【血小板檢測(cè)現(xiàn)狀及在各類疾病中的應(yīng)用研究6200字（論文）】

血小板檢測(cè)現(xiàn)狀及在各類疾病中的應(yīng)用研究TOC\o"1-3"\h\u1前言 42血小板檢測(cè)現(xiàn)狀 42.1血小板聚集功能檢測(cè) 42.1.1比濁法檢測(cè) 42.1.2全血法檢測(cè) 52.1.3其他檢測(cè)方法 52.2血小板活化功能檢測(cè) 63血小板檢測(cè)在各類疾病中的應(yīng)用 63.1血小板檢測(cè)在糖尿病中的應(yīng)用 63.2血小板檢測(cè)在免疫炎癥反應(yīng)中的應(yīng)用 73.3血小板檢測(cè)在心血管疾病中的應(yīng)用 73.4血小板檢測(cè)在腫瘤轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用 84重組人血小板生成素的應(yīng)用及發(fā)展 85小結(jié) 9參考文獻(xiàn) 101前言血小板作為當(dāng)前臨床所發(fā)現(xiàn)的最小的循環(huán)血細(xì)胞，具有維持出凝血平衡、促進(jìn)機(jī)體止血、發(fā)揮免疫的重要作用。就目前臨床發(fā)現(xiàn)而言，血小板并不存在細(xì)胞核，但是細(xì)胞內(nèi)卻存在不少顆粒，其中有些分子顆粒承擔(dān)了促進(jìn)機(jī)體各類生理機(jī)制運(yùn)轉(zhuǎn)的重要任務(wù)[1]。盡管單個(gè)血小板體積較小，但是血液中的運(yùn)轉(zhuǎn)量較為活躍，其活躍度可以說僅次于紅細(xì)胞。根據(jù)臨床數(shù)據(jù)報(bào)道顯示血小板在血液中含量的異常與各類疾病的病理過程有極大的關(guān)系，包括糖尿病、血栓性疾病、腫瘤、炎癥等，因而對(duì)于人體重要生理活動(dòng)的運(yùn)作及維持生命運(yùn)轉(zhuǎn)均發(fā)揮重要作用。當(dāng)前在血小板功能的各項(xiàng)研究中，血栓和止血是當(dāng)前有較多相關(guān)研究的重要觀點(diǎn)，但是除了血栓性疾病，隨著越來越多臨床研究的開展，血小板也逐漸在糖尿病、膿毒癥、炎癥等疾病中展開了相關(guān)研究[2]。通過文獻(xiàn)查找國(guó)內(nèi)外目前有關(guān)血小板應(yīng)用及發(fā)展的相關(guān)報(bào)道，對(duì)目前血小板在不同疾病中的作用機(jī)制及血小板制品的應(yīng)用進(jìn)行了解，發(fā)現(xiàn)其缺少綜合及系統(tǒng)的闡述，故本論文對(duì)血小板的檢測(cè)現(xiàn)狀及其在臨床應(yīng)用發(fā)展情況進(jìn)行分析，從而為當(dāng)前臨床相關(guān)疾病的治療及對(duì)癥處理方式提供新思路的指導(dǎo)。2血小板檢測(cè)現(xiàn)狀2.1血小板聚集功能檢測(cè)血小板聚集試驗(yàn)通常可作為血小板功能不全疾病例如凝血酶原狀態(tài)及血栓性疾病的主要臨床診斷方式，當(dāng)前臨床將其作為首要的篩查標(biāo)準(zhǔn)。該試驗(yàn)通過跨膜激活血小板的各種衍生物與血小板膜受體的相互作用，激活膜表面的另一種受體糖蛋白IIb/IIa，與血漿中的纖維蛋白原結(jié)合，從而使得血小板發(fā)生聚集[3]。血小板聚集的測(cè)定是對(duì)血小板活化和釋放反應(yīng)、膜蛋白受體和其他綜合因子常見表現(xiàn)進(jìn)行反映，是血小板功能檢測(cè)的基礎(chǔ)，故而臨床上常對(duì)血小板聚集功能進(jìn)行測(cè)定，該指標(biāo)也是臨床檢測(cè)血小板活化程度的重要方式[4]。常規(guī)血小板檢測(cè)方法并不能直接對(duì)異常的血小板聚集功能進(jìn)行反映，且該方法缺乏一定的靈敏性。2.1.1比濁法檢測(cè)臨床上檢測(cè)血小板聚集功能的方法有很多種，但最早用于檢測(cè)血小板聚集功能的是渾濁度法，由Bon于1962年發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用。該方法是一種比較廣泛的檢測(cè)血小板聚集功能的方法[5]。該方法主要由于其血小板絮凝劑能夠簡(jiǎn)便、快速地獲得血小板聚集狀態(tài)，可用于評(píng)價(jià)血小板聚集功能，具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)，因而在過去幾十年中較為常見，然而其缺點(diǎn)也較為明顯，離心分離和其他步驟很可能會(huì)導(dǎo)致體外血小板活化，對(duì)血小板聚集不敏感，而且該方法重復(fù)性非常差，顯色樣品和血凝素樣品會(huì)影響濁度的結(jié)果，相同條件下與其他檢測(cè)方法相比需要更多的血液量才能完成檢測(cè)[7]。隨著全血法、流式細(xì)胞術(shù)等臨床新檢測(cè)技術(shù)的出現(xiàn)，該檢測(cè)方法的應(yīng)用也逐漸減少。2.1.2全血法檢測(cè)全血聚集儀檢測(cè)、血小板功能分析儀檢測(cè)和血小板計(jì)數(shù)法均為全血法檢測(cè)血小板聚集功能的重要手段。全血聚集儀可通過對(duì)血液電極間微小的電流或電阻變化而形成聚集曲線，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)患者血小板聚集功能的檢測(cè)，明文娟等[7]的研究通過采用全血聚集儀對(duì)新鮮血液中血小板進(jìn)行采集，發(fā)現(xiàn)該方法的優(yōu)點(diǎn)是血液不需要離心，因而檢測(cè)更為便利，然而相對(duì)光學(xué)聚集儀來說可能會(huì)花費(fèi)更長(zhǎng)的時(shí)間，且對(duì)于小聚集物交不敏感，電極安放環(huán)境需要更高的要求，故而對(duì)于臨床工作需求也相對(duì)更難滿足。血小板功能分析儀對(duì)于血小板功能障礙性疾病有良好的篩選能力，作為一次性反應(yīng)杯，內(nèi)有一層膜，膜上小孔，使得其可以對(duì)相關(guān)誘導(dǎo)劑進(jìn)行覆蓋，抗凝血如果能夠經(jīng)由小孔被吸出，則可通過計(jì)算“封閉時(shí)間”以反映血小板聚集速率[8-9]。血小板計(jì)數(shù)法可通過測(cè)量血小板數(shù)目的改變來對(duì)血小板聚集所花時(shí)間進(jìn)行測(cè)定，該方法對(duì)小樣品尺寸小團(tuán)聚體的形成敏感快速。王楠等[10]通過血小板計(jì)數(shù)法對(duì)小紅細(xì)胞性貧血患者內(nèi)血液樣本進(jìn)行檢測(cè)，并將其與電阻抗法及手工法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果顯示血小板計(jì)數(shù)法對(duì)于血小板聚集的檢測(cè)更具價(jià)值，相較于其余兩種檢測(cè)方法來說可以獲取更高的準(zhǔn)確度。然而在小聚集體快速形成，不能滿足僅有大血小板聚集體可測(cè)的形態(tài)，各時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行動(dòng)態(tài)計(jì)數(shù)器分析，通常在加合體劑30秒后開始，6分鐘結(jié)束，因而操作步驟相對(duì)來說較為復(fù)雜，缺少一定時(shí)效性[10]。2.1.3其他檢測(cè)方法散射性粒子子檢測(cè)法主要通過血小板在聚集過程中引起的光散射變化來對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，分別通過聚集塊大小生成數(shù)量來對(duì)血小板凝聚功能進(jìn)行檢測(cè)[11]。流式細(xì)胞術(shù)可通過探測(cè)器對(duì)每個(gè)細(xì)胞的熒光訊號(hào)和散射光進(jìn)行收集，并將其傳入計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)血小板聚集率的測(cè)量，這種方式使得標(biāo)本處理方式被簡(jiǎn)化，且具有較高的重復(fù)性和敏感性，但是由于檢測(cè)價(jià)格較為昂貴，還不能在臨床被大量使用[12]。2.2血小板活化功能檢測(cè)血小板的活化功能經(jīng)常通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，流式細(xì)胞術(shù)能夠敏感、特異性地檢測(cè)血液中的活化血小板并評(píng)估其功能。血小板活化狀態(tài)以及血小板應(yīng)答可以在全血中血小板糖蛋白的免疫熒光技術(shù)分析通過熒光和光散射特性鑒定血小板后確定。與靜態(tài)血小板相比，活化的血小板在膜糖蛋白上發(fā)生明顯變化，成為活化血小板的檢測(cè)標(biāo)志物。流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)點(diǎn)如下：（1）血小板可特異性檢測(cè)，不受其他類型細(xì)胞或片段干擾[13]。（2）分析單一或亞組血小板膜上活化標(biāo)志物的變化，結(jié)果真實(shí)客觀。該方法的缺點(diǎn)為檢測(cè)成本高，操作復(fù)雜。為了避免血小板體外活化，樣品需要在45分鐘內(nèi)處理。僅檢測(cè)循環(huán)血小板功能并不反映血管壁上血小板的激活和最近清除的血小板。3血小板檢測(cè)在各類疾病中的應(yīng)用3.1血小板檢測(cè)在糖尿病中的應(yīng)用糖尿病是當(dāng)前有著較多發(fā)病人群的代謝性疾病，當(dāng)糖尿病患者發(fā)生血管病變后就有可能使得血小板粘附增加、聚集并增強(qiáng)釋放反應(yīng)，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化，引起相關(guān)糖尿病并發(fā)癥的進(jìn)一步形成，而糖尿病患者并發(fā)癥的發(fā)生可能是由于相關(guān)因素引起的血小板粘附聚集有關(guān)。李海東等[14]的研究對(duì)2型糖尿病患者血小板體積與糖尿病性黃斑水腫的關(guān)系進(jìn)行研究，將160例研究對(duì)象分為四組，分別為健康對(duì)照組、有糖尿病無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變組、有糖尿病視網(wǎng)膜病變但無(wú)黃斑水腫組及有視網(wǎng)膜病變伴黃斑水腫組，結(jié)果顯示后兩組血小板體積明顯大于前兩組，故而得出結(jié)論，血小板體積增高參與了糖尿病視網(wǎng)膜病變及黃斑水腫的進(jìn)展，由于大體積的血小板所包含的活性物質(zhì)增多，其代謝能力旺盛，故而聚集功能也會(huì)明顯增強(qiáng)，甚至還有研究提出大體積血小板的膜可表達(dá)的糖蛋白受體數(shù)量增多，使得纖維蛋白原之間的親和力更強(qiáng)，故而更容易引起血小板粘附、聚集能力的增加，并引起血管相關(guān)變化，因而通過監(jiān)測(cè)血小板體積可幫助臨床醫(yī)師對(duì)糖尿病相應(yīng)并發(fā)癥的發(fā)生進(jìn)展進(jìn)行預(yù)測(cè)。同時(shí)，糖尿病患者血漿可在ADP或腎上腺素后提高正常人群血小板聚集；降糖時(shí)，血小板聚集和釋放也明顯不會(huì)有異常。高血糖引起血小板聚集及釋放能力增強(qiáng)，血小板處于激活狀態(tài)，可能是糖尿病患者發(fā)生心腦血管并發(fā)癥的機(jī)制之一。研究表明，高血糖可明顯增強(qiáng)血小板的粘附功能。影響血栓形成的因素之一是血小板的活化[15]。另外，臨床認(rèn)為血小板的改變也與胰島素抵抗存在明顯相關(guān)性，故而可通過對(duì)血小板進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)來了解患者糖尿病胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。胰島素抵抗期間產(chǎn)生的糖基化產(chǎn)物會(huì)改變血小板膜的流動(dòng)性。血小板膜蛋白糖基化程度與膜流動(dòng)性下降呈負(fù)相關(guān)，這表明糖基化程度越高，膜的流動(dòng)性越小，血小板的活化越容易。3.2血小板檢測(cè)在免疫炎癥反應(yīng)中的應(yīng)用一般情況下，血小板遇到一氧化氮或前列腺素等抑制劑時(shí)，其活性受到阻礙，身體外部循環(huán)顯示靜息狀態(tài)。許多炎癥疾病就會(huì)出現(xiàn)明顯的血小板活性增加或是單核細(xì)胞聚集增多，如炎癥性腸病患者中出現(xiàn)明顯的血小板活化。Kullaya等[16]的研究將呼吸道合胞病毒與血小板和單核細(xì)胞在體外共培養(yǎng)，認(rèn)為血小板可以內(nèi)化病毒顆粒，并使得單核細(xì)胞的干擾素α的分泌產(chǎn)生強(qiáng)化刺激，從而減少了病毒對(duì)于單核細(xì)胞的感染。在感染、炎癥、膿毒癥鄧冰中，血小板也通過多種機(jī)制發(fā)揮免疫防御作用，然而隨著病毒感染加劇，就會(huì)出現(xiàn)明顯血小板減少及出血傾向，因而近年來血小板數(shù)量夠、血小板平均體積、血小板活化水平等的改變也明顯對(duì)膿毒癥患者預(yù)后產(chǎn)生明顯的預(yù)測(cè)作用。還有研究認(rèn)為膿毒癥患者在基線未成熟血小板指數(shù)水平低時(shí)已經(jīng)可以對(duì)持續(xù)血小板減少和更高的死亡率進(jìn)行預(yù)示，從而幫助臨床醫(yī)師盡早采取相應(yīng)的措施對(duì)患者進(jìn)行救治，從而改善其最終預(yù)后結(jié)果。3.3血小板檢測(cè)在心血管疾病中的應(yīng)用心血管疾病的發(fā)生基礎(chǔ)為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化，而粥樣硬化的發(fā)生機(jī)制與動(dòng)脈內(nèi)皮、內(nèi)膜損傷、炎癥-纖維增生性反應(yīng)密切相關(guān)。凝血瀑布反應(yīng)的發(fā)生會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈管腔狹窄加劇，從而導(dǎo)致血小板消耗，最后，血小板分布幅度增加，不僅血小板數(shù)量增加，其活性也增加。應(yīng)激狀態(tài)下，皮質(zhì)醇和兒茶酚胺在血液中的釋放增加，產(chǎn)生骨髓抑制，反向調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞增殖和分化，加重細(xì)胞凋亡。在嚴(yán)重炎癥的狀態(tài)下，低淋巴細(xì)胞增多癥也可能發(fā)生。研究表明血小板幾乎參與了動(dòng)脈粥樣硬化的整個(gè)過程，血小板被認(rèn)為是不穩(wěn)定斑塊形成和急性冠狀綜合征發(fā)展的重要因素[17]。動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病被朱春梅等[18]人認(rèn)為與血小板體積有密切相關(guān)的作用，其通過對(duì)3081名18~80歲居民進(jìn)行隨訪調(diào)查，研究患者動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病被十年風(fēng)險(xiǎn)概率與血小板體積的作用，通過建立風(fēng)險(xiǎn)模型認(rèn)為兩者存在明顯正相關(guān)，因而認(rèn)為血小板體積的增加可明顯提高患者動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。此外，血流中各種細(xì)胞間的交聯(lián)和粘附也參與了一系列血栓的形成和炎癥的發(fā)展。循環(huán)血小板是中風(fēng)發(fā)展所有階段的一個(gè)非常重要的因素。3.4血小板檢測(cè)在腫瘤轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤患者發(fā)展至晚期的常見現(xiàn)象，也是加快患者死亡的重要原因，然而血小板在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用，腫瘤為環(huán)境內(nèi)，血小板可能受到刺激從而產(chǎn)生異常聚集現(xiàn)象，進(jìn)而幫助腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫逃逸，使得腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的存活率明顯提升。此外血小板還提供了腫瘤生長(zhǎng)所需的活性因子，從而促進(jìn)了腫瘤的轉(zhuǎn)移。通過對(duì)腫瘤患者血小板功能進(jìn)行檢測(cè)，可以對(duì)其腫瘤轉(zhuǎn)移活性進(jìn)行了解，有利于臨床醫(yī)師對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行預(yù)測(cè)，從而盡早采取相應(yīng)干預(yù)措施并制定合適的診療計(jì)劃。（這個(gè)應(yīng)用是為了干什么）王禾等[19]的研究通過小規(guī)模試驗(yàn)表明非小細(xì)胞肺癌患者早期會(huì)呈現(xiàn)血小板聚集功能異常狀態(tài)，而通過讓患者服用阿司匹林，可對(duì)環(huán)氧化酶進(jìn)行抑制，使得患者體內(nèi)循環(huán)中血小板數(shù)量和活性得到明顯減少，進(jìn)而使得血小板與腫瘤細(xì)胞間的相互作用進(jìn)行阻斷，從而進(jìn)一步降低腫瘤轉(zhuǎn)移的發(fā)生。血液中循環(huán)腫瘤細(xì)胞是腫瘤血行轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制，其數(shù)量多少和預(yù)后也有明顯關(guān)聯(lián)，既往研究從模型小鼠的血小板膜表面表達(dá)凋亡誘導(dǎo)配體進(jìn)行檢測(cè)，認(rèn)為豐富的血小板表達(dá)使得循環(huán)腫瘤細(xì)胞的血行加快，從而促進(jìn)其在小鼠體內(nèi)的轉(zhuǎn)移，因而對(duì)于人體腫瘤轉(zhuǎn)移的治療，也可考慮通過對(duì)血小板聚集活性進(jìn)行抑制的方式來降低腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)[20]。4重組人血小板生成素的應(yīng)用及發(fā)展當(dāng)前臨床研究認(rèn)為，重組人的血小板性素有利于增加中、重量骨髓，抑制患者血小板的數(shù)量，有助于恢復(fù)血小板。重組的血小板生成素是治療血小板減少癥的有效藥，孫少勤等[21]的臨床研究通過隨機(jī)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，觀察了110例血液惡性腫瘤患者的化學(xué)治療后血小板水平及炎癥因子水平，認(rèn)為重組人血小板生成素對(duì)于改善患者炎性水平，改善血小板計(jì)數(shù)均有良好效果，因而對(duì)其在血液腫瘤因化療所致血小板減少癥中有較為良好的作用，且不良反應(yīng)少，安全性良好。此外重組人血小板生成素還可應(yīng)用于膿毒癥、心血管疾病等重要疾病，可通過對(duì)血小板減少癥狀進(jìn)行有效抑制，從而使得血小板功能被調(diào)節(jié)，降低相關(guān)惡性事件，使得炎癥及相應(yīng)連鎖反應(yīng)能得到控制，進(jìn)而使得患者預(yù)后得到好轉(zhuǎn)，因而在當(dāng)前臨床使用中還有較為廣泛的應(yīng)用空間。重組人血小板生成素的藥理作用目前還比較單一，主要在增加血小板生成方面，另有研究對(duì)于心臟以及血管也有一定的保護(hù)作用。近年來，隨著血小板越來越多的關(guān)注，重組人凝血酶原酶的藥理學(xué)效應(yīng)研究不斷增加[22]。目前，重組人凝血酶原酶的研究正在進(jìn)行中，但其化學(xué)研究需要更深層次的進(jìn)展。5小結(jié)血小板作為人體血液內(nèi)細(xì)胞必不可少的構(gòu)成部分，對(duì)于當(dāng)前臨床醫(yī)師有較高的指導(dǎo)價(jià)值，本研究對(duì)血小板相關(guān)檢測(cè)方式進(jìn)行了闡述，認(rèn)為當(dāng)前主要從血小板聚集及活化功能兩方面來實(shí)現(xiàn)對(duì)血小板的檢測(cè)，主要檢測(cè)方式包括比濁法和全血法，此外，糖尿病、免疫炎癥反應(yīng)、心血管疾病、惡性腫瘤轉(zhuǎn)移等均可通過檢測(cè)血小板對(duì)其疾病進(jìn)展程度進(jìn)行反映，從而幫助臨床更好的治愈疾病。重組人類血小板生成素在當(dāng)前作為增加血小板生成的重要藥物，對(duì)于血液、免疫、神經(jīng)等各個(gè)系統(tǒng)均起到一定保護(hù)作用，但還需要臨床進(jìn)一步研究對(duì)其進(jìn)行觀察探討。

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