗6.5.1檢驗項目為本文件要求中規(guī)定的全部項目。一般情況下，型式檢驗半年進(jìn)行一次。6.5.2有下列情況之一時，亦應(yīng)進(jìn)行型式檢驗：——原輔材料有較大變化時；——更改關(guān)鍵工藝或設(shè)備時；——新試制的產(chǎn)品或正常生產(chǎn)的產(chǎn)品停產(chǎn)3個月后，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；——出廠檢驗與上次型式檢驗結(jié)果有較大差異時；——國家質(zhì)量監(jiān)督機(jī)構(gòu)按有關(guān)規(guī)定需要抽檢時。6.6判定規(guī)則6.6.1樣品經(jīng)檢驗，所有項目全部合格，則判該批產(chǎn)品為合格品。6.6.2檢測項目中有2項或2項以下不合格，則應(yīng)重新自該批產(chǎn)品中加倍取樣復(fù)驗，以復(fù)驗結(jié)果為準(zhǔn)。6.6.3檢測項目中有2項以上不合格，則判定該批產(chǎn)品為不合格，不應(yīng)復(fù)驗。6.6.4微生物指標(biāo)有1項不合格，則判定該批產(chǎn)品為不合格，不應(yīng)復(fù)驗。7標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運輸、貯存7.1標(biāo)志、標(biāo)簽7.1.1銷售包裝標(biāo)簽應(yīng)符合GB7718或GB28050的規(guī)定。7.1.2包裝儲運圖示應(yīng)符合GB/T191的規(guī)定。7.2包裝7.2.1包裝材料應(yīng)符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。7.2.2包裝物和容器應(yīng)整潔、衛(wèi)生、無破損。7.3運輸運輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生，不應(yīng)與有毒、有害、有腐蝕性、有異味的物品混裝、混勻，運輸過程中應(yīng)有遮蓋物，避免受潮、曝曬。7.4貯存產(chǎn)品應(yīng)在清潔、陰涼、干燥、通風(fēng)、設(shè)有防蟲害、防鼠害裝置的倉庫內(nèi)貯存，遠(yuǎn)離有毒有害、有腐蝕性物品，不應(yīng)與有異味物品混貯。6QB/TXXXX—202X（規(guī)范性）檢測方法警示：使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。A.1原理蝦青素油經(jīng)丙酮溶解，再經(jīng)膽固醇酯酶完全酶解后，使蝦青素油中的蝦青素酯轉(zhuǎn)化成游離態(tài)的蝦青素，采用液相色譜法進(jìn)行定性分析，內(nèi)標(biāo)法定量。A.2試劑和材料A.2.1試劑A.2.1.1水：一級水。A.2.1.2三羥甲基氨基甲烷（Tris）。A.2.1.3丙酮。A.2.1.4石油醚：30℃~60℃。A.2.1.5十水硫酸鈉。A.2.1.6無水硫酸鈉。A.2.1.7磷酸：優(yōu)級純。A.2.1.8甲醇：色譜純。A.2.1.9A.2.1.10鹽酸溶液：c（HCl）=1mol/L。A.2.1.11膽固醇酯酶（CASNo.：9026-00-0，EC3.1.1.13酶活≥10U/mg或其他同等品。A.2.2試劑的制備A.2.2.1Tris-HCl緩沖溶液（0.05mol/L，pH7.0）：稱取Tris0.606g（精確至0.0001g），加75mL水溶解，用鹽酸溶液調(diào)pH值至7.0，并加水定容至100mL，2℃~7℃保存，有效期為3個月。A.2.2.2磷酸溶液（1%，體積比）：量取磷酸5mL，加水溶解并定容至500mL。A.2.2.3膽固醇酯酶溶液：稱取膽固醇酯酶適量，用Tris-HCl緩沖溶液溶解，制成濃度為4U/mL，宜現(xiàn)用現(xiàn)配。A.2.3標(biāo)準(zhǔn)品A.2.3.1全反式-β-阿林-8'-胡蘿卜醛（分子式：C30H40O，CASNo.：1107-26-2）：純度≥96%。A.2.3.2蝦青素酯（USPAstaxanthinEstersfromHaematococcuspluvialisRS）：含有13-順式蝦青素、全反式蝦青素和9-順式蝦青素的脂肪酸酯，總蝦青素含量以酶解后游離蝦青素計，含量≥10%，或其他同等品。A.2.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備A.2.4.1內(nèi)標(biāo)溶液（10μg/mL）：稱取全反式-β-阿林-8'-胡蘿卜醛10mg（精確至0.0001g），加丙7QB/TXXXX—202X酮溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，作為內(nèi)標(biāo)儲備液，充氮密封，-20℃避光凍存，有效期為6個月。準(zhǔn)確移取該儲備液10mL，加丙酮溶解并定容至100mL，作為內(nèi)標(biāo)溶液，充氮密封，-20℃避光凍存，有效期為3個月。A.2.4.2蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)溶液：將蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)品置于50℃恒溫水浴鍋中加熱30min，每隔10分鐘振搖，混勻。稱取混勻后的蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)品0.06g（精確至0.0001g），加丙酮溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，作為蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)儲備液。準(zhǔn)確量取蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)儲備液2.0mL，加丙酮稀釋至50mL，作為蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)溶液。宜現(xiàn)用現(xiàn)配。A.3儀器和設(shè)備A.3.1高效液相色譜儀：帶紫外檢測器或二極管陣列檢測器。A.3.2棕色容量瓶。A.3.3離心管：10mL。A.3.4A.3.5超聲波發(fā)生器。A.3.6pH計：精度為±0.01。A.3.7離心機(jī)：3000rpm。A.3.8渦旋混合器。A.3.9氮吹儀。A.3.10分析天平：感量為0.0001g。A.4分析步驟A.4.1試樣測試溶液的制備A.4.1.1試樣的處理A.4.1.1.1蝦青素油將試樣置于50℃水浴鍋中加熱30min，每隔10min振搖，混勻。稱取適量試樣（含量為10%的蝦青素油，稱樣量約為60mg。低濃度，稱樣量按比例增大。高濃度，稱樣量按比例減少），用丙酮溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，混勻，作為試樣儲備液。準(zhǔn)確量取試樣儲備液2.0mL，用丙酮稀釋并定容至50mL，混勻。A.4.1.1.2蝦青素油制品稱取試樣0.1g（精確至0.0001g），加水20mL溶解后，用丙酮稀釋至100mL，混勻，作為試樣儲備液。準(zhǔn)確量取試樣儲備液5.0mL用丙酮稀釋并定容至50mL，混勻。A.4.1.2試樣測試溶液的制備準(zhǔn)確量取試樣溶液2.0mL，置于20mL離心管中，準(zhǔn)確加入1.0mL內(nèi)標(biāo)溶液、膽固醇酯酶溶液3.0mL，渦旋混勻，37℃水浴反應(yīng)45min。向離心管中加入丙酮1mL、十水硫酸鈉1g和石油醚2mL，渦旋1min后，離心5min。用吸管移取石油醚層置于已加入無水硫酸鈉1g的10mL離心管中。在室溫下用氮氣吹干石油醚后，準(zhǔn)確加入丙酮2.0mL，旋渦震蕩溶解并過濾。A.4.2標(biāo)準(zhǔn)測試溶液的制備8QB/TXXXX—202X準(zhǔn)確量取蝦青素酯標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL，按照試樣測試溶液的制備方法進(jìn)行配制。A.4.3儀器參考條件A.4.3.1色譜柱：C30柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，填料粒5μm，或相當(dāng)者。A.4.3.2檢測波長：474nm。A.4.3.3柱溫：25℃。A.4.3.4流速：1.0mL/min。A.4.3.5進(jìn)樣量：20μL。A.4.3.6流動相A：磷酸溶液。A.4.3.7流動相B：甲醇。A.4.3.8流動相C：甲基叔丁基醚。A.4.4液相色譜梯度洗脫條件液相色譜梯度洗脫條件見表A.1。表A.1梯度洗脫條件1062636465666A.5結(jié)果計算A.5.1總蝦青素含量總蝦青素（以全反式蝦青素計）含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計，按式（A.1）計算：……(A.1)式中：——試樣測試溶液中蝦青素的含量（以游離蝦青素計）/%；C1——標(biāo)準(zhǔn)測試溶液的濃度，mg/mL；C2——試樣測試溶液的濃度，mg/mL；P1——標(biāo)準(zhǔn)測試溶液中標(biāo)識的總蝦青素含量（以游離蝦青素計）/%；1.3——13-順式蝦青素的相對響應(yīng)因子；1.1——9-順式