中藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥理學(xué)研究

中藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥理學(xué)研究

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（ra）是一種全身免疫性疾病，主要表現(xiàn)為小關(guān)節(jié)損傷引起的對(duì)稱性和多環(huán)芳烴。病理上，它是由滑膜性炎癥和血管損傷引起的，關(guān)節(jié)的軟骨和骨會(huì)遭到破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失。目前尚未完全清楚類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制,如何有效地防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎已經(jīng)引起臨床的普遍關(guān)注。中藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎不僅歷史悠久、來(lái)源廣泛、種類豐富,而且藥理作用復(fù)雜多樣,在臨床上取得了一定療效,具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。因此,從天然藥物中尋找抗類風(fēng)濕藥已成為研究熱點(diǎn),其中黃酮類單體成分具有一定的代表性。本文根據(jù)近年來(lái)文獻(xiàn)報(bào)道,歸納總結(jié)了黃酮類單體成分治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制,為從天然藥物中篩選治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物提供一定的依據(jù)。黃酮類成分木犀草素(luteolin)存在于菊花、金銀花等多種中藥中,槲皮素(quercetin)存在于槐米、桑葉、銀杏葉、三七等中藥中,川陳皮素(nobiletin)主要存在于蕓香科植物川橘果皮中,金雀異黃素(genistein)主要存在于豆科植物中,表沒(méi)食子兒茶素酸酯(EGCG)來(lái)源于茶葉,橙皮素(hesperetin)和橙皮苷(hesperidin)是蕓香科柑橘屬藥用植物果實(shí)的主要有效成分,葛根素(puerarin)由豆科植物野葛的干燥根中提取分離得到,蘆丁(rutin)在自然界分布廣泛,主要來(lái)源于連翹、槐米、夏枯草、益母草等多種中藥。黃酮類單體成分作用機(jī)制復(fù)雜,黃酮類中藥單體成分治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用靶點(diǎn)見(jiàn)表1。1抑制脂多糖lps誘導(dǎo)的分化產(chǎn)物木犀草素通過(guò)抑制小鼠白細(xì)胞介素-2(IL-2)mRNA、γ干擾素(IFN-γ)mRNA的表達(dá)來(lái)抑制T細(xì)胞的增殖和活化,抑制小鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)、p65蛋白入核和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的磷酸化,通過(guò)NF-κB信號(hào)通路抑制T細(xì)胞的功能,從而產(chǎn)生抑制免疫的作用;還可顯著地抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的前列腺素E2(PGE2)的生成,降低NF-κB的DNA結(jié)合活性,下調(diào)LPS誘導(dǎo)的環(huán)氧酶-2(COX-2)mRNA、NF-κB和COX-2蛋白的表達(dá),產(chǎn)生抗炎作用。槲皮素能通過(guò)非依賴機(jī)制抑制IFN-γ和IL-2細(xì)胞因子產(chǎn)生,抑制T-bet依賴的IFN-γ產(chǎn)生和減少IL-2Rα依賴的IL-2表達(dá)。金雀異黃素顯著抑制IFN-γ的分泌,促進(jìn)IL-4產(chǎn)生,調(diào)節(jié)輔助型T細(xì)胞1型(Th1)優(yōu)勢(shì)免疫應(yīng)答,保持Th1/Th2平衡,減輕膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠的炎癥反應(yīng)。金雀異黃素還可以抑制COX-2陽(yáng)性細(xì)胞生長(zhǎng),抑制NF-κB的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。乙?；母鸶匮苌镏苄院蜕锢枚仍鰪?qiáng),能顯著抑制LPS激活的RAW264.7細(xì)胞中NF-κB的表達(dá),并下調(diào)磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(p-ERK)和磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)的水平。EGCG通過(guò)顯著抑制鼠RAW264.7細(xì)胞中NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性和核轉(zhuǎn)位,抑制破骨細(xì)胞生成。2sc橙皮素能改善類風(fēng)性方向的相關(guān)蛋白和蛋白表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是導(dǎo)致類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜基質(zhì)降解的重要因素,研究發(fā)現(xiàn)木犀草素能抑制絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號(hào)通路中的JNK與p38蛋白及激活蛋白-1(AP-1)與NF-κB,減少M(fèi)MP-1、MMP-3的分泌和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-α(TGF-α)與IL-6的表達(dá)。研究表明,槲皮素能抑制未經(jīng)刺激的及IL-1β誘導(dǎo)的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞(RASF)增殖和MMP-1、MMP-3、COX-2mRNA和蛋白的表達(dá),降低IL-1β誘導(dǎo)的PGE2產(chǎn)物量,還能下調(diào)細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)-1/2、p38、JNK磷酸化水平和IL-1誘導(dǎo)的NF-κB的活化,提示槲皮素能改善類風(fēng)性濕性關(guān)節(jié)炎骨破壞。含血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶-4(ADAMTS-4)和ADAMTS-5已被證明在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎軟骨破壞中發(fā)揮重要作用,川陳皮素干擾體外培養(yǎng)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞(RASF)中IL-1β介導(dǎo)的ADAMTS-4和ADAMTS-5的mRNA表達(dá),還能抑制CIA小鼠關(guān)節(jié)組織中ADAMTS-4和ADAMTS-5的mRNA表達(dá),抑制軟骨中聚蛋白多糖酶介導(dǎo)的蛋白聚糖降解,從而抑制CIA小鼠的軟骨破壞。研究發(fā)現(xiàn),sc橙皮苷大鼠關(guān)節(jié)彈性蛋白酶、NO、脂質(zhì)過(guò)氧化穩(wěn)定增加,而還原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶活性則明顯降低。CIA關(guān)節(jié)軟骨的侵蝕破壞是由自由基引起的,自由基被激活的中性粒細(xì)胞釋放出來(lái)或由其他生化途徑產(chǎn)生,結(jié)果表明橙皮苷對(duì)治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有一定效果。采用橙皮素處理SW982細(xì)胞,可以顯著抑制IL-1β誘導(dǎo)的JNK磷酸化和MMP-3的產(chǎn)生。3金雀異黃素opg誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡木犀草素能夠減少CIA小鼠MMP-1、MMP-3的分泌和IL-6、IL-8、IL-15、TGF-β的表達(dá),從而抑制RASF增殖,并部分阻礙其致病作用。研究表明,槲皮素劑量依賴性地促進(jìn)RASF的凋亡,同時(shí)提高半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和caspase-9酶切效率,引起線粒體膜電位濃度依賴性下降和細(xì)胞色素C向胞漿釋放,降低Bcl-2/Bax值,p53在槲皮素誘導(dǎo)的RASF的凋亡過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用,槲皮素能提高p53蛋白在絲氨酸15位點(diǎn)磷酸化水平。金雀異黃素可以下調(diào)MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的酪氨酸激酶水平,抑制ERK的磷酸化,抑制CIA大鼠RASF的增殖;還能夠下調(diào)PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的酪氨酸激酶水平,抑制蛋白激酶B(AKT)的磷酸化,調(diào)節(jié)CIA大鼠RASF增殖與凋亡的平衡;骨保護(hù)素(OPG)具有拮抗NF-κB受體活化因子配體(RANKL)的生物功能,可減少RANKL與NF-κB受體活化因子(RANK)的結(jié)合及骨質(zhì)吸收,金雀異黃素通過(guò)與雌激素受體結(jié)合,轉(zhuǎn)入核內(nèi)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,上調(diào)RASF中OPG及RANKL水平,提高OPG/RANKL值,發(fā)揮抑制骨破壞的作用。EGCG可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,通過(guò)特異性阻斷Mcl-1蛋白的表達(dá)增加RASF對(duì)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的敏感性。5,7,3′-三乙酰橙皮素(TAHP)可抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(Stat3)的激活,減少活化的Janus激酶2(Jak2)的表達(dá),促進(jìn)Bax及caspase-3表達(dá),抑制B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl-2)的表達(dá),從而抑制RASF增殖。4佐劑誘導(dǎo)型體炎因子pbmc槲皮素以劑量依賴性方式顯著抑制TNF-α的產(chǎn)生和基因表達(dá),通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κβ1和IκB,抑制促炎細(xì)胞因子TNF-α介導(dǎo)的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)產(chǎn)生抗炎作用;佐劑誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎(AA)模型小鼠實(shí)驗(yàn)表明槲皮素具有抗炎作用,且預(yù)防靶點(diǎn)在巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。蘆丁能夠抑制活化的人巨噬細(xì)胞炎癥相關(guān)的基因表達(dá),減少NO、TNF-α、IL-1、IL-6的釋放。7,3′-二甲氧基橙皮素能明顯糾正AA大鼠低下的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和抑制脾細(xì)胞IL-2的產(chǎn)生,從基因和蛋白水平降低腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)高的IL-1、TNF-α水平,同時(shí)上調(diào)過(guò)低的IL-10水平。5抗保護(hù)rasf蛋白表達(dá)的及作用川陳皮素以劑量依賴性方式抑制人滑膜細(xì)胞中IL-1誘導(dǎo)的PGE2生成,選擇性下調(diào)COX-2mRNA表達(dá),能夠干擾鼠巨噬細(xì)胞中LPS誘導(dǎo)的PGE2生成和IL-1α、IL-1β、TNF-α和IL-6等促炎細(xì)胞因子的基因表達(dá),還能下調(diào)RASF中IL-1誘導(dǎo)的基因表達(dá)和MMP-1前體及MMP-3前體的生成,同時(shí)增加內(nèi)源性MMP抑制劑TIMP-1的產(chǎn)生。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)表明:金雀異黃素劑量依賴性抑制RASF分泌TNF-α和IL-1β,產(chǎn)生抗CIA大鼠滑膜炎作用;下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和MMP-1、2、9的表達(dá)發(fā)揮抗滑膜血管新生作用。TAHP能下調(diào)AA大鼠血清及滑膜組織中IL-6水平。6黃酮類中藥單體有效成分抗類局部中藥作用廣泛,療效可靠,具有廣闊的開發(fā)前景。如何應(yīng)用好這些藥物,在發(fā)揮最大療效的同時(shí),盡可能地減少毒副作用是臨床關(guān)注的重點(diǎn)。中藥單體成分治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)的特點(diǎn),從天然產(chǎn)物特別是中藥活性成分中篩選抗類風(fēng)濕作用單體成分,探討其作用機(jī)制,尋找新的治療靶點(diǎn),是目前開發(fā)天然藥物防治類風(fēng)濕