肌苷片-天津醫(yī)藥人才網(wǎng)

我國生化藥的現(xiàn)狀、發(fā)展趨勢及質(zhì)量控制天津市藥品檢驗所黃哲甦一、概述生化藥品一般系指從動、植物及微生物提取的，和用化學(xué)合成或用現(xiàn)代生物技術(shù)制得的一類天然藥物，如氨基酸及其衍生物、多肽、蛋白、酶、輔酶、多糖、核苷酸及其衍生物等生命基本物質(zhì)。該類生化藥物具有針對性強、毒副作用低、易為人體吸收等特點。尤其對嚴重危害人類健康和生命的疾病，如心腦血管病、腫瘤、病毒疾患和糖尿病等方面有其獨特的治療效果。因而深受人們的關(guān)注，并且日益受到各國醫(yī)藥界的重視。二、生化藥品分類：按國家教委指定的生化制藥專業(yè)教科書的規(guī)定范圍：氨基酸及其衍生物、酶和輔酶、核苷酸及其衍生物、多肽、蛋白、多糖、脂類等。二、生化藥品分類

1、氨基酸及其衍生物氨基酸是生命體重要的組成部分蛋白質(zhì)的基本組成單位，生命活動表現(xiàn)出各種生理功能，主要取決于蛋白質(zhì)分子中的氨基酸的排列順序以及形成特定的三維空間結(jié)構(gòu)。二、生化藥品分類蛋白質(zhì)氨基酸生命體生命體健康疾病解聚聚合正常代謝紊亂維持缺失代謝紊亂二、生化藥品分類根據(jù)以上描述，氨基酸類藥物是治療蛋白質(zhì)代謝紊亂和缺乏所引起的一系列疾病的生化藥，也是有高等營養(yǎng)價值的蛋白質(zhì)補充劑，有著廣泛的生化作用和臨床療效。二、生化藥品分類2、多肽和蛋白質(zhì)多肽和蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)廣泛存在的重要生化物質(zhì)，具有多種多樣的生化功能。目前，多肽類生化藥的發(fā)展正在朝著臨床應(yīng)用十分廣泛和有效的道路前進。多肽類激素和活性肽都是細胞自制的、含調(diào)節(jié)生理和代謝效能的微量有機物，常用的氨基酸有20多種。如：胸腺素有40個肽，目前正在一個個的合成，除原料藥胸腺素外，已逐步合成胸腺三、四、五、八、九、二十四肽等。二、生化藥品分類隨著生物技術(shù)的深入發(fā)展，生命的奧秘已經(jīng)逐步被揭開，用重組技術(shù)生產(chǎn)的蛋白質(zhì)藥物正以驚人的速度突飛猛進。FDA已批準30多個重組藥物，如insulin、rhGH。蛋白質(zhì)是構(gòu)成生物體的一類最重要的有機含氮化合物，是塑造一切細胞和組織的基本材料，是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)。隨著現(xiàn)代rTPA、干擾素-2a、α-2b、a-N3、β-1b、r、r-1b；EPO-a、β；1L-2、GSF、GM-CSF……2005年，全球為600多億美元，從原占醫(yī)藥的4%迅速提高至11%。二、生化藥品分類3、酶與輔酶酶是具有催化功能的蛋白酶。酶類藥物是直接用酶的各種劑型以改變體內(nèi)酶的活力或改變體內(nèi)某些生理活性物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的數(shù)量等，從而達到治療某些疾病的目的。二、生化藥品分類4、多糖多糖是由單糖縮合而成的鏈狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)。在自然界中存在的多糖起結(jié)構(gòu)作用或作為一種能量的儲存形式而起重要作用，所有多糖都可被酸水解而產(chǎn)生單糖或單糖的衍生物。二、生化藥品分類5、核酸類藥物核酸是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，它不僅是攜帶各種生物所特有的遺傳信息，而且影響生物的蛋白質(zhì)合成和脂肪、糖類的代謝。二、生化藥品分類核酸核苷酸磷酸堿基嘌呤嘧啶二、生化藥品分類除以上以天然的形式存在的外，尚有它們的類似物、衍生物或它們的聚合物亦均屬于核苷類藥物，主要在干擾抗腫瘤代謝、干擾抗病毒代謝、放射病、血小板減少癥、白細胞減少癥、急慢性肝炎、心腦血管、肌肉萎縮、代謝障礙等疾病中發(fā)揮作用。二、生化藥品分類6、脂質(zhì)類脂質(zhì)是脂肪、類脂及其衍生物的總稱。廣泛存在于動物、植物、微生物等生物體中。該類藥物的種類繁多，結(jié)構(gòu)差異，性能差別很大。一般分為：膽酸類、不飽和脂肪酸類、磷脂類、固醇類、色素類。故藥理作用和臨床應(yīng)用各不相同。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

1、氨基酸及其衍生物（2010版藥典）乙酰半胱氨酸、乙酰半胱氨酸顆粒、噴霧用乙酰半胱氨酸、乙酰谷酰胺、乙酰谷酰胺注射液、門冬氨酸、門冬酰胺、門冬酰胺片、甘氨酸、甘氨酸沖洗液、丙氨酸、甲硫氨酸、甲硫氨酸片、色氨酸、色甘酸鈉、色甘酸鈉氣霧劑、色甘酸鈉滴眼液、異亮氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、谷氨酸片、谷氨酸鈉、谷氨酸鈉注射液、谷氨酸鉀注射液、谷丙甘氨酸膠囊、苯丙氨酸、組氨酸、亮氨酸、鹽酸賴氨酸、鹽酸精氨酸、鹽酸精氨酸片、鹽酸精氨酸注射液、胱氨酸、胱氨酸片、脯氨酸、酪氨酸、精氨酸、纈氨酸。

三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

2、酶與輔酶（2010版藥典）門冬酰胺酶（埃希）、注射用門冬酰胺酶（埃希）、門冬酰胺酶（歐文）、注射用門冬酰胺酶（歐文）、抑肽酶、注射液抑肽酶、尿激酶、注射用尿激酶、細胞色素C溶液、細胞色素C注射液、注射用細胞色素C、玻璃酸酶、注射用玻璃酸酶、胃蛋白酶、胃蛋白酶片、胃蛋白酶顆粒、含糖胃蛋白酶、胰蛋白酶、注射胰蛋白酶、胰酶、胰酶腸溶片、胰酶腸溶膠囊、胰激肽原酶、輔酶Q10、輔酶Q10片、輔酶Q10軟膠囊、輔酶Q10注射液、輔酶Q10膠囊、凝血酶凍干粉、糜蛋白酶、注射用糜蛋白酶。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

3、核苷酸及其衍生物（2010版藥典）三磷酸腺苷二鈉、三磷酸腺苷二鈉注射液、注射用三磷酸腺苷二鈉、肌苷、肌苷口服溶液、肌苷片、肌苷注射液、肌苷膠囊、肌苷葡萄糖注射液、肌苷氯化鈉注射液、注射用肌苷、更昔洛韋、更昔洛韋氯化鈉注射液、注射用更昔洛韋、利巴韋林、利巴韋林口服液、利巴韋林片、利巴韋林含片、利巴韋林注射液、利巴韋林膠囊、利巴韋林顆粒、利巴韋林滴眼液、利巴韋林滴鼻液、利巴韋林葡萄糖注射液、注射用利巴韋林、利巴韋林氯化鈉注射液、泛昔洛韋、泛昔洛韋片、泛昔洛韋膠囊、阿昔洛韋、阿昔洛韋片、阿昔洛韋乳膏、阿昔洛韋咀嚼片、阿昔洛韋膠囊、阿昔洛韋滴眼液、阿昔洛韋顆粒、注射用阿昔洛韋、胞磷膽堿鈉、胞磷膽堿鈉注射液、胞磷膽堿鈉葡萄糖注射液、胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液、注射用胞磷膽堿鈉、鹽酸伐昔洛韋、鹽酸伐昔洛韋片、鹽酸伐昔洛韋膠囊、鹽酸阿糖胞苷、注射用鹽酸阿糖胞苷、腺苷鈷胺、腺苷鈷胺片。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

4、多肽（2010版藥典）五肽胃泌素、五肽胃泌素注射液、甲狀腺粉、甲狀腺片、垂體后葉粉、垂體后葉注射液、鮭降鈣素注射液、縮宮素注射液、生長抑素、注射液用生長抑素。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

5、蛋白（2010版藥典）尿促性素(HMG)、注射用尿促性素、明膠、吸收性明膠海綿、重組人生長激素、重組人生長激素溶液、注射用重組人生長激素、重組人胰島素、重組人胰島素注射液、精蛋白重組人胰島素注射液、胰島素、中性胰島素注射液、精蛋白鋅胰島素注射液、絨促性素(HCG)、注射用絨促性腺素、硫酸魚精蛋白、硫酸魚精蛋白注射液、三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

6、多糖（2010版藥典）右旋糖酐20、右旋糖酐20-葡萄糖注射液、右旋糖酐20-氯化鈉注射液、右旋糖酐40、右旋糖酐40-葡萄糖注射液、右旋糖酐40氯化鈉注射液、右旋糖酐70、右旋糖酐70-葡萄糖注射液、右旋糖酐70氯化鈉注射液、肝素鈉、肝素鈉注射液、肝素鈉乳膏。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

7、其它（2010版藥典）大豆油（供注射用）、?；撬崞?、牛磺酸膠囊、?；撬嵘ⅰ⑴；撬犷w粒、?；撬岬窝垡骸⑶傲械貭?、注射用前列地爾。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

8、氨基酸及其衍生物（國家標準）乙酰半胱氨酸（供滴眼劑用）、乙酰半胱氨酸滴眼液、門冬氨酸鉀鎂片、小兒鹽酸賴氨酸顆粒、復(fù)方谷氨酰胺腸溶膠囊、復(fù)方亮氨酸顆粒（3AA）、復(fù)方鹽酸賴氨酸片、復(fù)方氨基酸注射液（6AA）、復(fù)方氨基酸注射液（17AA-1）、復(fù)方氨基酸注射液(9AA)、復(fù)方胱氨酸片、鹽酸賴氨酸片、鹽酸賴氨酸散、氨酪酸片、復(fù)方賴氨酸顆粒、對乙酰氨基酚顆粒。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

9、酶與輔酶（國家標準）木瓜酶、纖溶酶、纖溶酶注射液、注射用纖溶酶、注射用輔酶Ⅰ、復(fù)方胰酶片、復(fù)方胰酶散、復(fù)方菠蘿蛋白酶腸溶片、復(fù)方淀粉酶口服溶液、復(fù)方凝乳酶、復(fù)方凝乳酶膠囊、復(fù)方磷酸酯酶、復(fù)方磷酸酯酶腸溶片、菠蘿蛋白酶腸溶膠囊、輔酶Ⅰ、淀粉酶、淀粉酶口服溶液、維酶素、唯酶片、唯酶膠囊、溶菌酶口腔藥膜、中性蛋白酶、中性蛋白腸溶片、降纖酶。注射用降纖酶、菠蘿蛋白酶、菠蘿蛋白酶腸溶片、彈性酶腸溶膠囊。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

10、核苷酸及其衍生物（國家標準）二丁酰環(huán)磷腺苷鈣、注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣、ATP-2Na片、ATP-2Na-氯化鎂注射液、利巴韋林眼膏、阿糖胞苷、注射用阿糖腺苷、注射用三磷酸腺苷輔酶胰島素、注射用阿糖腺苷、注射用核糖核酸、注射用脫氧核苷酸鈉、核酪口服溶液、核酪注射液、核糖核酸Ⅲ、脫氧核苷酸鈉、脫氧核苷酸鈉片、脫氧核苷酸注射液。環(huán)磷腺苷葡胺注射液注射用腺苷鈷胺、核糖核酸Ⅰ、注射用核糖核酸Ⅰ、聚肌苷酸、聚胞苷酸、聚肌胞注射液、氟脲苷、注射用氟脲苷、注射用復(fù)合輔酶、三磷酸胞苷二鈉、三磷酸胞苷二鈉注射液、注射用三磷酸胞苷二鈉、核糖核酸Ⅱ、注射用核糖核酸Ⅱ、注射用抗腫瘤免疫核糖核酸、注射用抗乙肝免疫核糖核酸。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

11、多肽（國家標準第九冊）小牛脾提取物注射液、小牛脾提取物溶液、肝水解肽注射液、注射用促肝細胞生長素、科博肽注射液、促肝細胞生長素溶液、氨肽素、氨肽素片、氨肽素硫酸鋅片、科博肽、注射用科博肽、氨碘肽滴眼液、腦苷肌肽注射液、眼氨肽注射液、眼氨肽滴眼液、縮宮素溶液、薄芝糖肽注射液、蹄甲多肽、蹄甲多肽片、腦蛋白水解物注射液、肌氨肽苷注射液、小牛血去蛋白提取物注射液、骨肽注射液、轉(zhuǎn)移因子溶液、轉(zhuǎn)移因子口服溶液、轉(zhuǎn)移因子注射液、轉(zhuǎn)移因子膠囊、注射用轉(zhuǎn)移因子、氨碘肽注射液、胸腺肽溶液、胸腺肽注射液、注射用胸腺肽、蜂毒、蜂毒注射液、鹿瓜多肽注射液、復(fù)方骨肽注射液、骨肽片、聚明膠肽注射液、復(fù)方腦蛋白水解物片、復(fù)方吡拉西坦腦蛋白水解物片、腦蛋白水解物（口服用）、腦蛋白水解物片。三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

12、蛋白（國家標準）口服水解蛋白、口服水解蛋白粉（低苯丙氨酸）、水解蛋白口服液三.2010年版二部藥典和國家標準中生化藥的現(xiàn)狀和各類生化藥的分配情況

13、多糖（國家標準）肝素鈉含片、肝素鈉乳膏、肝素鈉維E乳膏、腸多糖、腸多糖片、靈桿菌多糖、金葡菌素注射液、注射用靈桿菌多糖、胃膜素膠囊、復(fù)方硫酸軟骨素片、銀耳孢糖、銀耳孢糖腸溶膠囊、硫酸軟骨素（供注射用）、硫酸軟骨素注射液、硫酸軟骨素A鈉、硫酸軟骨素A鈉膠囊、硫酸軟骨素滴眼液、靈孢多糖注射液、甘露聚糖、甘露聚糖口服溶液、甘露聚糖片、甘露聚糖注射液、甘露聚糖膠囊、銀杏蜜環(huán)口服溶液、鹽酸氨基葡萄糖、云芝胞內(nèi)糖肽、云芝胞內(nèi)糖肽口服溶液、云芝胞內(nèi)糖肽片、香菇菌多糖、香菇菌多糖片、云芝胞內(nèi)糖肽膠囊。四、我國生化藥的發(fā)展歷程、存在的問題、發(fā)展趨勢和重點1、發(fā)展歷程：我國生化制藥是建國后逐漸發(fā)展起來的，經(jīng)多年努力，已初具規(guī)模。1978年，經(jīng)國務(wù)院批準，生化藥品歸商業(yè)部食品局管理。至90年代，生化藥管理已經(jīng)歷了十幾個春秋，亦伴隨著十年改革的成長過程，由初建逐步走向健康發(fā)展的軌跡。92年經(jīng)核實有三證的企業(yè)180余家，95年產(chǎn)值達20多億人民幣，品種100多種。生產(chǎn)手段逐步從傳統(tǒng)的生物提取向新技術(shù)、現(xiàn)代生物技術(shù)邁進。目前，1990-2000年，又掀起企業(yè)的重組、剝離、合并。隨著改革的不斷深入，生化藥品在2000年后又進入了一個新的時期，除部分獨立地以生化藥為主的生產(chǎn)企業(yè)外，還有相當部分的生產(chǎn)企業(yè)，往往是生化藥、西藥、中藥均有生產(chǎn)的狀況。盡管如此，2005年生化藥年產(chǎn)值近200億人民幣，出口額為4.78億美元，近40億人民幣，形勢十分喜人，無論在數(shù)量、質(zhì)量上有長足的進步。四、我國生化藥的發(fā)展歷程、存在的問題、發(fā)展趨勢和重點2、存在的問題仍然十分突出：（1）產(chǎn)品低水平重復(fù)較嚴重，仿制品較多，自主創(chuàng)新產(chǎn)品十分匱乏；（2）產(chǎn)品結(jié)構(gòu)老化，質(zhì)量不高，新技術(shù)、新方法用的不多；（3）國內(nèi)研制新藥十分散，無規(guī)劃，信息、經(jīng)費不足，缺少創(chuàng)新人才；（4）新成果、新技術(shù)、新產(chǎn)品，因觀念、體制和政策不協(xié)調(diào)，無統(tǒng)一規(guī)劃，故新產(chǎn)品難以推廣；（5）專利瓶頸的制約。四、我國生化藥的發(fā)展歷程、存在的問題、發(fā)展趨勢和重點3、按照《我國生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展十一五規(guī)劃》的要求，隨著新世紀，生命科學(xué)研究、生物技術(shù)不斷地取得重大的突破，生物醫(yī)藥企業(yè)面臨著十分有利的機遇。（1）發(fā)展目標十分明確：2020年，我國生物藥物占全國總數(shù)的1/3，1600億至2000億；（2）我國生物藥物的資源十分豐富，據(jù)國家統(tǒng)計，有藥用動植物為12800種（包括海洋藥物）；（3）我國人口增多，經(jīng)濟增長迅速，人民收入提高，醫(yī)藥需求增長，市場潛力巨大。五、生化藥的質(zhì)量控制（一）氨基酸類藥物：1、氨基酸的定性鑒別《中國藥典》2010年版采用薄層色譜法和紅外光譜法鑒別各種氨基酸。薄層色譜法基本采用硅膠G薄層板，與對照品的主斑點進行比較；紅外光譜法將氨基酸壓制成KBr片，測定其紅外吸收圖譜與標準圖譜比較定性。五、生化藥的質(zhì)量控制2、氨基酸特殊雜質(zhì)及安全性檢查氨基酸原料中所含的特殊雜質(zhì)一般為一些其他種類的氨基酸，目前《中國藥典》2010年版采用薄層色譜法進行限量檢查；將樣品溶液配制成一定濃度的供試品溶液，取一定量供試品液稀釋后作為對照液，在同一硅膠G薄層板上，選擇一定的展開劑及顯色劑，一般規(guī)定供試品所顯雜質(zhì)斑點的顏色不得深于對照品的主斑點，以此限制其他氨基酸的含量。另《中國藥典》2010年版收載的氨基酸基本規(guī)定了細菌內(nèi)毒素的檢查，各別品種如門冬氨酸仍采用熱原檢查，以次控制安全性。五、生化藥的質(zhì)量控制3、氨基酸含量測定除谷氨酸和胱氨酸外，《中國藥典》2010年版均采用非水酸堿滴定法，即用冰醋酸作溶劑，高氯酸標準溶液滴定，電位法確定終點。本法適用于常量氨基酸的含量測定。對于各種復(fù)方氨基酸制劑中的氨基酸含量目前采用以下方法：五、生化藥的質(zhì)量控制(1)柱前衍生法：PITC衍生法、OPA-FMOC衍生法、AQC衍生法、DABS-CI衍生法、NBD-F衍生法、DNFB衍生法;(2)柱后衍生法（氨基酸分析儀法）：茚三酮衍生檢測法、OPA衍生檢測法；(3)直接分析法：電化學(xué)檢測法、蒸發(fā)光散射檢測法。五、生化藥的質(zhì)量控制（二）蛋白質(zhì)、多肽類藥物1、定性鑒別蛋白質(zhì)、多肽類藥物可根據(jù)其各自的物理、化學(xué)性質(zhì)、生理作用等采用不同的方法如顯色反應(yīng)、色譜法、動物試驗等進行鑒別。以胰島素為例：《中國藥典》2010年版二部收載的自豬胰臟中提取制得的胰島素和用基因工程技術(shù)制備的重組人胰島素為高純度的蛋白質(zhì)，具有降血糖作用，為重要的蛋白質(zhì)類藥物。對胰島素的鑒別采用兩種方法：五、生化藥的質(zhì)量控制（1）HPLC法，比較供試品與對照品主峰的保留值。（2）肽圖分析法，使用專一性較強的V8蛋白水解酶作用于特殊的肽鏈位點，將蛋白質(zhì)裂解成較小的片段，以0.2mol/L硫酸鹽緩沖液（pH2.3）-乙腈（90:10）為流動相A,乙腈-水（50:50）為流動相B;梯度洗脫，規(guī)定供試品溶液的肽圖譜與對照品溶液的肽圖譜一致。經(jīng)V8酶水解胰島素、對其分子碎片中的肽圖進行分析，能確定不同種屬的胰島素，該法專屬性強。五、生化藥的質(zhì)量控制2、特殊雜質(zhì)及安全性檢查對蛋白質(zhì)類藥物中所含的一些相關(guān)蛋白質(zhì)雜質(zhì)的檢查一般采用電泳法和液相色譜法。較早胰島素中有關(guān)蛋白質(zhì)的檢查，用聚丙烯酰胺凝膠電泳法，通過配制不同濃度的標準液與供試品液，經(jīng)電泳后，比較供試品與標準品各色帶的顏色與位置進行限量檢查。《中國藥典》2010年版二部，參照USP32、EP6.0由SDS改為分離度較好的HPLC法，使用C18柱，梯度洗脫及系統(tǒng)適用性試驗。胰島素中所含的大分子蛋白質(zhì)雜質(zhì)，以親水改性硅膠為填充劑，進行分子排阻色譜分離檢查。五、生化藥的質(zhì)量控制3、蛋白質(zhì)含量測定法蛋白質(zhì)是一條或多條多肽鏈組成的生物大分子。不同品種應(yīng)針對自身蛋白質(zhì)特性選擇適宜的測定方法并作相應(yīng)方法學(xué)驗證，同時應(yīng)盡可能選用與待測品種蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)相同或相近的蛋白質(zhì)作對照品?！吨袊幍洹?010年版二部附錄共收載了以下六種方法：五、生化藥的質(zhì)量控制（1）凱氏定氮法（2）福林酚法（Lowry）（3）雙縮脲法（4）2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧酸法（BCA法）（5）考馬斯亮藍法（Bradford法）（6）紫外-可見分光光度法。五、生化藥的質(zhì)量控制4、效價測定一些蛋白質(zhì)藥物的原材料來源于人、動物的組織或者體液，或者通過發(fā)酵而來，其組分不明確、按照化學(xué)藥品的質(zhì)控方式很難控制其質(zhì)量。對無適當理化方法檢定、常規(guī)化學(xué)測定方法較難建立，不能控制其質(zhì)量的藥品，生物檢定是反映產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標，具有專屬性，當前英國、美國及中國藥典都有收載。例如：五、生化藥的質(zhì)量控制生化藥名 生測方法 應(yīng)用 收載標準HMGFSH大鼠卵巢增重法鑒別ChP2005尿促性素 LH大鼠精囊增重法效價測定ChP2005HCG絨促性素 雌幼小鼠子宮增重法 效價測定 ChP2005垂體后葉 大鼠血壓升高法 效價測定 ChP2005促皮質(zhì)素 大鼠腎上腺內(nèi)維C降低 效價測定14th冊小牛脾提取物 家兔升高白細胞法 活性檢查 9th冊五、生化藥的質(zhì)量控制生化藥名 生測方法 應(yīng)用 收載標準rhGH重組人生長激素去垂體大鼠體重法和脛骨法

工藝驗證

ChP2005

降鈣素

大鼠血鈣法

工藝驗證

ChP2005

孕馬血清促性腺激素

雌幼大鼠卵巢增重法

效價測定

BP2007

升壓素

大鼠血壓升高法

鑒別

USP29

人胰高血糖素

兔血糖升高法

工藝驗證

BP2007人紅細胞生成素 小鼠網(wǎng)織紅細胞計數(shù) 效價測定ChP2005五、生化藥的質(zhì)量控制(三)酶類藥物酶是活體細胞產(chǎn)生的一類特殊蛋白質(zhì)，是專一性很強的生物催化劑，可分為單純酶和結(jié)合酶。在申報酶類新藥時，除按一般蛋白質(zhì)要求進行分子量、等電點等測定外，要根據(jù)酶的催化特性，測定酶促反應(yīng)動力學(xué)的有關(guān)數(shù)據(jù)。酶類藥物的效價測定一般以其生物學(xué)作用為基礎(chǔ)，選用特定的底物，在一定條件下比較供試品和相當?shù)臉藴势匪a(chǎn)生的特定反應(yīng)，通過等反應(yīng)劑量間比例的運算，測得供試品中活體成分的效價。五、生化藥的質(zhì)量控制目前較多地以分光光度法作為輔助測定手段。中國藥典2010年版的胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶等均采用此法測得效價。如胰蛋白酶能專一地作用于賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的羧基組成的肽鍵、酰胺鍵及酯鍵，也可水解間位羥基苯酸酯及脂肪酸酯，以及變性蛋白如酪蛋白、血紅蛋白等。因此可選用酪氨基或含有堿性氨基酸的酰胺、酯等為底物測定酶活力。因酪蛋白可被很多蛋白水解酶水解，缺乏專一性，，故目前均采用專屬性較高的合成底物。中國藥典以N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯為底物，在胰蛋白酶的作用下，酯鍵被水解為N-苯甲酰-L-精氨酸，在253nm波長處的吸光度隨酶促反應(yīng)遞增，根據(jù)吸光度的變化率計算胰蛋白酶的單位數(shù)。五、生化藥的質(zhì)量控制尿激酶是由新鮮人尿經(jīng)分離提純后制得的一種堿性蛋白水解酶，其效價《中國藥典》一直采用“氣泡上升法”。原理為利用本品激活纖維蛋白溶酶原，使其轉(zhuǎn)化為纖維蛋白溶酶。而纖維蛋白原在凝血酶作用下，轉(zhuǎn)變成纖維蛋白凝塊，此凝塊在纖維蛋白溶酶作用下，水解為可溶性小分子多肽，以尿激酶的濃度為橫坐標，纖維蛋白凝塊的溶解時間為縱坐標，雙對數(shù)作標準曲線求得供試品效價。該法簡便、準確、快速。目前酶類藥物分析方法整體上還停留在根據(jù)它們各自的生物學(xué)作用設(shè)計的生物測定法水平。五、生化藥的質(zhì)量控制(四)多糖類藥物多糖的分子量很大，常帶負電荷，水合度較大，水溶液具有一定的粘度，能被酸或酶水解成單糖和低聚糖或其他組分多糖的成分。含糖醛酸和氨基糖基的多糖，如肝素、透明質(zhì)酸等均具有酸性。多糖類分子中單糖組成的不同，糖苷鍵的連接方式和位置的不同以及相對分子質(zhì)量的不同等構(gòu)成了不同生理功能和生物活性。多糖類藥物的理化特性主要包括比旋度、特性粘數(shù)、分子量測定、純度檢查及含量測定等。五、生化藥的質(zhì)量控制1、分子量測定多糖的相對分子質(zhì)量可用以下方法測定：（1）高效液相色譜法《中國藥典》2010年版二部附錄VH收載了用分子排阻色譜法測定多糖的分子量與分子量分布。測定應(yīng)選用與供試品大小相適應(yīng)的色譜柱填充劑，與供試品分子結(jié)構(gòu)與性質(zhì)相同的或相似的對照品和適宜的GPC軟件。采用GPC專用軟件，可或得供試品歸一化色譜圖，微分、積分分子量分布圖，各時間點的分子量（片段數(shù)據(jù)）和各種平均分子量，根據(jù)供試品需要選擇各項測定結(jié)果。（2）其他測定法例如用粘度計測定特性粘度，從而推算平均相對分子質(zhì)量。用超速離心分析法，根據(jù)沉降系數(shù)（S）和擴散系數(shù)（D）,推算平均相對分子質(zhì)量等。五、生化藥的質(zhì)量控制2、含量測定糖類藥物的含量測定方法有比色法、紫外-分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法、生物測定法等。例如：硫酸軟骨素鈉，《中國藥典》2010年版，采用高效液相色譜法，用專一性很強且靈敏的酶解法分離硫酸軟骨素呈——A、B、C。再用離子色譜柱法很好分離硫酸軟骨素成B、C和A。使用硫酸軟骨素鈉對照品，按外標法以硫酸軟骨素B、C和A的峰面積之和計算。該法的特點，只能測豬軟骨素（A/C有固定值），因國外來源很雜（牛、豬、禽、海洋動物），靈敏度優(yōu)于USP和EP的電泳法、EP為滴定時，因無專屬性使將其它多糖混雜于方法中，使硫酸軟骨素含量偏高。五、生化藥的質(zhì)量控制另肝素可根據(jù)其抗凝血作用，采用生物檢定法，比較肝素標準品與供試品延長新鮮兔血或兔、豬血漿凝結(jié)時間的作用，來測定供試品的效價。五、生化藥的質(zhì)量控制(五)核酸和核苷酸類藥物核酸是由數(shù)十個到數(shù)十萬個核苷酸連接而成的高分子化合物，核酸組成中的堿基嘌呤化合物和嘧啶化合物都具有抗腫瘤作用。五、生化藥的質(zhì)量控制1、定性鑒別核酸類藥物的定性鑒別較常采用的方法有：顯色或沉淀反應(yīng)、紫外光譜法和紅外光譜法等。如含三磷酸腺苷的樣品，經(jīng)水解后，加氯化鋇