丁硫克百威在牛肉中的降解研究

丁硫克百威在牛肉中的降解研究

丁硫克比妥，又名丁硫威、安棉特或好冬。這是一種新型的氨基甲酸酯農(nóng)藥。它具有良好的殺菌效果，具有高效性、低毒性、高選擇性和低殘留性的特點(diǎn)。它可干擾昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng),使其膽堿酯酶受到抑制,導(dǎo)致昆蟲的腺體及肌肉等部位持續(xù)興奮,進(jìn)而死亡。它具有脂溶性好、滲透力強(qiáng)等特點(diǎn),一旦作用于蟲體,則可快速殺死害蟲且對(duì)作物無(wú)害,可用于防治玉米、棉花、甘蔗、水稻、柑橘等各種經(jīng)濟(jì)作物,并對(duì)蚜蟲有顯著防治效果。但是一般學(xué)者認(rèn)為克百威或丁硫克百威等農(nóng)藥不宜施用于韭菜等葉菜類蔬菜上,因?yàn)槠湟自谌~片上積累,進(jìn)而影響人類健康。因此,對(duì)韭菜上丁硫克百威進(jìn)行檢測(cè)十分必要。鑒于此,筆者根據(jù)《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)GB/T20769-2008,水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定———液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》中的第三部分,采用配C18色譜柱的液質(zhì)聯(lián)用儀研究了丁硫克百威在韭菜中的降解情況,旨在為農(nóng)藥殘留分析和蔬菜安全生產(chǎn)提供借鑒。1材料和方法1.1材料表面1.1.1主要設(shè)備和指標(biāo)天平(精確度0.0001g),德國(guó)Sartorius生產(chǎn);TGL-20B高速離心機(jī)和WH300旋渦混合器,上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn);LD4-8離心機(jī),北京京力離心機(jī)有限公司生產(chǎn);Transferpette移液槍和Dispensette瓶口移液器,德國(guó)普蘭德公司生產(chǎn);ProElutQuEChERS固相萃取柱,北京迪馬科技有限公司生產(chǎn);TSQQuantumUltra三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀,美國(guó)ThermoFisher公司生產(chǎn)。1.1.2試劑及其他為試劑乙腈和甲醇均為色譜純,美國(guó)TEDIA試劑公司生產(chǎn);0.22μm濾膜,美國(guó)Agela公司生產(chǎn)。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品:丁硫克百威和克百威,由農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測(cè)總站提供。1.2方法1.2.1紫菜樣品的制備抽取不同季節(jié)、不同地區(qū)的批發(fā)市場(chǎng)、蔬菜大棚、超市等地購(gòu)買的韭菜,每個(gè)樣品取3kg。切好韭菜,取約200g攪好的樣品放入聚乙烯瓶,做標(biāo)簽,于-20~-16℃條件下冷凍保存。1.2.2不同添加水平下百威樣品ph的調(diào)整將試材制成勻漿,稱取10g試樣裝于50ml離心管中,共稱42份,向其中36份添加丁硫克百威標(biāo)準(zhǔn)品,其中18份樣品的添加水平為0.050mg/kg,另外18份樣品的添加水平為0.200mg/kg。分別從添加水平為0.050、0.200mg/kg的樣品中各取9份,用飽和碳酸鈉溶液將其pH調(diào)整至7.5。同時(shí)將6份空白樣品pH均調(diào)整到7.5。樣品處理具體步驟見表1。1.2.3微生物濾膜的制備向盛有10g試樣的離心管中加入20.0ml乙腈,振搖30min。加入8~10g氯化鈉,劇烈振搖1min,5000r/min下離心3min。取出約1ml,過(guò)0.22μm微孔濾膜,待測(cè)。用上述方法處理對(duì)照樣品,將得到的提取液分別配制濃度為0.025、0.100mg/L的丁硫克百威基質(zhì)標(biāo)樣和濃度為0.025、0.100mg/L的克百威基質(zhì)標(biāo)樣,待測(cè)。1.2.4醋酸銨-甲醇法色譜柱:C18,50mm×2.00mm,2.5μm;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:1μl;定性定量離子對(duì):克百威222/165、222/123,丁硫克百威381/76、381/118;洗脫液為1mmol醋酸銨-甲醇,流速0.3ml/min,梯度洗脫程序:1mmol醋酸銨-甲醇體積比分別為90∶10、90∶10、5∶95、5∶95、90∶10、90∶10時(shí),總時(shí)間依次為0、0.15、3.50、8.00、8.10、12.00min。在上述條件下丁硫克百威和克百威色譜分別見圖1和圖2。1.2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)樣樣品的測(cè)定應(yīng)遵循空白、空白平行、標(biāo)樣、添加標(biāo)、添加標(biāo)平行、樣品順序進(jìn)樣。每隔10個(gè)左右樣品打1針標(biāo)樣,以校對(duì)機(jī)器的平行性和準(zhǔn)確性。以保留時(shí)間和定性定量離子對(duì)定性,以樣品的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)液的峰面積比較定量。2結(jié)果與分析2.10.hph法由表2和表3可知,在0.050mg/kg添加水平下,無(wú)論調(diào)pH與不調(diào)pH,回收率都呈下降趨勢(shì),但第1次與第2次之間較第2次與第3次之間下降速度快很多。由于丁硫克百威能夠水解為克百威和3-羥基克百威的特性,還有韭菜所出現(xiàn)的基質(zhì)效應(yīng),有些數(shù)據(jù)有待進(jìn)一步試驗(yàn)驗(yàn)證。2.20.g/ml添加水平由表4和表5可知,與0.050mg/kg添加水平相似,在0.200mg/kg添加水平下,無(wú)論調(diào)pH與不調(diào)pH,回收率都呈下降趨勢(shì)。2.3添加回收率試驗(yàn)在空白樣品中添加0.050、0.200mg/kg2種濃度的克百威和丁硫克百威,進(jìn)行添加回收率試驗(yàn),結(jié)果見表2~5中第1次測(cè)定結(jié)果。結(jié)果表明,克百威和丁硫克百威的回收率都在70%~130%,精密度在20%以內(nèi),說(shuō)明該方法的精密度較好,前處理和儀器條件都較穩(wěn)定。3檢測(cè)方法的選擇試驗(yàn)結(jié)果表明,克百威和丁硫克百威在0.050mg/kg與0.200mg/kg添加水平下,無(wú)論調(diào)pH與不調(diào)pH,回收率都呈下降趨勢(shì),并且大部分丁硫克百威能夠在15d左右降解到國(guó)家限量值以下。根據(jù)上述特性,有關(guān)部門可加強(qiáng)監(jiān)管力度,建立相應(yīng)的管理措施,從而使該種農(nóng)藥的殘留降到最低。試驗(yàn)選取具有代表性的蔬菜———韭菜,來(lái)測(cè)定丁硫克百威的降解度,采用目前我國(guó)比較先進(jìn)的液質(zhì)聯(lián)用技術(shù),結(jié)合國(guó)標(biāo)GB/T20769-2008的檢測(cè)方法,在原有試驗(yàn)方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行了較大改動(dòng),不但節(jié)約時(shí)間,簡(jiǎn)化了樣品的前處理步驟,而且還具有操