生藥學(xué)教學(xué)課件：第四章 生藥的安全性評(píng)價(jià)

超市買菜，“青翠欲滴”擬或“不整齊，有蟲眼”的菜好？

市售茶用“菊花”真好看！“黃燦燦，整齊如一，又不會(huì)發(fā)霉或生蟲”……

這是“天然、綠色”好菊花嗎？食品質(zhì)量安全問題國(guó)民健康問題什么是安全的？？？？？？？？潲水油與地溝油中國(guó)地溝油一年的總利潤(rùn)能達(dá)到15億-20億元（鳳凰網(wǎng)，2010年3月17日）目前我國(guó)每年返回餐桌的地溝油有200萬~300萬噸。而中國(guó)人一年的動(dòng)、植物油消費(fèi)總量大約是2250萬噸——也就是說，按照比例，你吃10頓飯，可能有1頓碰上的就是地溝油。

塑化劑的前世今生第四章

生藥的安全性評(píng)價(jià)藥物最基本要求—安全

一、題目

1999年在英國(guó)發(fā)現(xiàn)了兩例因治療“濕癥”服用中藥馬兜鈴導(dǎo)致腎中毒的病例，隨后兩年內(nèi)連續(xù)在新加坡、馬來西亞、日本、韓國(guó)出現(xiàn)了類似該中藥中毒的事件，2001年1月17日，馬來西亞衛(wèi)生部一紙禁令：全面禁止銷售含有馬兜鈴酸的中藥，并取消17種含有該成分中成藥的注冊(cè)，限定所有的醫(yī)院和銷售公司馬上停止銷售和收回成藥，這些中藥“黑名單”包括了北京同仁堂的“止血散”與“氣管炎咳喘丸”。隨后其他國(guó)家如新加坡也采取了類似的處理辦法，并引發(fā)國(guó)際關(guān)于中藥安全性的質(zhì)疑，以及關(guān)于中藥安全性的大討論，我國(guó)企業(yè)的中藥企業(yè)成了“冤大頭”，損失慘重！04年本科生的期末考題

請(qǐng)你分析造成該事件的原因、危害，并提出解決之道，或者代表SDFA局長(zhǎng)和/或國(guó)家衛(wèi)生部部長(zhǎng)給馬來西亞衛(wèi)生部部長(zhǎng)寫一封信，說明中國(guó)對(duì)中藥安全性之努力，請(qǐng)他收回成命，支持中藥發(fā)展。

二、背景知識(shí)馬兜鈴，中藥叫“關(guān)木通”，來源于東北馬兜鈴（Aristolochiaemanshuriensis）主產(chǎn)東北各地，以吉林最多。藥材品種十分混亂，除馬兜鈴?fù)猓€有木通（三葉木通，五葉木通Akebiaquinata）與川木通Clematisarmandii），后兩種植物用不含馬兜鈴酸。關(guān)木通性寒，味苦，有毒，現(xiàn)代臨床主要用于肝硬化，心性與腎性水腫，尿路感染等疾病。馬兜鈴含有馬兜鈴酸A（左）與B（右），結(jié)構(gòu)式如下：小柴胡湯間質(zhì)性“肺炎”馬兜鈴酸“腎衰”活血破血中藥臟器出血復(fù)方蘆薈膠囊汞含量超標(biāo)中藥安評(píng)常忽視！從“關(guān)木通”的腎毒性事件，

到刺五加注射液、茵梔黃注射液、雙黃連注射液相繼出現(xiàn)使用致死事件，以及最近幾年的魚腥草注射液、舒血寧注射液等中藥注射劑事件，中藥注射液已備受質(zhì)疑。科普作家方舟子也對(duì)對(duì)“川貝枇杷膏”“六味地黃丸”“安宮牛黃丸”“藿香正氣水”提出了質(zhì)疑

！2014年十大食品安全事件第一大事件：沃爾瑪售含有“狐貍?cè)狻暗捏H肉第二大事件：杭州黑心企業(yè)售過期烘焙食材第三大事件：上海福喜食品大量采用過期肉第四大事件：臺(tái)灣統(tǒng)一19款產(chǎn)品涉黑心油第五大事件：“吸血鬼飲料”是三無產(chǎn)品第六大事件：恒天然奶粉出現(xiàn)食物中毒癥狀第七大事件：統(tǒng)一泡面被檢出大腸桿菌超標(biāo)第八大事件：無籽水果含避孕藥第九大事件：昆明黑心商販造有毒米線第十大事件：淡水魚生魚片含肝吸蟲2012年國(guó)家食品藥品監(jiān)管局發(fā)布通報(bào)，提醒關(guān)注維C銀翹片安全性。2004年1月1日至2010年4月30日，有關(guān)維C銀翹片的病例報(bào)告數(shù)共1885例，嚴(yán)重病例48例，無死亡報(bào)告。嚴(yán)重病例的不良反應(yīng)表現(xiàn)為：全身皮疹伴瘙癢、嚴(yán)重蕁麻疹、重癥多形紅斑型藥疹、大皰性表皮松解癥；肝功能異常；過敏性休克、昏厥；間質(zhì)性腎炎；白細(xì)胞減少等…！2013年食品安全第七大事件維C銀翹片“含毒”，中成藥安全引人憂

2013年4月，廣藥子公司廣西盈康藥業(yè)及其上游企業(yè)寶山堂被曝違法使用硫磺熏蒸的山銀花及其枝葉生產(chǎn)藥品，存在以山銀花枝葉代替山銀花的投料問題，其出產(chǎn)的維C銀翹片可能涉“毒”！……影響生藥安全性的主要因素因素1.內(nèi)源性有害物質(zhì)a.肝毒性成分:肝毒吡咯里西啶生物堿(HPAs)

b.腎毒性成分:馬兜鈴酸(AA)

2.重金屬及有害元素3.農(nóng)藥殘留：如有機(jī)氯化合物,有機(jī)磷化合物,擬除蟲菊酯類等

4.其他有害物質(zhì)：黃曲霉素(AF),二氧化硫

外源性有害物質(zhì)第1節(jié)生藥中內(nèi)源性有害物質(zhì)的檢測(cè)與危害一、生藥中主要的內(nèi)源性有害物質(zhì)野百合堿千里光堿肝毒性成分HPAs（肝毒吡咯里西啶生物堿）肝毒性成分？鑒別本身無毒馬兜鈴酸(AA)中草藥腎病（馬兜鈴酸腎?。┒⒎植?.HPAs主要分布于有花植物，如紫草科(所有屬)，菊科(千里光族及澤蘭族)及豆科的豬屎豆屬。2.AA

主要分布于馬兜鈴屬如有馬兜鈴（北馬兜鈴的果實(shí)）、青木香（馬兜鈴的根部）、天仙藤（馬兜鈴的莖）、關(guān)木通（木通馬兜鈴）、尋骨風(fēng)（綿毛馬兜鈴）、廣防己和朱砂蓮等。

三、檢測(cè)方法HPLCHPCEHPLC-MSHPCE-MS四、限量

如德國(guó)衛(wèi)生部規(guī)定，內(nèi)服含HPAs的植物藥制劑，每天攝取量不得超過1μg，外用時(shí)，每天攝取量不得超過100μg

。

第2節(jié)生藥中重金屬和有害元素的檢測(cè)

生藥中一類重要的外源性有害物質(zhì)就是重金屬(heavymetals)及有害元素(hazardouselements)。重金屬系指在實(shí)驗(yàn)條件下能與S2-作用顯色的金屬雜質(zhì)，如：鉛、銀、汞、銅、鎘、錫、銻、鋁等。一般在藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查時(shí)以鉛為代表。常見對(duì)人體有害的元素和重金屬元素主要有：砷、汞、鉛、鎘、銅、鋁等。

一、生藥中重金屬及有害物質(zhì)的來源1.與其生長(zhǎng)的環(huán)境條件如土壤、大氣、水、化肥、農(nóng)藥的施用等有關(guān)。2.與植物本身的遺傳特性和對(duì)該類元素的富集能力等有關(guān)。3.生產(chǎn)過程中引入。二、生藥中重金屬和有害元素的檢測(cè)方法1.重金屬總量a.硫代乙酰胺法b.硫化鈉顯色反應(yīng)—比色法

砷元素a.古蔡法b.二乙基二硫代氨基甲酸銀法[Ag(DDC)法]2.單個(gè)重金屬和有害元素的測(cè)定方法1.原子吸收分光光度法(AAS)

2.電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)

以鉛為代表（一）原子吸收分光光度法(AtomicAbsorptionSpectrophotometry,AAS)(自己看,結(jié)合分析化學(xué)）

此法適用于測(cè)定中藥中重金屬及有害元素鉛、鎘、砷、汞、銅。原子吸收分光光度法是基于蒸汽相中待測(cè)元素的基態(tài)原子對(duì)其共振輻射的吸收強(qiáng)度來測(cè)定試樣中該元素含量的一種儀器分析方法，具有靈敏度高、干擾較少、操作簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確、可靠等優(yōu)點(diǎn)，而且可以使整個(gè)操作自動(dòng)化，應(yīng)用廣泛。它是測(cè)定痕量和超痕量元素的有效方法。原子吸收一般遵循分光光度法的吸收定律：A=K′C也就是說，吸光度與試樣中被測(cè)組分的濃度呈線性關(guān)系計(jì)算方式與紫外可見分光光度法相類似（二）電感耦合等離子體質(zhì)譜法(InductivelyCoupledPlasma-massSpectrometry,ICP-MS)

電感耦合等離子體質(zhì)譜法是將被測(cè)物質(zhì)用電感耦合等離子體離子化后，按離子的質(zhì)荷比分離，測(cè)量各種離子譜峰的強(qiáng)度的一種分析方法。等離子體是由自由電子、離子和中性原子或分子組成，總體上成電中性的氣體，其內(nèi)部溫度高達(dá)幾千度至一萬度。樣品由霧化器霧化后由載氣攜帶從等離子體焰炬中央穿過，迅速被蒸發(fā)電離并通過離子引出接口或采樣錐導(dǎo)入到質(zhì)量分析器，樣品在極高溫度下完全蒸發(fā)和解離，電離的百分比高，因此幾乎對(duì)所有元素均有較高的檢測(cè)靈敏度。由于該條件下化合物分子結(jié)構(gòu)已經(jīng)被破壞，所以僅適用于元素分析和元素價(jià)態(tài)分析。

三、生藥中常見重金屬和有害元素的限量

重金屬和有害元素

國(guó)家貯糧

東南亞國(guó)家進(jìn)口中藥材及中成藥

砷

0.7～5.05.0鉛

2020.00銅

150150汞

0.02～0.500.50表1國(guó)家貯糧和東南亞國(guó)家規(guī)定進(jìn)口中藥材及中成藥重金屬和有害元素限量（≤百萬分之一）

鉛

鎘

砷

汞

銅

重金屬總量

甘草

50.320.220

白芍

50.320.220

白礬

20玄明粉

20

20地龍

30西瓜霜

10

10冰片

2

5龜甲膠

30阿膠

3

30金銀花

50.320.220

黃芪

50.320.220

鹿角膠

2

30連翹提取物

2

20松節(jié)油

10桉油

10黃芩提取物

20銀杏葉提取物

20表2《中國(guó)藥典（2005年版）17種生藥或提取物重金屬或有害元素的限量（≤百萬分之一）

四、生藥中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)

生藥中另一類重要的外源性有害物質(zhì)就是農(nóng)藥殘留(pesticideresidues)。生藥中常見的農(nóng)藥殘留有有機(jī)氯化合物、有機(jī)磷化合物和擬除蟲菊酯類等。生藥的種植、采收、包裝、運(yùn)輸、貯藏等各個(gè)環(huán)節(jié)都有可能和農(nóng)藥接觸，被其污染。（來源）

（一）生藥中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法主要是氣相色譜法(GC)。

此外還有高效液相色譜法、薄層色譜法、免疫吸附法、活體生物測(cè)定法等方法。

（二）生藥中農(nóng)藥殘留的限量藥材六六六（總BHC）滴滴涕(總DDT)五氯硝基苯（PCNB）甘草221黃芪221表3《中國(guó)藥典》（2005年與2010版）對(duì)藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的限量（≤千萬分之一）

外經(jīng)貿(mào)部提出了適用于藥用植物原料及制劑的進(jìn)出口品質(zhì)檢驗(yàn)的《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》，規(guī)定藥用植物及制劑的綠色品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，包括藥用植物原料、飲片、提取物及其制劑等的農(nóng)藥殘留量為六六六(BHC)≤0.1mg/kg，滴滴涕（DDT）≤0.1mg/kg，五氯硝基苯(PCNB)≤0.1mg/kg，艾氏劑(aldrin)≤0.02mg/kg

農(nóng)藥種類限量農(nóng)藥種類限量甲草胺(alachlor)0.02殺螟松(fenitrothion)0.5艾氏劑(aldrin)和狄氏劑(dieldrin)總量0.05氰戊菊酸(fenvalerate)1.5甲基谷硫磷(azinphos-methyl)1.0地蟲磷(fonofos)0.05溴螨酯(bromopropylate)3.0七氯(heptachlor)(七氯和環(huán)氧七氯的總量)0.05氯丹(chlordane)（順式和反式異構(gòu)體及氧氯丹的總量）0.05六氯苯(hexachlorobenzene)0.1毒蟲畏(chlorfenvinphos)0.5六六六(hexachlorocyclohexane)(異構(gòu)體(除γ體之外)0.3毒死蜱(chlorpyrifos)0.2林丹(lindane)(γ—

六六六)0.6甲基毒死蜱(chlorpyrifos-methyl)0.1馬拉硫磷(malathion)1.0氯氰菊酯(cypermethrin)(及異構(gòu)體)1.0殺撲磷(methidathion)0.2滴滴涕(DDT)(p,p′—DDT、o,p′—DDT、p,p′—DDE及p,p′—TDE的總量)1.0對(duì)硫磷(parathion)0.5溴氰菊酸(deltamethrin)0.5甲基對(duì)硫磷(parathion-methyl)0.2二嗪農(nóng)(diazinon)0.5芐氯菊酯(permethrin)1.0敵敵畏(dichlorcvos)1.0伏殺磷(phosalone)0.1二硫代氨基甲酸鹽類(dutguicarbanates)(以CS2計(jì))2.0胡椒基丁醚(piperonylbutoxide)3.0硫丹(endosulfan)(硫丹異構(gòu)體及硫丹硫酸鹽的總量)3.0蟲螨磷(pirimiphos-methyl)4.0異狄氏劑(endrin)0.05除蟲菊酯類(pyrethrins)(總量)3.0乙硫磷(ethion)2.0五氯硝基苯(quintozene)(五氯硝基苯、五氯苯胺及甲基五氯酚硫化物的總量)1.0表4《英國(guó)藥典》（2002年版）規(guī)定的植物藥農(nóng)藥殘留限量（≤mg/kg）

五、生藥中其他有害物質(zhì)的檢測(cè)（一）生藥中常見的其他有害物質(zhì)

1.黃曲霉素

1960年，英國(guó)一家農(nóng)場(chǎng)發(fā)生了10萬只雛火雞突然死亡的事件。解剖顯示，這些火雞的肝臟已嚴(yán)重壞死。經(jīng)過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這些雛火雞食用了霉變的花生粉，這是造成其肝壞死和中毒死亡的主要原因。霉變的花生粉中含有一系列由黃曲霉菌產(chǎn)生的活性物質(zhì)，這些物質(zhì)就是黃曲霉素（Aflatoxin,AF），它不僅可引起劇烈的急性中毒，而且還是目前所知致癌性最強(qiáng)的化學(xué)物質(zhì)。

黃曲霉素的結(jié)構(gòu)AFB1AFG1臨床表現(xiàn)早期有胃部不適、腹脹、厭食、嘔吐、腸鳴音亢進(jìn)、一過性發(fā)熱及黃疸等。2～3周后出現(xiàn)腹水、下肢水腫、脾臟增大變硬、胃腸道出血、昏迷甚至死亡。

黃曲霉素是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的二呋喃香豆素的衍生物，目前已分離鑒定出12種以上，分為AFB1

與AFG1

兩大類，其基本結(jié)構(gòu)都是二呋喃香豆素衍生物。在食品監(jiān)測(cè)中常以AFB1

作為污染指標(biāo)。溶于油、氯仿、甲醇等有機(jī)溶劑，不溶于水、乙醚、石油醚。其在紫外光下可發(fā)出藍(lán)色或綠色熒光。黃曲霉菌是空氣和土壤中存在的非常普遍的微生物，世界范圍內(nèi)的絕大多數(shù)食品原料和制成品均有不同程度的污染。黃曲霉菌在有氧、溫度高（30～33℃）和濕潤(rùn)（89%～90%）的條件下容易生長(zhǎng)，并可淘汰其拮抗菌種如青霉菌和鐮刀霉菌的生長(zhǎng)，從而造成貯存的花生、玉米、大米、小麥、大麥、棉籽和大豆等多種谷物的污染變質(zhì)，其中，又以花生和玉米的污染最為嚴(yán)重（來源）。

2.二氧化硫

中藥材在加工時(shí)，常常都會(huì)加上硫磺熏蒸作為處理程序之一，達(dá)到漂白藥材及殺菌防腐的目的。在食品行業(yè)中，二氧化硫是常用的防腐劑，主要用于飲料和干果等類食物，作用在于保持食物的色澤和防止霉變。

國(guó)家食品藥品監(jiān)管局制訂中藥材及其飲片二氧化硫殘留限量標(biāo)