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文檔簡介

DNA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片斷課題2一、DNA分子復(fù)制的過程參與的組分在DNA復(fù)制中的左右解旋酶打開DNA雙鏈DNA母鏈提供DNA復(fù)制的模板4種脫氧核苷酸合成子鏈的原料DNA聚合酶催化合成DNA子鏈引物使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸二、PCR原理PCR參與的組分在DNA復(fù)制中的作用高溫變性解旋酶打開DNA雙鏈DNA母鏈提供DNA復(fù)制的模板4種脫氧核苷酸合成子鏈的原料Taq酶（耐高溫）DNA聚合酶催化合成DNA子鏈15-30個核苷酸構(gòu)成DNA或RNA單鏈引物使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸DNA雙鏈反向平行3’5’5’基本單位ATGCATGC3’3’5’5’實驗操作步驟：（準(zhǔn)備）按配方將所需試劑擺放在實驗桌上（移液）用微量移液器按配方在微量離心管中依次加入各組分（混合）蓋嚴(yán)離心管口的蓋子，用手指輕輕彈擊管壁（離心）將微量離心管放在離心機(jī)上（反應(yīng)）將離心管放入PCR儀上，設(shè)置好PCR儀的循環(huán)程序

反應(yīng)周期高溫變性低溫退火適溫延伸反應(yīng)循環(huán)數(shù)：擴(kuò)增倍數(shù)：106--10925--305/3/G—GT—C3/5/G—AC—C5/3/A—G引物Ⅰ5/3/G—G引物Ⅱ變性復(fù)性延伸復(fù)制過程5/3/G—GT—C5/3/G—GT—C5/3/G—A引物Ⅰ5/3/G—A引物Ⅰ5/3/G—G引物Ⅱ5/3/G—A引物Ⅰ3/

3/5/G—AC—C3/5/G—AC—C5/3/G—G引物Ⅱ5/3/G—G引物Ⅱ

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