四逆湯的藥理作用及配伍機制研究進展

四逆湯的藥理作用及配伍機制研究進展

四逆湯是東漢著名的醫(yī)療明星張仲景的名字。它是在《傷寒論》中記錄的。這個全面的方劑由附子1、干姜1、2根和2根組成。它可以恢復(fù)陽氣，促進血液循環(huán)，緩解少陰病，如四肢痙攣、下肢隱痛、嘔吐、腹痛、苔蘚白膩、脈搏緩慢或細。方中以附子為君,干姜為臣,甘草為佐使。現(xiàn)代臨床療效觀察和動物實驗研究均表明,四逆湯具有強心、升壓、抗休克、提高免疫功能等作用,能保護心腦血管系統(tǒng)和腸粘膜,對冠心病、心絞痛、動脈粥樣硬化、腦梗死、高脂血癥等有較好的治療效果［1-2］。本文概括歸納了組方藥物的主要化學(xué)成分及對心血管系統(tǒng)的藥理作用,并對四逆湯減毒增效的配伍機制進行了初步探討。1抗心肌缺血作用1.1附子的化學(xué)成分附子為毛茛科植物烏頭AconitumcarmichaeliDebx.的子根的加工品,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。其主要成分為二萜類生物堿,包括C19型和C20型二萜類生物堿。C19型二萜生物堿種類較多,根據(jù)C8和C14位取代基團結(jié)構(gòu)的不同,可分為雙酯型、單酯型和醇胺型［3］。研究表明［4］,雙酯型烏頭堿類對熱不穩(wěn)定,在高溫煎煮過程中,C8位的乙?；人?轉(zhuǎn)化成單酯型苯甲酰烏頭原堿類,繼續(xù)水解則脫去C14位的苯甲?；?生成醇胺型烏頭原堿類。1.2附子的毒理學(xué)研究雙酯型二萜類生物堿(烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿)是附子的毒性成分,易導(dǎo)致嚴重的心律失常、呼吸抑制和休克,甚至死亡［4］。其毒性機制研究很多,主要與Na+,K+離子通道的改變、能量代謝障礙和細胞凋亡等有關(guān)［5］。故臨床上使用附子必須經(jīng)過浸泡-漂洗-煎煮,或加豆腐、甘草、黑豆共制等炮制方法［6］,將劇毒成分水解為毒性較小及很小的單酯型和醇胺型生物堿［7］。1.3附子對心血管系統(tǒng)的作用1.3.1強心附子為“回陽救逆第一品藥”,能明顯增強離體心衰蛙心的心肌收縮力,且在一定濃度范圍內(nèi)(0.625~70g·L－1)與此效應(yīng)呈良好的線性關(guān)系［8］。附子的多種成分(如去甲烏藥堿、去甲豬毛菜堿、氯化甲基多巴胺、尿嘧啶、附子苷、醇胺類生物堿等)具有正性肌力的作用［9］。其中去甲烏藥堿具有激動β-腎上腺素能受體的活性,但含量很少。氯化甲基多巴胺對α受體有興奮作用,去甲豬毛菜堿則對α和β受體均有興奮作用。1.3.2抗心肌缺血、抗心律失常烏頭類生物堿具有擴張冠狀血管,增加外周和冠脈血流量的作用、烏頭堿在未致心室纖顫時,小劑量就已產(chǎn)生抗急性心肌缺血的作用［10］。實驗結(jié)果表明,附子總生物堿能改善缺血心肌的能量代謝,是附子抗心肌缺血的有效成分［11］。烏頭類生物堿易導(dǎo)致心律失常,但附子中同時也存在抗心律失常的物質(zhì),如heteratisine,napelline,高烏甲素等［4］。1.3.3抗休克附子及其復(fù)方對失血性休克、內(nèi)毒素性休克和心源性休克都有明顯防治效果。目前認為其抗休克的有效成分為去甲烏藥堿、尿嘧啶等［4］。2甘草的、甘草活性、心血管系統(tǒng)及心功能2.1甘草的化學(xué)成分甘草為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch、脹果甘草GlycyrrhizainflateBat,或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根及根莖。其主要有效成分為三萜皂苷類和黃酮類。甘草酸又名甘草甜素,是含量最高的皂苷類物質(zhì),口服后很難以原形狀態(tài)被吸收,經(jīng)胃腸道細菌水解生成甘草次酸后吸收入血。甘草苷、甘草素、異甘草苷、異甘草素等是甘草中最主要的黃酮類物質(zhì)［12］。2.2甘草對心血管系統(tǒng)的作用2.2.1抗心律失常炙甘草湯為治療“心動悸,脈結(jié)代”的名方,現(xiàn)代廣泛應(yīng)用于冠心病、心絞痛和早搏病人的臨床治療［13-14］。甘草中的黃酮類成分可明顯對抗烏頭堿、氯化鋇、CaCl2-Ach混合液或結(jié)扎左冠狀動脈前降支等各種原因誘發(fā)的室性心律失常,具有負性頻率和負性傳導(dǎo)的作用,減少室顫率［15］。仰禮真等［16］推測甘草次酸抗心律失常的機制可能與促使L型鈣通道開放,增加心肌細胞內(nèi)鈣濃度有關(guān)。2.2.2心肌保護作用貓的心肌缺血再灌注損傷實驗證實甘草酸單銨鹽能抑制血清中磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脫氫酶(LDH)的釋放,降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)的含量,明顯增加超氧化物歧化酶(SOD)的活性,保護心肌細胞［17］。烏拉爾甘草的己烷/乙醇提取物(不含甘草酸)15mg·L－1預(yù)處理24h能顯著對抗阿霉素誘發(fā)的H9c2大鼠心肌細胞凋亡,蛋白免疫印跡結(jié)果顯示甘草提取物能明顯降低被升高的p53、磷酸-p53和Bax水平,升高被降低的Bcl-xL水平,減輕阿霉素導(dǎo)致的心臟毒性［18］。3第二、特殊活性化合物及分子的活性成分3.1干姜的化學(xué)成分干姜為姜科植物姜ZingiberofficinaleRosc.的干燥根莖。干姜與生姜成分類似,主要含揮發(fā)油和辛辣成分兩大類。揮發(fā)油成分以β-水芹烯、莰烯等為主。辛辣成分主要有姜辣素、姜烯酚和姜酮等酚類成分,姜酚是其主要的活性成分［19］。3.2干姜對心血管系統(tǒng)的作用3.2.1改善心功能作用干姜提取物能改善戊巴比妥鈉所致兔急性心衰的心肌舒縮性能,減輕心衰癥狀,降低心肌耗氧量,改善血流動力學(xué),保護心肌細胞［20］。3.2.2改善血液循環(huán)作用干姜提取物(2g·L－1)抑制去甲腎上腺素誘導(dǎo)的血小板聚集效果與阿司匹林類似,其抑制率可達100%［21］。3.2.3抗氧化作用姜在體內(nèi)和體外都具有顯著的抗氧化作用,對缺氧缺糖引起的乳鼠心肌細胞損傷有明顯的保護作用,明顯提高過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)的水平,清除氧自由基,其效果可與抗壞血酸相當(dāng)［21-22］。4逆湯有效組分的研究四逆湯的化學(xué)成分主要包括四大類:雙萜類生物堿、黃酮類、三萜皂苷類和姜辣素。Tan等［23］對四逆湯拆方和全方的體內(nèi)外樣品進行了研究,歸屬了含藥血漿中38個色譜峰的來源,包括33種原型成分(主要為二萜生物堿、黃酮類成分和少量的皂苷類化合物)和5種代謝物(分別為葡萄糖醛酸甘草素、葡萄糖醛酸芒柄花素、葡萄糖醛酸異甘草素、葡萄糖醛酸-6-姜酚和甘草次酸)。目前對四逆湯作用于心血管系統(tǒng)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究報道比較少。附子生物堿是四逆湯有效成分組合中的關(guān)鍵因素,而干姜揮發(fā)油和甘草酸也是組方中不可或缺的因素［24］。實驗結(jié)果證明森布星B和去甲豬毛菜堿為四逆湯抗心肌缺血的可能藥效成分［25］,為進一步研究四逆湯“回陽救逆”的作用機制奠定基礎(chǔ)。5治療藥物及藥物與東北部的相互作用5.1四逆湯的減毒機制研究與附子單煎液比較,附子-甘草合煎液對大鼠心臟的毒性程度顯著降低［26］。正如《本草經(jīng)集注》云:“俗方每用附子,須甘草、人參、生姜相配者,正制其毒故也”。附子-甘草作為配伍減毒的代表藥對,目前對其減毒機制的研究主要集中在配伍前后煎液中毒性成分溶出量的變化,而從吸收代謝動力學(xué)角度考慮配伍后多組分間的相互作用研究則較少。附子中主要含烏頭類生物堿,甘草中主要含有甘草酸和甘草次酸等酸性皂苷類成分,兩者是一對酸堿藥對。陳建萍等［27］實驗表明,附子與甘草同煎后,附子中的烏頭類生物堿與甘草中的甘草酸發(fā)生沉淀反應(yīng),生成不溶于水的大分子絡(luò)合物,降低了藥液中烏頭堿和次烏頭堿的含量。附子-甘草配伍減毒作用也與甘草影響附子毒性成分在胃腸道的吸收過程有關(guān)［28］,烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的達峰濃度(Cmax)和藥-時曲線下面積(AUC)均降低,減緩了有毒成分的吸收,從而發(fā)揮解毒作用。甘草對細胞色素P450(CYP)有誘導(dǎo)作用［29］,附子具有抑制CYP酶活性的作用,當(dāng)附子與甘草合用時,對肝藥酶的誘導(dǎo)起到了主導(dǎo)作用,通過加速附子的代謝而緩和其毒性［30］。甘草對附子在體內(nèi)的排泄過程也有影響。甘草酸的水解產(chǎn)物葡萄糖醛酸可與烏頭類生物堿的羥基形成低毒或無毒的葡萄糖醛酸絡(luò)合物,經(jīng)尿液排出體外,從而顯示出一定的減毒活性［31］。干姜也有類似甘草的解毒作用?！侗静菥V目》稱:“生姜解半夏、南星、烏頭、附子及鳥獸肉毒”。通過對附子-干姜合煎液的化學(xué)成分的分析,毒性較大的雙酯型生物堿含量降低［32］。干姜能夠抑制附子中毒性較大的雙酯型生物堿的吸收,使其在小腸中的生物利用度明顯降低,其機制可能為干姜通過誘導(dǎo)P-糖蛋白(P-gp),從而抑制作為P-gp底物的雙酯型生物堿的吸收,最終起到減毒的作用［33］。5.2四逆湯的增效機制研究甘草對附子的增效作用主要表現(xiàn)在附子中的水溶性部分與甘草中的甘草酸和黃酮類成分之間的協(xié)同作用［31］。附子無姜不熱,兩藥相須配伍為用經(jīng)常出現(xiàn)在各類方劑中,尤其是在心血管方面,干姜與附子有相似的作用,相伍后可增強心衰大鼠的心肌收縮力,減少心肌能量需求,改善冠脈血流量,達到回陽救逆的目的［34］。干姜中的主要活性成分-姜酚可以抑制CYP3A的活性［35］,可能使附子中的有效成分代謝減少,從而顯示出增效的作用。作為回陽救逆的經(jīng)典名方,四逆湯對心血管系統(tǒng)有良好的保護和治療作用。研究表明［24］,四逆湯配伍后對心衰、低血壓等疾病的療效最佳,明顯優(yōu)于各單味藥或任意兩兩組合,應(yīng)系活性成分配伍之后,相互協(xié)調(diào)、相互促進,多靶點作用于體內(nèi),發(fā)揮著協(xié)同藥效的作用,詮釋了四逆湯配伍機制的科學(xué)性。6復(fù)方藥藥配伍系統(tǒng)作用研究四逆湯是一首組方簡單、療效確切的經(jīng)典方,臨床應(yīng)用十分廣泛。目前國內(nèi)外對四逆湯的主要研