雙螢光素酶報告基因技術(shù)課件

雙螢光素酶報告基因技術(shù)21、靜念園林好，人間良可辭。22、步步尋往跡，有處特依依。23、望云慚高鳥，臨木愧游魚。24、結(jié)廬在人境，而無車馬喧；問君何能爾？心遠(yuǎn)地自偏。25、人生歸有道，衣食固其端。雙螢光素酶報告基因技術(shù)雙螢光素酶報告基因技術(shù)21、靜念園林好，人間良可辭。22、步步尋往跡，有處特依依。23、望云慚高鳥，臨木愧游魚。24、結(jié)廬在人境，而無車馬喧；問君何能爾？心遠(yuǎn)地自偏。25、人生歸有道，衣食固其端。ReportSmartly螢光素酶報告基因技術(shù)Promega自然界的螢光發(fā)光真菌發(fā)光節(jié)蟲6令發(fā)光海星發(fā)光甲殼蟲象感ReportSmartly螢光素酶報告基因技術(shù)Promega自然界的螢光發(fā)光真菌發(fā)光節(jié)蟲6令發(fā)光海星發(fā)光甲殼蟲象感自然界的螢光自然界的螢光螢火蟲報告基因的作用細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑啟動子/增強(qiáng)子受體結(jié)合病毒/細(xì)胞相互作用轉(zhuǎn)錄因子藥物誘導(dǎo)作用或”效果LuminescencevsFluorescence熒光FluorescenceFire螢光LuminescenceWorm螢光熒光(Bioluminescence(Fluorescence)口是化學(xué)發(fā)光(Chemilumi-nescence)口吸收來自光源的光,再發(fā)射的一種,激發(fā)能量來自化學(xué)反應(yīng)另一光子口螢光發(fā)光計(Luminometer)口熒光計(Fluorometer)液閃儀(ScintilationCounter)熒光顯微鏡電荷耦合裝置光學(xué)成像系統(tǒng)(CCDopiticalimagingsystem各種報告基因的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)報告基因優(yōu)點(diǎn)螢光素酶優(yōu)越的靈敏度·需要底物高信號值無內(nèi)源活性靈敏度好細(xì)菌,血清等內(nèi)源活性高需要底物GUS(葡糖醛酸糖·靈敏度好90%的Ecol,人/動物細(xì)胞中苷酶)植物中內(nèi)源活性低有內(nèi)源活性酶的擴(kuò)散可引起“過度報告需要底物SEAP(分泌性堿·分泌性報告基因(不需裂·在HeLa,癌和其它細(xì)胞類型性磷酸酶)中有高的內(nèi)源活性需要底物CAT(氯霉素轉(zhuǎn)乙真核細(xì)胞沒有背景表達(dá)·放射性的?；?易于使用靈敏度底設(shè)備現(xiàn)成(液閃儀層析)·50h半衰期GFP(綠色熒光蛋·顯微鏡:亞細(xì)胞定位背景可能高白不需底物折疊“情形”可導(dǎo)致信號差別螢光素酶報告基因的主要優(yōu)點(diǎn)非放射性檢測快(比cAT等)靈敏度高(可比CAT檢測靈敏度高100倍)半衰期短(在理想條件下,可檢測到10-20摩爾的螢光素酶分子。在哺乳動物細(xì)胞中半衰期3小時,在植物細(xì)胞中半衰期35小時。而CAT在哺乳動物細(xì)胞中的半衰期約50小時)線形范圍廣(在10-16M(10pgL)至108M(1mg/L)范圍內(nèi),光強(qiáng)度與螢光素酶濃度成正比般比顯微鏡檢測的熒光更靈敏(對多孔板而言)生物螢光比熒光更穩(wěn)定,因?yàn)樽匀唤邕M(jìn)化的酶能保護(hù)光子發(fā)射器通過基因工程可以延伸生物螢光的性能和能力螢光素酶報告基因的使用原理制備含有l(wèi)c/Ruc的DNA。調(diào)節(jié)序列}提供刺激測量螢光56、書不僅是生活，而且是現(xiàn)在、過去和未來文化生活的源泉?！獛旆ㄒ?/p>

57、生命不可能有兩次，但許多人連一次也不善于度過?！獏蝿P特

58、問渠哪得清如許，為有源頭活水來?！祆?/p>

59、我的